Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* РНК
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! polosataya
Участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 16.06.2012 12:46     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Уважаемые коллеги!

поделитесь, пожалуйста, опытом
сколько может сохраняться РНК, если ткань гомогенизировать в буфере с гуанидином (по Хомчински)?
РНК нужна для ОТ-ПЦР

P.S.: про RNA Later я в курсе

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Statin
Участник оффлайн! petr
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 16.06.2012 18:09     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

А хранить то как потом собираетесь? при комнатной Т? на -20? на -80?
Участник оффлайн! Statin
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 16.06.2012 21:39     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Под спиртом при -80 у меня хранилась 10 лет и была хорошего качества. Можно в растворе при -80 желательно с ингибитором, тоже годами.
Guest
IP-штамп: frfy/PJuS5FO2
гость



 прочитанное сообщение 17.06.2012 02:42     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

В сушильном шкафу можно недолго хранить... Вопрос ст***во - сколько весит килограмм гвоздсй, если у телеги отвалилась подкова.
Участник оффлайн! Statin
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 17.06.2012 06:46     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

(polosataya @ 16.06.2012 13:46)
Ссылка на исходное сообщение  Уважаемые коллеги!

поделитесь, пожалуйста, опытом
сколько может сохраняться РНК, если ткань гомогенизировать в буфере с гуанидином (по Хомчински)?
РНК нужна для ОТ-ПЦР

P.S.: про RNA Later я в курсе

Цветочек случайно добавил,
RNALater, если вы в курсе, нужен не для сохранения выделенной РНК, а для сохранения РНК в ткани до ее выделения. Сохраняете ткань. Поэтому, как правильно заметил предыдущий оратор, вопрос и прозвучал как "Что делать дядьке в Киеве, если в огороде растет бузина". Для сохранения РНК важно не то, в каком буфере вы будете гомогенизировать, а то как хранилась ткань до выделения. Если в ткани РНКу вы уже похерили, то никакой "Хомчински" или др. вам не помогут.
Хранение РНК стандарт: -80, расвор с ингибитором, или под спиртом, перевозить можно под изопропанолом, даже при комнатной температуре, но не долго. В лиофилизированном виде не пробовал, но говорят можно, правда лучше, наверно, использовать какие-нибудь спец фильтры (не знаю).
Участник оффлайн! Serg900
Участник



 прочитанное сообщение 17.06.2012 11:37     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

Хранил супернатант гомогената из раздавленных в тризоле мух перед ОТ-ПЦР до 2 месяцев при -20С. Цикл разгорания реакции для таких проб не смещался при сравнении со свежими вариантами.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): polosataya
Участник оффлайн! RNK
Постоянный участник
СССР



 прочитанное сообщение 17.06.2012 17:14     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

РНК не сохраняется в буфере с гуанидином, долго, при комнатной температуре или ниже. Лучше сразу выделять и РНК осаждать в этаноле.
Замораживание гематогена на -20...-80С, в принципе, позволяет сохранить РНК на долго.
Вы сами можете посмотреть, что с РНК после такого хранения. Разные ткани ведут себя по разному.
RNALater, тоже не панацея. Опять, важна какая ткань и как она пропитывается насыщенным раствором сульфатом аммония.
Участник оффлайн! polosataya
Участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 18.06.2012 09:44     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

(Statin @ 17.06.2012 04:46)
Ссылка на исходное сообщение  Цветочек случайно добавил, 
RNALater, если вы в курсе, нужен не для сохранения выделенной РНК, а для сохранения  РНК в ткани до ее выделения. Сохраняете ткань. Поэтому, как правильно заметил предыдущий оратор, вопрос и прозвучал как "Что делать дядьке в Киеве, если в огороде растет бузина". Для сохранения РНК важно не то, в каком буфере вы будете гомогенизировать, а то как хранилась ткань до выделения. Если в ткани  РНКу вы уже похерили, то никакой "Хомчински" или др. вам не помогут.
Хранение РНК стандарт: -80, расвор с ингибитором, или под спиртом, перевозить можно под изопропанолом, даже при комнатной температуре, но не долго. В лиофилизированном виде не пробовал, но говорят можно, правда лучше, наверно, использовать какие-нибудь спец фильтры (не знаю).

спасибо за ответ
ткань до погружения в тризол будет из свежего насекомого. человек, который будет мне ее передавать максимум сто может, так это порезать ма-а-алекнького насекомца ножницами и сделать гомогенат
как показала практика, сульфат аммония и rna later проникают внутрь плохо. соответственно и с РНК беда
поэтому и возник вопрос, нельзя ли сунуть в тризол до выделения
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 18.06.2012 10:26     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Все протоколы по хранению ТКАНЕЙ для последующего выделения РНК нужно ликвидировать. А выделенную РНК рекомендую хранить ПОД СПИРТОМ при -70-80 оС. Это если надо хранить надолго...
А при повседневной работе - в холодильнике (4-8 оС), но в присутствии избытка ингибитора РНК-аз. 0,5-1,0 ед. на мкл. В течении нескольких недель с РНК никаких проблем yes.gif . Ингибитор работает до замораживания и в неспиртовой среде. no.gif
пы.сы: полезно иногда проводить поиск в форуме по теме... umnik.gif
Guest
IP-штамп: frfy/PJuS5FO2
гость



 прочитанное сообщение 18.06.2012 15:47     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

У Вас нет РНК.
Участник оффлайн! RNK
Постоянный участник
СССР



 прочитанное сообщение 18.06.2012 17:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

Чистая РНК прекрасно хранится в 1хТЕ, рН 7.0 в любых условиях, в том числе и при комнатной температуре, если не лазить перчатками или пальцами в пробирку.
РНК растворяют при +55...+65 С, в течение 20-30 минут в 1хТЕ и без всяких ингибиторов РНКаз.
Можно полностью инактивировать РНКазы в растворе 10мМ DTT при растворении РНК при +55 С.

РНК хорошо сохраняется в осадке после осаждения из раствора LiCl (равный объем 10М LiCl к раствору РНК в 1хТЕ).

Обычно, весь ажиотаж, о нестабильности РНК берёт своё начало давно, когда всего боялись и неаккуратно работали. Никаких РНК ингибиторов и прочего не нужно, даже при синтезе кДНК.
Работать с РНК как с ДНК. Пробирки чистые, и кончики тоже, всё остальное - надуманно.

РНК будет разрушаться в ткани, которую держат в растворе с гуанидином, но это не связано с активностью РНКаз. Даже на -20 С, РНК постепенно разрушается в лиз-растворе.

Если нет возможности выделить сразу РНК, то ткань лучше измельчить с в растворе с 4М гуанидинтиоционатом, и быстро доставить куда вам нужно. Но РНК будет постепенно деградировать.

Сообщение было отредактировано RNK - 18.06.2012 18:48
Guest
IP-штамп: fr0OYJiGAYajU
гость



 прочитанное сообщение 18.06.2012 20:20     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

господа! не нужна мне выделенная РНК! вернее, нужна, конечно, но как с ней работать и хранить я прекрасно знаю
мне нужен метод сохранения ткани, не через сульфат аммония. чтобы можно было извлечь РНК через месяц
Guest
IP-штамп: fr0OYJiGAYajU
гость



 прочитанное сообщение 18.06.2012 20:21     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

(Guest @ 18.06.2012 15:47)
Ссылка на исходное сообщение  У Вас нет РНК.

ну конечно. ее нет. повалилась
а если сразу выделить и не хранить в RNA later - то есть
вопрос, в чем хранить кусок ткани?
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 18.06.2012 21:12     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

Можно засунуть в жидкий азот.
А можно еще во что-нибудь пожиже и на самое дно tongue.gif
Участник оффлайн! polosataya
Участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 19.06.2012 11:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

благодарю за ответы
guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 19.06.2012 13:58     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

--Чистая РНК прекрасно хранится в 1хТЕ, рН 7.0 в любых условиях, в том числе и при комнатной температуре, если не лазить перчатками или пальцами в пробирку.
РНК растворяют при +55...+65 С, в течение 20-30 минут в 1хТЕ и без всяких ингибиторов РНКаз.


УРЯЯЯААА!!! А как узнать, что она достаточно чистая, что бы все эти утверждения были справедливы.

--РНК будет разрушаться в ткани, которую держат в растворе с гуанидином, но это не связано с активностью РНКаз.

Ну откройте же скорее нам секрет - с чем же это связано?

--господа! не нужна мне выделенная РНК! вернее, нужна, конечно, но как с ней работать и хранить я прекрасно знаю
мне нужен метод сохранения ткани, не через сульфат аммония. чтобы можно было извлечь РНК через месяц

Вариант первый: сушить лиофильно можно, и не лиофильно(просто в вакууме над скажем Р2О5), ибо потом вы все равно все тризолом убьете. Потом запаять стеклянную ампулу. Или опять же, как ниже описано, хранить с осушителем.

Вариант второй: Несколько проводок в абсолютном спирте(сушка магнием или натрием), до так сказать полного обезвоживания. Потом под спиртом хранить в герметичной таре, если запаять в стекле(осторожно нужно умение это делать иначе сгорите нафиг), то можно и так. А если в каком-нибудь фалконе или эппендорфе с винтом, то лучше положить в другую герметичную тару и засыпать силикагелем(прокаленном градусах при 120-140)

Морозить при этом ничего не надо. Нет воды - нет гидролиза.
Участник оффлайн! polosataya
Участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 19.06.2012 15:19     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

Вариант первый: сушить лиофильно можно, и не лиофильно(просто в вакууме над скажем Р2О5), ибо потом вы все равно все тризолом убьете. Потом запаять стеклянную ампулу. Или опять же, как ниже описано, хранить с осушителем.

Вариант второй: Несколько проводок в абсолютном спирте(сушка магнием или натрием), до так сказать полного обезвоживания. Потом под спиртом хранить в герметичной таре, если запаять в стекле(осторожно нужно умение это делать иначе сгорите нафиг), то можно и так. А если в каком-нибудь фалконе или эппендорфе с винтом, то лучше положить в другую герметичную тару и засыпать силикагелем(прокаленном градусах при 120-140)

Морозить при этом ничего не надо. Нет воды - нет гидролиза.
[/quote]

спасибо smile.gif
все это замечательно, но в почти полевых условиях никак нереализуемо...
guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 19.06.2012 16:43     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

--все это замечательно, но в почти полевых условиях никак нереализуемо...

Еще как реализуемо. Если хотите, могу помочь я в Питере.
Guest
IP-штамп: fraNxKs8b8Uok
гость



 прочитанное сообщение 19.06.2012 17:21     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

Нету у Вас РНК, это ошметки ДНК. Когда насекомое резали - ДНК на куски построгалась. Так теперь ошметками и выделяется.
Guest
IP-штамп: fr4awbu0V5I72
гость



 прочитанное сообщение 19.06.2012 19:12     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

ДНК же длинная, метров 8, резали-резали и порезали. Лучше коров растите и руду плавьте, не нужна Вам биология и наука не нужна.
Guest
IP-штамп: fr4awbu0V5I72
гость



 прочитанное сообщение 19.06.2012 19:58     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

Вот и буренка пожаловала. smile.gif Скажи-ка - мууу. Когда грамоте научат - можно будет сена подбросить. Сено-солома, Алексей Толстой.
Участник оффлайн! polosataya
Участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 19.06.2012 20:23     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

я смотрю, у отдельных личностей потрясающее чувство юмора... из серии сам шучу, сам смеюсь
Guest
IP-штамп: fr4awbu0V5I72
гость



 прочитанное сообщение 19.06.2012 20:38     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

Миллионы маршируют и гогочут. По каждому пункту проверяйте и доказывайте. Разве не длинна ДНК насекомых? Многометрова и запросто рвется-режется. Киты портятся, с РНК не умеют работать, ДНК уже порезана. Жидкий азот, больше идей пока нет по сказанному тексту.
guest: ммм
IP-штамп: frQlBxj4iQSg.
гость



 прочитанное сообщение 19.06.2012 21:49     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

Это у Волкова очередной климактерический припадок. smile.gif
Guest
IP-штамп: frfpdvAFnvqsE
гость



 прочитанное сообщение 20.06.2012 03:24     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

Ага. Попробуйте в лабе несколько вариантов и сравните. Иначе не имеет смысл насекомых мучить. Этап называется отработкой методик и может занимать месяцы и при вариациях биоматериала даже годы. Это опыт, собственный, который просто так не приобретается и порой на словах не передается. Нельзя полностью имитировать все условия, должно быть некое чувство, которому так просто не научить. Вот так. ИМХО, у Вас даже ДНК нет. По моему скромному и малоопытному мнению.

Всего благодарностей: 2Поблагодарили (2): -Ъ-, Агроном
Участник оффлайн! Wola
Участник
Москва



 прочитанное сообщение 20.06.2012 08:31     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

(RNK @ 18.06.2012 18:48)
Ссылка на исходное сообщение Можно полностью инактивировать РНКазы в растворе 10мМ DTT при растворении РНК при  +55 С.


Скажите, пожалуйста, а как именно DTT инактивирует РНКазы? Без шуток, очень интересно.
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 20.06.2012 10:01     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

(Wola @ 20.06.2012 09:31)
Ссылка на исходное сообщение  Скажите, пожалуйста, а как именно DTT инактивирует РНКазы? Без шуток, очень интересно.

Я думаю, что RNK намного умнее чем Вы думаете (инактивировал РНК-азы добавляя ДТТ confused.gif ). Ессно, он имел ввиду, что Ингибиторы РНК-аз эффективно работают исключительно в среде ДТТ, стандартно 10 мМ, который выступаут в роли протектора, притом что самой Ревертазе наплевать на ДТТ - реакция идет замечательно и без него.
Так что любопытство Ваше неуместно. frown.gif
Участник оффлайн! polosataya
Участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 20.06.2012 10:39     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

(Guest @ 20.06.2012 01:24)
Ссылка на исходное сообщение  Ага. Попробуйте в лабе несколько вариантов и сравните. Иначе не имеет смысл насекомых мучить. Этап называется отработкой методик и может занимать месяцы и при вариациях биоматериала даже годы. Это опыт, собственный, который просто так не приобретается и порой на словах не передается. Нельзя полностью имитировать все условия, должно быть некое чувство, которому так просто не научить. Вот так. ИМХО, у Вас даже ДНК нет. По моему скромному и малоопытному мнению.

вы ошибаетесь, с ДНК как раз все в порядке. а РНК валится.
а методики отрабатываются, и даже оптимизируются.
а исходный вопрос был о том, был ли у кого положительный опыт
Участник оффлайн! RNK
Постоянный участник
СССР



 прочитанное сообщение 20.06.2012 10:43     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

(Wola @ 20.06.2012 09:31)
Ссылка на исходное сообщение  Скажите, пожалуйста, а как именно DTT инактивирует РНКазы? Без шуток, очень интересно.


почитайте этот патент:

http://patft.uspto.gov/netacgi/nph-Parser?...RS=PN/6,825,340

для инактивации РНКаз необходимо -S-S- связи перевести в -SH HS- с помощью DTT при нагревании от 37 до 65 градусов.

Достаточно 10-20 мМ DTT в растворе с РНК, прогреть до 55 градусов, и все РНКазы инактивируются.


(polosataya @ 16.06.2012 13:46)
Ссылка на исходное сообщение  Уважаемые коллеги!

поделитесь, пожалуйста, опытом
сколько может сохраняться РНК, если ткань гомогенизировать в буфере с гуанидином (по Хомчински)?
РНК нужна для ОТ-ПЦР



может вам попробовать живыми насекомые доставить с поля. Лиофилизация ткани и заливка насекомых тризолом не поможет сохранить РНК.
Участник оффлайн! polosataya
Участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 20.06.2012 11:15     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

к сожалению, это невозможно
Guest
IP-штамп: frfpdvAFnvqsE
гость



 прочитанное сообщение 20.06.2012 11:56     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

Тогда на пенсию идите или в бизнес, хоть деньги или спокойствие будут. Или замуж и детей рожайте десяток на освоение Сибири.
Участник оффлайн! RNK
Постоянный участник
СССР



 прочитанное сообщение 20.06.2012 12:25     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #32 множественное цитирование

Если сульфат аммония плохо проникает в ткани, то и гуанидинтиоционат, тоже не станет пропитывать эту ткань.
Надо насекомое раздавить в 4М гуанидинтиоционате, и измельчить насколько это возможно. В этом случае, ткань будут пропитываться солью. Надо пробовать.
Может стоит попробовать заспиртовать насекомое. Как это делают при подготовки к срезам (укус и пропанол).

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): polosataya
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 20.06.2012 13:44     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #33 множественное цитирование

(RNK @ 20.06.2012 11:43)
Ссылка на исходное сообщение  почитайте этот патент:

http://patft.uspto.gov/netacgi/nph-Parser?...RS=PN/6,825,340

для инактивации РНКаз необходимо -S-S- связи перевести в -SH HS- с помощью DTT при нагревании от 37 до 65 градусов.

Достаточно 10-20 мМ DTT в растворе с РНК, прогреть до 55 градусов, и все РНКазы инактивируются.
может вам попробовать живыми насекомые доставить с поля. Лиофилизация ткани и заливка насекомых тризолом не поможет сохранить РНК.

С ДТТ этот фокус по патенту у меня в свое время не прошел. Видимо не все РНК-зы этому подвержены. Но с ингибитором+ДТТ - по несколько месяцев в холодильнике с РНК ничего не случилось...
Guest
IP-штамп: frfpdvAFnvqsE
гость



 прочитанное сообщение 20.06.2012 14:01     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #34 множественное цитирование

Имитация бурной деятельности в рабочее время. Домой идите лучше и не мешайте другим работать.
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 20.06.2012 14:08     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #35 множественное цитирование

(polosataya @ 20.06.2012 11:15)
Ссылка на исходное сообщение  к сожалению, это невозможно


странно - народ из парафиновых архивных трупофф рнку достает confused.gif
Guest
IP-штамп: frFlqPbQrZ39g
гость



 прочитанное сообщение 20.06.2012 14:23     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #36 множественное цитирование

Это всё в Питере, где зимой холодно и темно, специалистов нет и реально можно годами из пробирки в пробирку сжатый воздух переливать. На нищенском пособии для престарелых и духовно убогих российских учоных.
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  20.06.2012 14:28     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #37 множественное цитирование

http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%...al.pone.0021043

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): polosataya
Guest
IP-штамп: frvTCK1iODP5s
гость



 прочитанное сообщение 20.06.2012 23:51     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #38 множественное цитирование

Итальянская статья в плосе, наскоро сварганенная на раковых клетках, про возможность фиксировать клетки формальдегидом. Читать учитесь.
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  09.12.2021 17:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #39 множественное цитирование

http://replicarolexwatches.simpsite.nl/
https://www.smore.com/rj7kh-best-replica-watches
https://www.athleticsnation.com/users/Replicarolexwatches
https://pastebin.pl/view/ab0e458a
https://mix.com/watcheshutukcom
https://www.woddal.com/post/359216_tiny-acc...nybody-039.html
https://share.naturalnews.com/posts/3904099
https://demo.wowonder.com/post/214429_the-i...-producers.html
https://rapichat.com/post/5369_our-purpose-...ible-there.html
https://dashburst.com/replicarolexwatches/1
https://sway.office.com/KifcQvn36MK821G8
https://flipboard.com/@replicarolex24
https://getpocket.com/redirect?url=https%3A...eshut.uk.com%2F
https://www.openstreetmap.org/user/Hints%20...20Rolex%20Watch
guest: pppp
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  10.12.2021 00:22     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #40 множественное цитирование

I can’t imagine focusing long enough to research; much less write this kind of article. You’ve outdone yourself with this material. This is great content.
파워볼사이트
Guest
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  15.12.2021 16:21     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #41 множественное цитирование

Thank you so much for the post you do. I like your post and all you share with us is up to date and quite informative, i would like to bookmark the page so i can come here again to read you, as you have done a wonderful job.
꽁머니
Guest
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  20.12.2021 15:15     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #42 множественное цитирование

Thank you so much for the post you do. I like your post and all you share with us is up to date and quite informative, i would like to bookmark the page so i can come here again to read you, as you have done a wonderful job.
mersin feribot
Guest
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.12.2021 14:37     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #43 множественное цитирование

I really like your take on the issue. I now have a clear idea on what this matter is all about..
안전놀이터
Guest
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  02.01.2022 19:39     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #44 множественное цитирование

I am very enjoyed for this blog. Its an informative topic. It help me very much to solve some problems. Its opportunity are so fantastic and working style so speedy.
rb88.casino
guest: pppp
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  22.01.2022 11:46     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #45 множественное цитирование

I enjoy every single posts, I actually appreciated, I would personally adore extra information and facts because of this, mainly because its fairly pleasing., Have fun here ideal for allowing.
สล็อต pp
guest: pppp
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  25.01.2022 20:25     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #46 множественное цитирование

Excellent website! I adore how it is easy on my eyes it is. I am questioning how I might be notified whenever a new post has been made. Looking for more new updates. Have a great day!
Canadian Visa Online

Это СПАМ!
Это сообщение — спам.
RNK
guest: pppp
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  29.01.2022 18:44     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #47 множественное цитирование

Nice post! This is a very nice blog that I will definitively come back to more times this year! Thanks for informative post.
sonoline b
guest: pppp
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  05.02.2022 07:13     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #48 множественное цитирование

Positive site, where did u come up with the information on this posting?I have read a few of the articles on your website now, and I really like your style. Thanks a million and please keep up the effective work.
Sell Nordstrom Gift Card In Nigeria
guest: pppp
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  05.02.2022 15:49     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #49 множественное цитирование

This is a brilliant blog! I'm very happy with the comments!..
bidvaluable is a one-stop for women's clothes
guest: pppp
IP-штамп: frJ29JTBlItMA
гость



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  06.02.2022 17:34     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #50 множественное цитирование

Wow, this is fascinating reading. I am glad I found this and got to read it. Great job on this content. I liked it a lot. Thanks for the great and unique info.
go to page

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.03.24 07:24
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft