Все форумы > Клеточные технологии > версия для печати
Web-адрес темы: http://molbiol.ru/forums/index.php?s=1bd0a0c727de7ff72a3f6e268ecd5fdc&act=ST&f=66&t=588203
Web-адрес темы: http://molbiol.ru/forums/index.php?s=1bd0a0c727de7ff72a3f6e268ecd5fdc&act=ST&f=66&t=588203
Как клетки подсчитать?
Леонид В 23.10.2018 20:10
Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность)Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ?
Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо.
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
Дядя ФАКСер 24.10.2018 11:56
Сортером положить- никак?Дядя ФАКСер 24.10.2018 12:02
Вручную, точность "посадки" будет +/-6 клеток (в самом идеальном случае, без учета ошибки пипеточной и прочего). Так что "положить именно 300 клеток" не получитсяЛеонид В 25.10.2018 04:34
(Дядя ФАКСер @ 24.10.2018 05:02)
Вручную, точность "посадки" будет +/-6 клеток (в самом идеальном случае, без учета ошибки пипеточной и прочего). Так что "положить именно 300 клеток" не получитсяда кабы +/-6 я б от радости плясал. У меня, если в разные дни посмотреть, +/- 60 и больше.
Вот и думаю, может какие тайные приёмы есть, а я только в камеру дышать перед притиранием умею.
Например, что лучше: два раза забрать по 10 ul и в трипанку, и считать или один раз 20, в трипанку и две камеры заправить. По науке вроде второе?
А сортером и прочее — никак. Только старым казачьим.
dan14444 25.10.2018 21:49
А собственно, почему не сортером? Неужели ни один софт не позволяет ограничить сортировку на 300 событий?На крайний случай - берём совсем разбавленную суспенизю, фигачим со скорстью одна клетка в пару секунд, смотрим на счётчик и вручную останавливаем?...
Дядя ФАКСер 25.10.2018 21:58
(Леонид В @ 25.10.2018 03:34)
да кабы +/-6 я б от радости плясал. У меня, если в разные дни посмотреть, +/- 60 и больше.Ну дык, ручками же.
Чего мучаться,коли сортер в фасилити есть с опцией разброса в планшеты. Хотя,конечно,в режиме single cell sorting примерно 70-80% клеток (в мусор,при отсеве по маске),но зато в каждой лунке будет именно столько,сколько требуется.
dan14444 25.10.2018 21:59
Можно и самодельный собрать из говна и палок: капиллярчик, EOF для прокачки, лазерная указка и USB-микроскопчик для детекции... софтинка, читающая события прямо с экрана и вырубающая напругу по счётчику. Возни на пару месяцев.Ну или глазками, под микроскопом плывущие по капиллярчику отсчитать, если надо всего несколько раз.
Дядя ФАКСер 25.10.2018 22:00
Дык,дело то не посчитать,а раскидать 
Дядя ФАКСер 25.10.2018 22:01
(Леонид В @ 25.10.2018 03:34)
А сортером и прочее — никак. Только старым казачьим.
Почему?
dan14444 25.10.2018 22:10
Дык,дело то не посчитать,а раскидать smile.gif
Ну дык я и описал "раскидывалку", а не "считалку" ). Если из лунки в лунку ручками конец капилляра и электрод переносить лень - добавляем любой автосэмплер...Ну и если глазками смотреть - как 300 насчитал, так капилляр перенёс или поток остановил
Леонид В 26.10.2018 00:29
(Дядя ФАКСер @ 25.10.2018 15:01)
Почему? по причинам не имеющим ничего общего с наукой (бывает и так)
Но надо!
Бывает что с 11 до полудня раскапаю клеточки в луночки сортером по 423, например, на лунку, помою его родимого, зачехлю . А с 17 до 18 распихиваю по 300 в лунку ручками
вспомнил еще что надо обязательно потрясти камеру кверху тормашками перед заправлением в нея суспензии. Стекло не должно падать.
А еще не дай Бог задеть стекло наконечником когда заправляешь клетки.
Но больше пока ничего не вспоминается.
Ладно, раз никто не помнит, пойду гуглить GMP при работе с гемоцитометром.
Guest 22.09.2019 10:42
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10)
Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность)Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ?
Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо.
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
леня если в камере гаряева зыркаеш 10 000 клетков усе ОК
Guest 22.09.2019 10:48
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10)
Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность)Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ?
Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо.
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно
если ручонки из жопы растут то да
Guest 22.09.2019 10:54
[quote=Леонид В,23.10.2018 20:10] Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность)Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ?
Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо.
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
[/quote]
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
[/quote]
придурок дыхни паром на стекло прикрасно притрется
Guest 22.09.2019 11:00
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10)
Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность)Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ?
Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо.
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
леня вам похоже на Тихорецкий 4 в Питере в Институт Цитологии или в кащенку в Москве
Guest 22.09.2019 11:04
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10)
Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность)Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ?
Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо.
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
Guest 15.11.2019 06:01
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10)
Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность)Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ?
Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо.
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
у биорада есть куевина считает с трипановым синим под стиклом живых и дохлых
Guest 15.11.2019 06:06
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10)
Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность)Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ?
Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо.
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
TC20™ Automated Cell Counter #1450102 | Научные...
bio-rad.com›ru-ru/sku/1450102-tc20…cell-counter…
Copyright © 2019 Bio-Rad Laboratories, Inc. Все права защищены. Научные исследования. ... TC20™ Automated Cell Counter. 120–240 V, includes instrument, power supply, USB flash drive, 30 dual-chamber counting slides (60 counts), 1.5 ml trypan blue. 1450102 [x-forwarded-proto] = [https] [x-forwarded-port] = [443]... Читать ещё
Guest 15.11.2019 06:13
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10)
Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность)Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ?
Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо.
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
ну не знаю биорадовский ТЦ20 нормально куячит без притирки Фукса Розенталя
Guest 15.11.2019 06:20
(Леонид В @ 23.10.2018 20:10)
Подсчет клеток в гемоцитометре (Камера Горяева) замечательная вещь, однако, по странному стечению обстоятельств не могу использовать ничего кроме (счетчики итд итп). И при этом нужно положить в лунку именно 300 клеток. Желательно ни одной больше ни одной меньше, а главное 300 сегодня должны быть равны 300 вчера (вот с этим наибольшая трудность)Одним словом вопрос. Кто какия знает дедушкины хитрости, чтобы повысить точность подсчета ?
Сейчас добавляю 10 ul суспензии в 5 ul трипанки, пипетерую и считаю. Всё это дважды, независимо.
Камера “притирается“ (кольца Ньютона на наших камерах увидеть невозможно, но стараюсь как могу притереть. Покровное стекло родное, толстое)
CowDoc 26.11.2019 11:16
Стараюсь все на автоматы перевести, от ММ, TF, GE, Hamiltona, чтобы чел.фактор снизить. А тем более интегрировать в биоферментеры при масштабировании.CowDoc 04.12.2019 09:43
Сейчас рутину боксовую на вот эти изделия пытаюсь перевести Scepter™ 2.0 Cell Counter, с взаимозаменяемыми ячейками. Посмотрю как приживутся. Разница в цене в РФ, и у нас в Африке различается в два раза. Любят себя торгаши нашенские очень. А со следующего года, еще и софт бярястовый заставят ставить 
Картинки:
Дядя ФАКСер 10.12.2019 19:02
(CowDoc @ 04.12.2019 08:43)
Сейчас рутину боксовую на вот эти изделия пытаюсь перевести Scepter™ 2.0 Cell Counter, с взаимозаменяемыми ячейками. Посмотрю как приживутся. Разница в цене в РФ, и у нас в Африке различается в два раза. Любят себя торгаши нашенские очень. А со следующего года, еще и софт бярястовый заставят ставить Cкптр- неточные, к сожалению. ViCell лучше
CowDoc 11.12.2019 09:41
(Дядя ФАКСер @ 10.12.2019 19:02)
Cкптр- неточные, к сожалению. ViCell лучшеЯ понимаю, но с моими "специалистами" % ошибки аппарата, всяко меньше, чем они в камере считают. Для рутины подойдет. У меня нет такой строгой задачи как для клонирования. Пролиферация клеток и расчет MOI - заражающей дозы. Производство (((
Guest 11.12.2019 14:11
(CowDoc @ 11.12.2019 09:41)
Я понимаю, но с моими "специалистами" % ошибки аппарата, всяко меньше, чем они в камере считают. Для рутины подойдет. У меня нет такой строгой задачи как для клонирования. Пролиферация клеток и расчет MOI - заражающей дозы. Производство ((("чем они в камере считают" ©
опечатка по Фрейду
Guest 11.12.2019 14:16
(CowDoc @ 11.12.2019 09:41)
Я понимаю, но с моими "специалистами" % ошибки аппарата, всяко меньше, чем они в камере считают. Для рутины подойдет. У меня нет такой строгой задачи как для клонирования. Пролиферация клеток и расчет MOI - заражающей дозы. Производство (((
CowDoc 12.12.2019 09:27
(Guest @ 11.12.2019 14:16)
Этой статье, 100 лет в обед!
И поверьте, биолог 100% может, и даже телевизор )))
В свое время были ФОПЭ при ВУЗах, даже биологических. Как альтернативная профессия, и обучались, совершенно for free
CowDoc 26.01.2020 13:16
(Дядя ФАКСер @ 10.12.2019 19:02)
Cкптр- неточные, к сожалению. ViCell лучшеДа, согласен, очень не точный. И откалибровать пока не могу.
Полное разочарование
Надеюсь Гамильтоновский будет лучше работать. И буду заказывать ViCell
Guest 21.02.2020 00:55
(CowDoc @ 26.01.2020 13:16)
Да, согласен, очень не точный. И откалибровать пока не могу.Полное разочарование
Надеюсь Гамильтоновский будет лучше работать. И буду заказывать ViCell
"И буду заказывать ViCell" ©
докыч счастливого полета
Guest 21.02.2020 00:57
(CowDoc @ 12.12.2019 09:27)
Этой статье, 100 лет в обед!И поверьте, биолог 100% может, и даже телевизор )))
В свое время были ФОПЭ при ВУЗах, даже биологических. Как альтернативная профессия, и обучались, совершенно for free
докыч скока телевизорофф пачинил в ебипте
Guest 21.02.2020 01:23
(CowDoc @ 12.12.2019 09:27)
Этой статье, 100 лет в обед!И поверьте, биолог 100% может, и даже телевизор )))
В свое время были ФОПЭ при ВУЗах, даже биологических. Как альтернативная профессия, и обучались, совершенно for free
Ю. Лазебник
МОЖЕТ ЛИ БИОЛОГ ПОЧИНИТЬ РАДИОПРИЁМНИК, ИЛИ
ЧТО Я ПОНЯЛ ИЗУЧАЯ АПОПТОЗ*
Колд Спринг Харбор Лаборатори, Колд Спринг Харбор, Нью Йорк 11724, США
(Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY 11724). E-maill: lazebnik@cshl.org
докыч ваамщето Юра Лазебник професор в колд спринг харборе
а ты ремонтер телевизоров
Guest 26.02.2020 02:27
(Дядя ФАКСер @ 10.12.2019 19:02)
Cкптр- неточные, к сожалению. ViCell лучшедядя висел для психов которые мерют ДОЗОВЫЕ КРИВЫЕ в 96 луночных плашках трипановым
выживаемоисть клетков от передозировки аспирина
Guest 26.02.2020 19:42
CowDoc 15.02.2021 15:18
Смотрю уже Scepter™ 3.0 Cell Counter версия появилась. А я еще от 2ой не сдыхаюсь )))Powered by Invision Power Board (http://www.invisionboard.com)
© Invision Power Services (http://www.invisionpower.com)