Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Maravilla |
Наверняка здесь есть люди, которые выделяют нейтрофилы из крови. Скажите, пожалуйста, декстраном какой фирмы вы пользуетесь? Я работала с декстраном T-500 фирмы Pharmacosmos, но потом он кончился, а заказать его оказалось делом непростым. Посему мы заказали декстран фирмы Sigma, но он оказался нехорош: нейтрофилы выделялись сильно предактивированные (плавали комочками), а потом мы померили эндотоксины в нём - их оказалось очень много. |
Guest IP-штамп: frBp13I6uCA8o гость |
5510 0500 9007 dextran.net попытки использовать что-либо другое, включая ту же фирму, но производство американское приводили к неудаче. Покупается только прямым заказом на фирме: Pharmacosmos sells and ships directly to clients everywhere in the World.
|
Guest IP-штамп: fr4WUqQEiC1l2 гость |
|
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
(Guest @ 09.04.2016 00:45) Есть, конечно Например: |
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
И статейка в помощь |
Maravilla |
(Guest @ 09.04.2016 02:45) Есть. Но получается хуже, чем методом с декстраном. |
Maravilla |
(Guest @ 08.04.2016 20:22) T-500 фирмы Pharmacosmos 5510 0500 9007 dextran.net попытки использовать что-либо другое, включая ту же фирму, но производство американское приводили к неудаче. Покупается только прямым заказом на фирме: Pharmacosmos sells and ships directly to clients everywhere in the World. Никогда не заказывала напрямую у фирмы. Скажите, пожалуйста, насколько это проблематичнее, чем заказ у посредников. Придётся самолично всё растамаживать или что там ещё положено делать? |
Guest IP-штамп: frBp13I6uCA8o гость |
(Maravilla @ 11.04.2016 11:42) Никогда не заказывала напрямую у фирмы. Скажите, пожалуйста, насколько это проблематичнее, чем заказ у посредников. Придётся самолично всё растамаживать или что там ещё положено делать? увы, ничем не могу помочь. Мы с Вами в разных экономических реальностях. Слово “растамаживать“ мне незнакомо, а “самолично“ сводится к одному клику при покупке по корпоративной кредитке. |
Guest IP-штамп: frBp13I6uCA8o гость |
(Дядя ФАКСер @ 10.04.2016 11:54) Или вот, на сортере (см. трэд) И статейка в помощь дело в том, что нужно выделить живые неактивированные нейтрофилы. А активируются они даже от косого взгляда. Какой там сортер ... |
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
|
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
|
Леонид В Постоянный участник Квебек |
(Дядя ФАКСер @ 11.04.2016 13:38) Читайте внимательнее, коллега, информацию по ссылкам, особенно первой....Selection of untouched neutrophils дык, ентоть, там читай — не читай, а они всё равно активируются от чего угодно. В том числе и от чтения вслух иначе чем шепотом. Уж от сортера это вообще “труба“ Не говоря о том, что для вестернов нужны тонны нейтрофилов. Такое никакой сортер не потянет. В наших краях нейтрофилы это стандартная сумка крови (500 мл) на эксперимент. Нет, выделение нейтрофилов с целью их последующей культивации, да еще на предмет тестирования активности ферментов задействованных в передаче активационного сигнала это очень, ну очень нежная вещь.
|
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
|
Леонид В Постоянный участник Квебек |
(Дядя ФАКСер @ 11.04.2016 14:30) ну как ... передача сигнала, фосфориляция 5 - 7 киназ в динамике, ингибиторы там, туда-сюда ... словом без вестерна никак. |
Guest IP-штамп: fr4WUqQEiC1l2 гость |
(Леонид В @ 12.04.2016 00:37) ну как ... передача сигнала, фосфориляция 5 - 7 киназ в динамике, ингибиторы там, туда-сюда ... словом без вестерна никак. ....А Вы тоже на Декстране выделяете нейтрофилы из 500 мл крови? |
Леонид В Постоянный участник Квебек |
(Guest @ 11.04.2016 18:13) угу |
Guest IP-штамп: fr4WUqQEiC1l2 гость |
(Леонид В @ 12.04.2016 07:52) ...оптимистично и с изрядной долей пафоса ответил Леонид В - |
Дядя ФАКСер moderator Nothern Maccaronia, Ticinum |
(Леонид В @ 11.04.2016 23:37) ну как ... передача сигнала, фосфориляция 5 - 7 киназ в динамике, ингибиторы там, туда-сюда ... словом без вестерна никак. PhosFlow не? Или киназный чип? |
Леонид В Постоянный участник Квебек |
(Дядя ФАКСер @ 12.04.2016 13:22) не знаю ... чип наверное мог бы подойти, но у нас как-то пока не сильно чипуют, даже в сильных лабах. А PhosFlow могло бы пойти, но антитела бывают разные. Одни хорошо идут “однополосно“, а с другими только мол. масса и спасает, потому как еще дюжина полос на мембране. Поэтому когда идет изучение “какие киназы вовлечены“? то лучше оставаться на вестерне, чем рисковать с PhosFlow (только Вы никому не говорите, пожалуйста, что однажды я высказался в том духе, что цитометрия в чем-то может уступать какому-то иному подходу)
|
Guest IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2 гость |
(Maravilla @ 11.04.2016 11:40) Separation may also be unsuccessful if the blood donor has consumed alcohol or medications in the 72 hours prior to blood collection. |
Леонид В Постоянный участник Квебек |
(Guest @ 27.04.2016 06:18) Separation may also be unsuccessful if the blood donor has consumed alcohol or medications in the 72 hours prior to blood collection. да, это так Донор, пришедший сдавать на нейтрофилы подвергается ряду дополнительных вопросов типа: В последние два дня пили? Плясали? Зубы не болят? Насморка (Боже упаси аллергического) нет? итд Это в дополнении к целому листу вопросов заранее, просто, чтоб в доноры записаться. Иначе вся работа многочасовая идет насмарку. |
Guest IP-штамп: frFiFRA53ON0U гость |
(Леонид В @ 27.04.2016 17:48) да, это так Донор, пришедший сдавать на нейтрофилы подвергается ряду дополнительных вопросов типа: В последние два дня пили? Плясали? Зубы не болят? Насморка (Боже упаси аллергического) нет? итд Это в дополнении к целому листу вопросов заранее, просто, чтоб в доноры записаться. Иначе вся работа многочасовая идет насмарку. |
Guest IP-штамп: frFiFRA53ON0U гость |
(Maravilla @ 08.04.2016 14:37) Здравствуйте! Наверняка здесь есть люди, которые выделяют нейтрофилы из крови. Скажите, пожалуйста, декстраном какой фирмы вы пользуетесь? Я работала с декстраном T-500 фирмы Pharmacosmos, но потом он кончился, а заказать его оказалось делом непростым. Посему мы заказали декстран фирмы Sigma, но он оказался нехорош: нейтрофилы выделялись сильно предактивированные (плавали комочками), а потом мы померили эндотоксины в нём - их оказалось очень много. никогда не выделял окислительный взрыв на протоке всегда делал на цельной крови |
Guest IP-штамп: frFiFRA53ON0U гость |
(Guest @ 27.04.2016 19:42) елементарно отличается сепсис от несепсиса |
Guest IP-штамп: frFiFRA53ON0U гость |
(Леонид В @ 27.04.2016 17:48) да, это так Донор, пришедший сдавать на нейтрофилы подвергается ряду дополнительных вопросов типа: В последние два дня пили? Плясали? Зубы не болят? Насморка (Боже упаси аллергического) нет? итд Это в дополнении к целому листу вопросов заранее, просто, чтоб в доноры записаться. Иначе вся работа многочасовая идет насмарку. капля крови форболовый ефир и дигидроетидин и не нуно никаких опросов |
Леонид В Постоянный участник Квебек |
(Guest @ 27.04.2016 12:59) весьма ценное замечание при выделении неактивированных нейтрофилов тоннами для изучения молекулярных процессов активации. |
Xiomai Москва, Россия |
|
« Предыдущая тема · Клеточные технологии · Следующая тема » |