Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Определение концентрации белка на 3ММ -- comments to a permanent page of the site --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Тема связана с: Окрашивание белка на 3MM
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Forum robot
Постоянный участник
на сервере в Москве



 прочитанное сообщение 20.12.2005 00:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Комментарии к постоянной странице сайта: Определение концентрации белка на 3ММ

Наиболее удобный метод, когда речь идет об оценке концентрации белка в большом количестве образцов (например, фракции с колонки). Окраска 2 микролитровых пятнышек детектируется и заметно изменяется в диапазоне 10ng - 10 микрограмм (для BSA).
Гость
IP-штамп: frUc3IzHqMYlk
гость



 прочитанное сообщение 29.03.2006 11:23     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Здравствуйте. Можно узнать поподробнее, что-такое ЗММ бумага? Заинтересовался методом потому, что до этого определял белок по Брэдфорду - попотеть пришлось. Образцов обычно много, вот и думаю, что может на этот метод перейти. Тем более что слишком точная концентрация мне не нужна.
Участник оффлайн! Павел
Постоянный участник
Новосибирск



 прочитанное сообщение 29.03.2006 11:37     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

ватман такой.
Гость
IP-штамп: frUc3IzHqMYlk
гость



 прочитанное сообщение 29.03.2006 11:52     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Просто ватман, или какой-то специальный, который предназначен именно для этих целей? И если не трудно, можно ли узнать поподробнее про способ нанесения образцов на этот самый ватман.
Участник оффлайн! Re
Участник



 прочитанное сообщение 29.03.2006 14:11     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Плотная фильтровальная бумага. Наносить каплей из носика автоматической пипетки.
Удобнее - держать на столе на белом фоне иммунологическую плашку с раскапанным раствором по Брэдфорду и капать с колонки аликвот в ячейку. Чем больше белка, тем синее. Соотношение объемов краска/белок подбирается эмпирически.
ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 29.03.2006 15:55     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

На самом деле любая фильтровашка, промокашка, салфетка и даже подтирка. Лишь бы воду впытывала номально.

---Удобнее - держать на столе на белом фоне иммунологическую плашку с раскапанным раствором по Брэдфорду и капать с колонки аликвот в ячейку

Удобнее, но промокашка незаменима, если в растворе с белком содержатся вещества мешающие определению по Брэдфород, например меркаптоэтанол.
Гость
IP-штамп: frUc3IzHqMYlk
гость



 прочитанное сообщение 10.04.2006 08:07     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

Скажите, а не кто не пробовал определить концентрацию белка в спектрофотометре прогнав там эту самую иммунологическую плашку? Ведь, в принципе, можно же установив длину волны 595, раскапать белковый преперат, покрасить Кумасси и прогнать? Просто, как вспомню как я этот белок определял (20-25 образцов, да несколько повторов).
Гость
IP-штамп: frUc3IzHqMYlk
гость



 прочитанное сообщение 10.04.2006 08:12     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

Кстати, а ведь, наверное, можно подобным образом и концентрацию хлорофилла определять? Но это при условии, что в лаборатории есть АИФ. Кто что по этому поводу думает?
Гость
IP-штамп: frUc3IzHqMYlk
гость



 прочитанное сообщение 10.04.2006 10:26     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Пардон, народ, за наивные предположения. Во всем разобрался. К сожалению, на нашем АИФе невозможно промерить белок и хлорофилл потому, что измерения при длинах волн 595, 665 и 649 не предусмотрены. Жаль.
ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 10.04.2006 12:12     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

Ну вы блин даете все так делают. В плашках. Ну и что.
Участник оффлайн! Arc
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 12.04.2006 12:29     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

а еще проще- накапать белок на нитроцеллюлозу и покразить Amido Black, естественно, с калиброванным контролем типа BSA. +/- 1,5 раза концентрацию даст точно- с той же погрешностью, что и Кумасси по Брэдфоорд, ибо принцип окрашивания тот же
Гость
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 30.11.2006 15:54     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

Метода Брэдфорд - ацтой! BCA rulez!
Участник оффлайн! ASolov




 прочитанное сообщение 01.12.2006 11:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

(Гость @ 30.11.2006 12:54)
Ссылка на исходное сообщение  Метода Брэдфорд - ацтой! BCA rulez!


LOL lol.gif
Guest
IP-штамп: frKOT2RiPkW0g
гость



 прочитанное сообщение 24.11.2009 13:03     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

здравствуйте! подскажите, пожалуйста хочу покрасить мембрану после переноса, проверить как перенеслись белки с геля(12,5% PAAG). есть кумасси раствор,которым крашу гель, технология такая же? отмывать потом мембрану также 10% уксусной?
Участник оффлайн! Andrew
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 24.11.2009 13:31     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

Окрашивать нужно пунцовым С, как описано здесь: http://molbiol.ru/protocol/17_08.html
Участник оффлайн! Вера
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 24.11.2009 13:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

(Гость @ 29.03.2006 09:52)
Ссылка на исходное сообщение  Просто ватман, или какой-то специальный, который предназначен именно для этих целей? И если не трудно, можно ли узнать поподробнее про способ нанесения образцов на этот самый ватман.



Бумага любая, лишь бы впитывала и не расползалась при отмывке (фильтровалка не очень годится).
Носиком в предварительно обозначенные карандашом точки- 2-3 мкл из соответствующей пробирки. Хорошо высушить (обязательно!)

Окунуть на несколько секунд в стардартный раствор Кумасси R250 для окрашивания белковых ПААГ.
Промывать под сильной струей ХОЛОДНОЙ воды до исчезновения синего фона. Остаются синие пятна соответствующей интенсивности на голубоватом фоне.

(После просущивания становится видно хуже, лучше смотреть мокрую после отмывки).

Сообщение было отредактировано Вера - 24.11.2009 13:55

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 18.01.18 10:54
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft