Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
xenopus Постоянный участник Moscow |
Известно, что определенные мутации в люциферазе светлячка приводят к усилению люминесценции при использовании синтетических люциферинов, но снижают свечение при использовании природного D-люциферина. Это навело на мысль, что требования к люциферинам могут существенно отличаться у разных форм люцифераз, и, соответственно, у разных их гомологов. Следовательно, ACSLs могут обладать люциферазной активностью, хотя таковая и не обнаруживается при использовании D-люциферина. Для подтверждения этой гипотезы авторы использовали очищенную ACSL Дрозофилы (CG6178), и протестировали ее люциферазную активность в присутствии различных синтетических люциферинов. Один из люциферинов, CycLuc2, вызвал красное свечение (максимум эмиссии – 610 нм). Интересно, что D-люциферин является конкурентным ингибитором для CycLuc2 – синтаза CG6178 связывает D-люциферин, но не способна катализировать его аденилирование. Свечение, вызываемое CG6178, оказалось более стабильным – оно отличается отсутствием "взрывной" (“burst”) фазы, характерной для обычной люциферазы (когда в течение первых нескольких секунд свечение резко возрастает, а затем переходит в более длительную стабильную фазу (“glow”phase)). Используя люциферин CycLuc2, авторы обнаружили люциферазную активность в т.н. шнейдеровских клетках дрозофилы, в которых CG6178 экспрессируется в норме. Применимость CG6178 в качестве люциферазы была протестирована на культуре клеток млекопитающих (CHO). ACSLs млекопитающих обнаруживают более низкую степень гомологии с люциферином светляка, и они оказались неспособны к люминесценции в присутствии CycLuc2. Однако, не исключено, что удачный подбор люциферина позволит обнаружить люциферазную активность и у млекопитающих. Таким образом, появление люцифераз и биолюминесценции в ходе эволюции может быть проще, чем предполагалось ранее, и может быть обусловлено появлением подходящего субстрата при отсутствии серьезных мутаций в самих генах-предшественниках люцифераз. Селективность CG6178 в отношении CycLuc2 может быть использована в разработке новых субстрат-селективных люцифераз и соответствующих репортерных систем на их основе. Источник: Mofford et al. Картинка из обсуждаемой статьи: A – реакция, катализируемая люциферазой из светляка B – реакция, катализируемая ACSLs P.S. В качестве дополнительного чтения можно предложить старую, но интересную популярную статью о биолюминесценции Ю.А.Лабаса (1933-2008), одного из идейных вдохновителей открытия и исследования флуоресцентных белков в России:
Сообщение в колонке новостей, раздел "Наука: общая и молекулярная биология" 16.04.2014 14:58 |
Сухова Наталья IP-штамп: frVoMBIXqsiyE гость |
|
Atropos Постоянный участник abroad |
Особенно интересны LCFACS/MCFACS из бактерий/архей и 4CL/4CL-like растений (впрочем, последние часто могут работать и в качестве ACSL) , поскольку основная их часть ближе к ACSL (и люциферазам) насекомых, чем типичные ACSL позвоночных и растений. Сообщение было отредактировано Atropos - 30.04.2014 13:21 |
xenopus Постоянный участник Moscow |
|
Guest IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2 гость |
(Сухова Наталья @ 28.04.2014 02:58) Большинство ученых совсем не теми способами и методами исследуют такие интересные фундаментальные явления как та же самая люминесценция, занимаясь исключительно особенностями лабораторно-биохимических методов исследования и мало задаваясь вопросом о сути явления и возникающих изменений, или это просто напросто выходит за рамки их компетенции - они не знакомы со строением электронных оболочек, химических связей? Каждый раз одно и то же, а хорошие обзорные статьи с доступными предположениями почему и как это реально получается - есть? Ряды люминофоров, чтобы было понятней зачем это и куда можно применить, в том числе и с точки зрения нашего понимания о природе вещей? И реально разобраться в сути явления. Или это просто работы для мелких интересов отдельной очередной инновационной компании? |
Guest IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2 гость |
(xenopus @ 05.05.2014 13:39) ГМО под запрет |
pollard45p Участник |
|
개인사업 IP-штамп: fraK0s5ehzFug гость |
|
먹튀검증 IP-штамп: fraK0s5ehzFug гость |
|
munmin78 Участник |
|
Guest IP-штамп: frwJoL6ntQsM2 гость |
|
Guest IP-штамп: frwJoL6ntQsM2 гость |
|
Guest IP-штамп: frwJoL6ntQsM2 гость |
|
Rock |
|
watchesbiz Постоянный участник |
|
vrida2 Постоянный участник |
|
kriz Постоянный участник |
|
jad12 IP-штамп: frWoyLp/FCXKE гость |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
merckseo Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
merckseo Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
guest: pppp IP-штамп: frJ29JTBlItMA гость |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
guest: pppp IP-штамп: frJ29JTBlItMA гость |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
Guest IP-штамп: frJ29JTBlItMA гость |
|
jad12 IP-штамп: frWoyLp/FCXKE гость |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
Guest IP-штамп: frJ29JTBlItMA гость |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
pg slot auto IP-штамп: frXkFtWqamLPg гость |
|
Guest IP-штамп: frJ29JTBlItMA гость |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
Guest IP-штамп: frJ29JTBlItMA гость |
|
xigel19038 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Колонка новостей · Следующая тема » |