Rambler's Top100
 		Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Ответ в обезсаливание- концентрация белка для МS

Иконка сообщения*  [ Без иконки ]   Важно!   Вопрос   Информация     Обмен опытом   Шутка, забавная история     Поздравления, благодарности   Возмутительно!   Проблема   Картинки, фотографии
Введите имя

 [] вст. закрывающие теги*

*

*



 Смайлик: согласен Смайлик: не согласен Смайлик: улыбка Смайлик: пожалуйста, умоляю! Смайлик: помираю со смеху Смайлик: подмигивание Смайлик: подшучивать, дразнить Смайлик: смущение Смайлик: мне стыдно Смайлик: жуть! Смайлик: не понял Смайлик: закатывать глаза Смайлик: недовольство, огорчение Смайлик: рёв в три ручья Смайлик: злость Смайлик: супер Смайлик: умник Смайлик: чайник Смайлик: сходка Смайлик: Ура! Смайлик: не получается!
Перевод выделенного текста из латиницы в кирилицу. Текст в квадратных скобках '[]' не преобразуется Пример: biologija -> биология [b] - полужирный шрифт Пример: [b]полужирный[/b] [i] - курсив Пример: [i]курсив[/i] [u] - подчёркнутый Пример: [u]подчёркнутый[/u] [sup] - верхний индекс Пример: температура 37[sup]o[/sup]C [sub] - нижний индекс Пример: H[sub]2[/sub]O - вода [QUOTE] - применяется для цитирования чужих сообщений, цитата вставляется с небольшим отступом от края текста Пример: [QUOTE]цитата[/QUOTE] [code] - форматирование как при вводе Применяется для вывода теста как он есть, с предотвращением форматирования (автопереноса на новую строку), без интерпретации кодов форума и смайликов; вставляется с небольшим отступом от края текста. Пример: [code] программный код 1 строка 2 строка [/code] [list] - список: возможны опции: 1, a, A, i, I [list] неупорядоченный; [list=1] нумерованный; [list=A] упорядоченный по буквам A-Z Пример: [list=1] [*] первая строка; [*] вторая строка; [/list] Тег [hr] - горизонтальная разделительная линия Пример: Абзац 1 [hr] Абзац 2 [url] - гиперссылка Примеры: [url]www.ncbi.nlm.nih.gov[/url] [url=http://www.ncbi.nlm.nih.gov/]NCBI[/url] [email] - ссылка на адрес электронной почты Пример: [email]masha@mail.ru[/email] Тег [img] - рисунок [img] - в строке; [imgL] - выравнивание по левому краю; [imgR] - выравнивание по правому краю. Пример: [img]http://molbiol.ru/izo/rl.gif[/img] [ru] - только для русских читателей Пример: [ru]это увидят только те, кто использует русский интерфейс[/ru] [en] - только для английских читателей Пример: [en]это увидят только те, кто использует английский интерфейс[/en] [self] - текст виден только вам и администрации Пример: [self]это увидите только вы сами[/self]
[left] - выравнивание по левому краю Пример: [left]текст слева[/left] [center] - выравнивание по центру Пример: [center]текст в центре[/center] [right] - выравнивание по правому краю Пример: [right]текст справа[/right] [just] - выравнивание по обоим краям Пример: [just]выровненный текст[/just]

     размер сообщения / макс. размер:  / 15360


Последние 10 сообщений [ в обратном порядке ]
watchesbiz Отправлен 19.12.2021 17:35
  http://www.authorstream.com/Replicawatches24/
https://about.me/Replicawatches24
https://moz.com/community/users/17050093
https://trello.com/rolexrelicawatches/activity
https://replicarolexwatches.dreamwidth.org/365.html
https://visual.ly/users/watcheshutuk/portfolio
https://www.viki.com/users/watcheshutuk_549/about
https://www.academia.edu/s/14bdb7d4fe?source=link
https://www.slideshare.net/Nowseore/guide-o...ex-watch-online
https://audiomack.com/rolexrelicawatches
https://soundcloud.com/replicarolexwatches
https://www.bagtheweb.com/u/fakerolexwatches/profile
https://www.flipsnack.com/ReplicawatchesUK/...ca-watches.html
https://www.4shared.com/office/zA4L7Rmzea/G...hase_a_Fak.html?
https://codepen.io/Rolexrelicawatches/full/abBEzaQ
Tom1 Отправлен 05.08.2010 19:55
 
(Guest @ 05.08.2010 08:56)
Ссылка на исходное сообщение  Задача показать, что мы можем использовать экспрессированный в бактериях белок для структурных исследований. Зачем мы будем вводить новую экспрессионную систему, если белок килограмамми можно чистить из бактерий? Стабильный белок.

Для енто и надо проекспрессировать его в той же [Hela] и показать да тот бы вестерном какой размерчик типа: тразиентная трансфекция- ИП - [pump off]- Г/Ф -вестерн.
Guest Отправлен 05.08.2010 18:56
  Задача показать, что мы можем использовать экспрессированный в бактериях белок для структурных исследований. Зачем мы будем вводить новую экспрессионную систему, если белок килограмамми можно чистить из бактерий? Стабильный белок.
Lynn Отправлен 05.08.2010 18:41
  Sorry,
2. Теоретически рассчитаный
Lynn Отправлен 05.08.2010 18:39
  1. Человеческий.
2. Теоретический рассчитанный из бактерий стабильный, а из насекомых - распадается. При этом белок из насекомых имеет несколько форм, которые разделяются на ион-обменной колонке. Укороченная форма этого белка эллюируется с колонки тремя пиками - моно-фосфорилированный и модифицированный, нефосфорилированный и модифицированный, нефосфорилированный и немодофицированный. Ну фосфорилирование можно по фостаг гелю посмотреть, хотя у белка три сайта и понять, насколько фосфорилирован белок будет невозможно. А с модификациями что делать? Согласно сиквенсу, это всё один и тот же белок. А мешать все формы и потом пытаться кристализовать - смысл? Разделили белок на фракции и слили всё вместе согласно сиквенсу?
3. Что млеки?
Tom1 Отправлен 05.08.2010 18:19
  1. а белок то какого происхождения????
2. что теоретического расчета массы белка по сиквенсу ДНК мало на первое время???
3. как написано выше млеки....
Guest Отправлен 05.08.2010 17:46
  Первым делом хотелось бы доказать, что правомерно заменить белок, экспрессированный в эукариотах на бактериальный. А этого мы пока сделать не можем.
Таг есть (Histag), но похоже кусают белочек с хвоста, так как основные куски так и продолжают цепляться на никелевую колонку. И когда целиковый белок составляет меньше 10 % от мусора, который тоже с тагом, других вариантов измерить массу белка я не вижу.
У нас как-то получилось так, что о выделении из геля все знают, но никто сам не ручками это не делал. Я собиралась попробовать экстракцию 100мМ NaOH.
Tom1 Отправлен 05.08.2010 17:43
  пы.сы. Если в посекомых такая ботва может стоит млековов попробовать типа [CHO]
выход целевого белка может быть сопоставим с помекомыми...
Tom1 Отправлен 05.08.2010 17:21
 
(guest: ммм @ 05.08.2010 07:13)
Ссылка на исходное сообщение  --Какими методами Вы пользуетесь для экстракции белка из геля?
электроэлюция, кипячение в СДС.

1.Как всегда "уммник" в первых рядах ))) в обеих случаях потери приличные не смертельные конечно, но приличные.
2. Если из колей выделяется нормально и если есть "хвост" ( таг) то не понятно зачем огород городить с выделенияи из геля?????
guest: ммм Отправлен 05.08.2010 17:13
  --Какими методами Вы пользуетесь для экстракции белка из геля?
электроэлюция, кипячение в SDS.
Посмотреть тему (откроется в новом окне)

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 20.04.24 02:01
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft
Powered by Invision Power Board(Trial) v2.0.0 © 2024  IPS, Inc.