 * |   |
|
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда |  Zbio-wikiNG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: |
|
Правила
* Первичные культуры стромы костного мозга
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.
   |
 GrigУчастник  |
 15.06.2002 23:32
 ,только что зашел на сайт. [img]gent.gif" border="0[/img] Радует, что научный альтруизм жив, как и научный туризм. Был бы благодарен за совет по ведению первичных культур клеток костного мозга: плохо растут после трипсинизации (пересадки). Кстати, для тех, кто туда еще не дошел - на www.rsci.ru есть масса полезной информации о последних грантах, конференциях и программах. Удачи всем! [ 16-06-2002: Сообщение отредактировано: Grig ] [ 19-06-2002: Сообщение отредактировано: Grig ] |
|
VSK Участник |
17.06.2002 19:33
Они занимаются этим. Посоветуют. |
|
DVKup Постоянный участник Москва, Россия |
18.06.2002 20:04
|
|
Grig Участник |
18.06.2002 23:30
1. Подъехать по указанному адресу сложновато, т.к. живу в Минске. Но возможно, скоро буду проездом в столице СССР. В любом случае спасибо, уже нашел координаты вышеозначенного института в интернете, думаю, с ними возможно и так пообщаться. Но если не сложно - поясните что значит ЭДиТО. 2. По поводу клеток – я пытаюсь вести ДЛИТЕЛЬНЫЕ (по данным литературы – возможно до года, как минимум 3-4 месяца, после чего для стимуляции добавляют EGF) первичные культуры СТРОМЫ костного мозга как от больных лимфопролиферативными заболеваниями, так и от здоровых доноров. Т.е.оптимальный вариант - сохранение как фибробластов, так и макрофагов, которые являются преобладающими в подобных культурах (первых – до 70-80%, плюс к тому наблюдаются некоторые количества адипоцитов и остеокластов). Пока пробую следующий протокол: выделение на Фиколл-верографине, среда IMDM, эмбриональная телячья сыворотка 10%, L-глутамин 4 mM, pen/strep, tissue culture пластик 25 см2, убираю суспензионные клетки через сутки. Получаю культуру с фибробласто-подобной морфологией, контуры ядра и клетки четкие. Обычно до монослоя дорастают через 10-12 дней. Пересев: промывка теплым PBS (холодного решительно не переносят, даже без трипсинизации), (трипсин 0,05%, ЭДТА 0,5 мМ в PBS - 1 mL), инактивация 1 mL стандартной среды с 10 % ЭТС, осаждение – отмывка средой – ресуспендирование в полной среде. После чего морфология изменяется (контуры не такие четкие, клетки выглядят сильнее распластанными (слабее преломляют свет)). Последний раз (вчера) пробовал снимать без трипсина (по идее, он может резать и рецепторы для факторов роста (??)), только ЭДТА 5 mM. Пока выглядят получше, дальше - … Попутно еще один вопрос – поделитесь, кто знает, зачем в подобных культурах используют гидрокортизон или бета-меркаптоэтанол. И вообще выходите на связь все, кому близка тема взаимодействия лимфоидных клеток с элементами стромы (как сама адгезия и ее регуляция, так и цитокиновые петли, участие в избегании апоптоза). Еще раз всем спасибо. До связи. Сергей [ 18-06-2002: Сообщение отредактировано: Grig ] |
|
Alexej Dronov Участник |
19.06.2002 12:38
бета-меркаптоэтанол- ictochnik Seri (S) dlja kletok Alexey |
|
Parhit Постоянный участник Москва - Сергиев Посад |
29.06.2002 16:33
Этот институт входит в состав РОНЦ |
|
Grig Участник |
29.06.2002 20:26
спасибо, Parhit, Alexej, DVKup, VSK, gost'!. Grunt и @-гость, вы по-моему не в свою сказку попали. Надо сказать "мутабор" и мысленно щелкнуть хвостом. А жаль, что никто стромой не увлекается (я имею в виду клеточных биологов, молекулярщикам она как бы и ни к чему). Ну если кто еще зайдет - сообщаю - проблема культивирования первичной стормы успешно решена. Все оказалось просто. Как всегда. Удачи всем. [ 30-06-2002: Сообщение отредактировано: Grig ] |
|
watchesonline89 Постоянный участник |
 08.12.2022 17:19
|
| « Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |
 |
· Викимарт - все интернет-магазины в одном месте · Доска объявлений Board.com.ua ·
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---
Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Powered by Invision Power Board(Trial) v2.0.0 © 2024 IPS, Inc.