Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
yack moderator Москва, Россия |
|
|
[Текст переведён с транслита] |
slava2001 |
|
|
|
slava2001 |
Критичнее надо быть, товаришч... |
|
Ну так кто-нибудь работал с ней, стоит покупать? [Текст переведён с транслита] |
gostya Постоянный участник |
|
Kokava Участник |
Пробавал я её... но что-то на человеческой геномной ДНК не удалось 4 кб получить. А весьма нужна была декларируемая точность. |
E. Постоянный участник |
Тоже пробовал. нормально. Бери. |
klav Постоянный участник Москва |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(klav @ 19.12.2014 20:25) Самый то ... через 10 лет Нет, не ест, но с 3-штрих - с большим аппетитом. Сообщение было отредактировано -Ъ- - 20.12.2014 18:58 |
klav Постоянный участник Москва |
(-Ъ- @ 19.12.2014 22:34) а что, как раз, ящитаю, опыт уже накопился, можно и поговорить Я ошибся, хотел написать 3`. Так сколько букв в секунду отъедает? |
klav Постоянный участник Москва |
(yorik @ 20.12.2014 22:22) да да, что делать, если не клонируется, и кто из реактивов виноват Если phusion реально ест буквы с 3' конца - то с какой скоростью? |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(klav @ 20.12.2014 00:59) а что, как раз, ящитаю, опыт уже накопился, можно и поговорить Я ошибся, хотел написать 3`. Так сколько букв в секунду отъедает? Надо ли Вам это, сомневаюсь То что она тупит концы Прдукта по ходу реакции и круто корректирует ошибки включения и при этом не спотыкается об шпильки - основное качество полимеразы. Ну а если праймеры ваши горбатые с торчащими 3-штрих концами на шпильках и димерах - хана вашим праймерам. Объедает 3-концы и резко снижается выход продукта или вовсе блокирует реакцию. Правда, горячего старта у меня не было. Популярно здесь: |
klav Постоянный участник Москва |
(-Ъ- @ 22.12.2014 16:56) Не, ну до такого я не докатился ещё (-Ъ- @ 22.12.2014 16:56) Ну, на самом деле, при клонировании, с любой полимеразой время от времени возникают текущие проблемы - в зависимости от ДНК-матриц, схемы клонирования, и т.д. Иногда и от особенностей полимеразы что-то зависит. Вот я начал с phusion работать - уж хочется всё знать про неё. На всякий За ссылки спасибо. А Ваш личный опыт? Сообщение было отредактировано klav - 22.12.2014 16:37 |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(anna2 @ 23.12.2014 15:12) Здесь у Биолайна В первом случае, я думаю, это смесь Так с Pfu в большом избытке Так и соответствующих антител. Но большой вопрос подходят ли эти антитела к ферментам типа Pfu. Продукция Биолайна с "приветом из России" . пы сы А почему Анна2, решил секс.ориентацию поменять? |
Gubanov Sergey Постоянный участник |
пы сы Почему из России? скорее из Германии пы сы ПФУ хотстарт - как рыбе зонтик |
klav Постоянный участник Москва |
Phusion полимеразу добавляют последней, в горячую смесь, чтоб не подъедала праймеры. Кто-нибудь пробовал не полимеразу, а праймеры добавлять последними - с этой же целью. А полимеразу - со всеми реактивами в общую смесь. Влияет это ли на выход и специфичность ПЦР? |
RNK Постоянный участник СССР |
полимераза не работает при комнатной температуре, но эксперимент надо делать быстро. так что ставьте ПЦР с этой полимеразой, как и с любой другой полимеразой, на столе и без льда
|
klav Постоянный участник Москва |
Холодушка для ПЦР пробирок - вполне удобный штатив. А праймер после полимеразы добавлять мне технически удобнее при градиентном ПЦР в объёме 20 мкл. Короче, вы советуете всё (и полимеразу) мешать сразу. |
X34 Участник |
(RNK @ 31.03.2015 16:22) именно, две-три (для спокойствия, а так и одной хватит) тиофосфорильных связей на 3' праймера. если это не сотни олигов в неделю то... |
RNK Постоянный участник СССР |
вы просто ставьте эксперимент, и сами всё увидите
|
klav Постоянный участник Москва |
(RNK @ 31.03.2015 17:09) ещё раз спасибо. Мешаю (но на льду) всё сразу, фрагменты нарабатываются нормально.
|
ingecate минск |
Ну и добавлю, что и простые премиксы на Taq’е как у Синтола, так и у Диалата превосходят по качеству Fermentas, NEB и т.д.
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(ingecate @ 04.04.2015 13:15) Ну и добавлю, что и простые премиксы на Taq’е как у Синтола, так и у Диалата превосходят по качеству Fermentas, NEB и т.д. Неужели? Приятно удивили. |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(X34 @ 31.03.2015 17:04) именно, две-три (для спокойствия, а так и одной хватит) тиофосфорильных связей на 3' праймера. если это не сотни олигов в неделю то... И какой смысл использования Фьюжина Не тот случай защиты 3-штрих конца праймера. |
R.J.Dio Постоянный участник |
|
ingecate минск |
|
ingecate минск |
(klav @ 31.03.2015 16:01) Народ, ищу совета. Phusion полимеразу добавляют последней, в горячую смесь, чтоб не подъедала праймеры. Всегда думал, что полимеразу добавляют последней, чтобы димеры не образовывались, а про 3' подъедания праймеров никогда не задумывался. У кого-нибудь вообще такие проблемы хоть раз были? |
ASDF Постоянный участник |
|
klav Постоянный участник Москва |
Проблем у нас не было - но мы их и не искали Добавляем не просто последней, а даже в горячую смесь - для перестраховки, хотя в инструкции этого нет. |
klav Постоянный участник Москва |
(ingecate @ 08.04.2015 22:44) Ну дак - если уж наПЦР-илось, почему буквам теряться?
|
ingecate минск |
Если хотите про деградацию ДНК поговорить, то проверено: Phusion без дНТФ'ов грызет 3' еще как (пробовали ею затупить фрагмент после рестрикции -150 п.о. за 2 min на 72С). дНТФ дело исправляют. |
ingecate минск |
(klav @ 09.04.2015 01:48) ingecate, ну в инструкции прямо написано - добавлять её последней из-за 3-экзонуклеазной активности, в отсутствие буковок может подъедать праймеры. Проблем у нас не было - но мы их и не искали Добавляем не просто последней, а даже в горячую смесь - для перестраховки, хотя в инструкции этого нет. Проблем никто не ищет, они обычно сами находятся. Единственная проблема без хот-старта (даже в руках моих студентов) - праймер димеры. Если Вам не мешают - готовте премикс хоть на комнате (все компаненты), если мешают или хотите продукта побольше/почище и т.д. - готовте на льду (все компаненты). Этого более чем достаточно. Добавлять последней в горячую смесь (если много параллельных опытов) - большая морока, да и разброс данных будет побольше, чем при приготовлении общего премикса. |
ingecate минск |
(yack @ 28.05.2004 16:04) Интересует мнение научной общественности о Phusion полимеразе от MJ Research. Что это за зверь? Работает с ней кто-нибудь? Да простят меня участники форума за 3 поста подряд, просто за Державу обидно «Phusion», фермент хоть и точный, но с dUTP работать отказывается (ингибируется), поэтому для больших ампликонов не годится. «HS-Fuzz» ни капли не стесняется поднимать ампликон на 10 кб даже в руках у студентов. |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
За Державу - большое спасибо. Аналогично! |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(ingecate @ 09.04.2015 12:11) Да простят меня участники форума за 3 поста подряд, просто за Державу обидно «Phusion», фермент хоть и точный, но с dUTP работать отказывается (ингибируется), поэтому для больших ампликонов не годится. «HS-Fuzz» ни капли не стесняется поднимать ампликон на 10 кб даже в руках у студентов. Этим постом Вы ответили на вопрос модератора 10-летней давности. |
klav Постоянный участник Москва |
Ну то есть, по тому или иному виду продукта можно понять, что плохой результат именно из-за неё? NB: мой вопрос - не наезд, не тонкая издёвка, не толстые намёки, а просто вопрос человека, знающего про ПЦР не всё. Уточняю, с учётом текущего тона общения на этом сайте |
ingecate минск |
(klav @ 09.04.2015 16:20) ingecate, поделитесь, димеризация праймеров как-то видна по результатам ПЦР? Ну то есть, по тому или иному виду продукта можно понять, что плохой результат именно из-за неё? На форезе праймер димеры выглядят низкомолекулярным шмероа. Из-за них уменьшается количество целевого продукта, больше вероятности найти неспец., в реал-тайме смещение Ct, ну и т.д. Если надо провести только качественный анализ +/- (в данном случае ПЦР-скрининг E. coli на вставку гена), то димеров можно и не боятся. При клонировании, количественном анализе – мешают. Кстати, как Phusion, так и HS-Fuzz терпят целые коли, а вот на крови проверял только HS-Fuzz (до20%!). – это еще дополнительные плюсы модифицированных Pfu’х, не досягаемые простым Taq’ам и Pfu’ам. Про них же чувствительность – 5 копий на реакцию (читал статью, что меньше давать нельзя – слишком тяжелая статистика, хотя на мой взгляд и 1 копию подниму). Работают быстро (2 кб/мин) – все это по своему опыту. Картинки: ______________.jpg — (322.82к)
|
SAPPRRIINNAA IP-штамп: frD2d5AkbB40g гость |
<a href="https://hl-tourism.com/">الحياة السعيدة </a> <a href="https://hl-tourism.com/">رحلات سياحية</a> <a href="https://hl-tourism.com/">برامج سياحية</a> <a href="https://hl-tourism.com/">عروض سفر </a> عروض سياحية <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B9%D8%B1%D9%88%D8%B6-%D8%B3%D9%8A%D8%A7%D8%AD%D9%8A%D8%A9.html">عروض سياحية </a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B9%D8%B1%D9%88%D8%B6-%D8%B3%D9%8A%D8%A7%D8%AD%D9%8A%D8%A9.html">بكجات سياحية </a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B9%D8%B1%D9%88%D8%B6-%D8%B3%D9%8A%D8%A7%D8%AD%D9%8A%D8%A9.html">عروض سياحية وسفر</a> رحلات داخلية <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D8%AF%D8%A7%D8%AE%D9%84%D9%8A%D9%87.html">رحلات داخلية في السعودية</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D8%AF%D8%A7%D8%AE%D9%84%D9%8A%D9%87.html">السياحة في السعودية</a> رحلات عائلية <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D8%B3%D9%8A%D8%A7%D8%AD%D9%8A%D8%A9.html">عروض سياحية شاملة التذاكر</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D8%B3%D9%8A%D8%A7%D8%AD%D9%8A%D8%A9.html">قروبات سياحية</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D8%B3%D9%8A%D8%A7%D8%AD%D9%8A%D8%A9.html">عروض سفر عائلية</a> شهر العسل <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D8%B4%D9%87%D8%B1-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D8%B3%D9%84.html">عروض شهر عسل</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D8%B4%D9%87%D8%B1-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D8%B3%D9%84.html">رحلات شهر عسل</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D8%B4%D9%87%D8%B1-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D8%B3%D9%84.html">برامج شهر عسل</a> رحلات كروز <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D9%83%D8%B1%D9%88%D8%B2.html">رحلات كروز</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D9%83%D8%B1%D9%88%D8%B2.html">رحلات بحرية</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%B1%D8%AD%D9%84%D8%A7%D8%AA-%D9%83%D8%B1%D9%88%D8%B2.html">رحلات كروز اوروبا</a> الدراسة بالخارج <a href="https://hl-tourism.com/%D8%A7%D9%84%D8%AF%D8%B1%D8%A7%D8%B3%D8%A9-%D8%A8%D8%A7%D9%84%D8%AE%D8%A7%D8%B1%D8%AC.html">الدراسة بالخارج</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%A7%D9%84%D8%AF%D8%B1%D8%A7%D8%B3%D8%A9-%D8%A8%D8%A7%D9%84%D8%AE%D8%A7%D8%B1%D8%AC.html">تعليم اللغة الانجليزية</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%A7%D9%84%D8%AF%D8%B1%D8%A7%D8%B3%D8%A9-%D8%A8%D8%A7%D9%84%D8%AE%D8%A7%D8%B1%D8%AC.html">الدراسة في بريطانيا</a> السياحة العلاجية <a href="https://hl-tourism.com/%D8%A7%D9%84%D8%B3%D9%8A%D8%A7%D8%AD%D8%A9-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D9%84%D8%A7%D8%AC%D9%8A%D8%A9-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D9%84%D8%A7%D8%AC-%D8%A7%D9%84%D8%B7%D8%A8%D9%8A%D8%B9%D9%8A.html">السياحة العلاجية</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%A7%D9%84%D8%B3%D9%8A%D8%A7%D8%AD%D8%A9-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D9%84%D8%A7%D8%AC%D9%8A%D8%A9-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D9%84%D8%A7%D8%AC-%D8%A7%D9%84%D8%B7%D8%A8%D9%8A%D8%B9%D9%8A.html">برامج السياحة العلاجية</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%A7%D9%84%D8%B3%D9%8A%D8%A7%D8%AD%D8%A9-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D9%84%D8%A7%D8%AC%D9%8A%D8%A9-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D9%84%D8%A7%D8%AC-%D8%A7%D9%84%D8%B7%D8%A8%D9%8A%D8%B9%D9%8A.html">مصحات علاجية اوروبا</a> استخراج تأشيرات <a href="https://hl-tourism.com/%D8%A7%D8%B3%D8%AA%D8%AE%D8%B1%D8%A7%D8%AC-%D8%AA%D8%A7%D8%B4%D9%8A%D8%B1%D8%A7%D8%AA.html">استخراج تاشيرات</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%A7%D8%B3%D8%AA%D8%AE%D8%B1%D8%A7%D8%AC-%D8%AA%D8%A7%D8%B4%D9%8A%D8%B1%D8%A7%D8%AA.html">تاشيرة الشنغن</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%A7%D8%B3%D8%AA%D8%AE%D8%B1%D8%A7%D8%AC-%D8%AA%D8%A7%D8%B4%D9%8A%D8%B1%D8%A7%D8%AA.html">تاشيرة بريطانيا</a> حجز طيران <a href="https://hl-tourism.com/%D8%AD%D8%AC%D8%B2-%D8%B7%D9%8A%D8%B1%D8%A7%D9%86/">حجز طيران</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%AD%D8%AC%D8%B2-%D8%B7%D9%8A%D8%B1%D8%A7%D9%86/">رحلات طيران</a> <a href="https://hl-tourism.com/%D8%AD%D8%AC%D8%B2-%D8%B7%D9%8A%D8%B1%D8%A7%D9%86/">اسعار تذاكر الطيران</a> |
SAPPRRIINNAA IP-штамп: frD2d5AkbB40g гость |
<a href="https://talafashion.com.sa/">متجر عبايات </a> <a href="https://talafashion.com.sa/">دار تالة</a> <a href="https://talafashion.com.sa/">متجرعباية</a> <a href="https://talafashion.com.sa/">متجر العبايات</a> <a href="https://talafashion.com.sa/">متجرعبايات دار تالة </a> <a href="https://talafashion.com.sa/">افضل متجر عبايات</a> <a href="https://talafashion.com.sa/">طرح وعبايات </a> العبايات <a href="https://talafashion.com.sa/%D9%85%D8%AA%D8%AC%D8%B1-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA/c1871859193">افضل متجر عبايات </a> <a href=" <a href="https://talafashion.com.sa/%D9%85%D8%AA%D8%AC%D8%B1-%D8%A7%D9%84%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA/c1871859193">عبايات سوداء سادة و ملونه</a> عبايات سادة <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%B3%D8%A7%D8%AF%D9%87/c1696770756">عبايات سادة </a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%B3%D8%A7%D8%AF%D9%87/c1696770756">عبايات ملونة سادة</a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%B3%D8%A7%D8%AF%D9%87/c1696770756">عبايات سادة سوداء </a> عبايات الراس <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%A7%D9%84%D8%B1%D8%A3%D8%B3/c19133697">عبايات الراس </a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%A7%D9%84%D8%B1%D8%A3%D8%B3/c19133697">عبايات على الرأس </a> <a href="https://talafashion.com.sa/">عبايات على الرأس </a> عبايات مطرزة <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D9%85%D8%B7%D8%B1%D8%B2%D8%A9/c1843693077">عبايات مطرزة</a> <a href="https://talafashion.com.sa/">عبايات مطرزة</a> عبايات فضفاضة <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%A8%D8%B4%D8%AA-%D8%A7%D8%B3%D9%88%D8%AF-%D9%88%D9%85%D9%84%D9%88%D9%86%D9%87/c1838874575">عبايات فضفاضة</a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%A8%D8%B4%D8%AA-%D8%A7%D8%B3%D9%88%D8%AF-%D9%88%D9%85%D9%84%D9%88%D9%86%D9%87/c1838874575">عبايات بشت اسود</a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%A8%D8%B4%D8%AA-%D8%A7%D8%B3%D9%88%D8%AF-%D9%88%D9%85%D9%84%D9%88%D9%86%D9%87/c1838874575">عبايه بشت ملونه</a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%A8%D8%B4%D8%AA-%D8%A7%D8%B3%D9%88%D8%AF-%D9%88%D9%85%D9%84%D9%88%D9%86%D9%87/c1838874575">عبايه بشت </a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%A8%D8%B4%D8%AA-%D8%A7%D8%B3%D9%88%D8%AF-%D9%88%D9%85%D9%84%D9%88%D9%86%D9%87/c1838874575">عبايات بشت </a> <a href="https://talafashion.com.sa/">عبايات بشت </a> عبايات عملية <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%B9%D9%85%D9%84%D9%8A%D8%A9/c404039121">عبايات عملية </a> <a href="https://talafashion.com.sa/">عبايات عملية </a> عبايات ملونة <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D9%85%D9%84%D9%88%D9%86%D9%87-%D9%81%D8%AE%D9%85%D8%A9/c2122003905">عبايات الوان </a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D9%85%D9%84%D9%88%D9%86%D9%87-%D9%81%D8%AE%D9%85%D8%A9/c2122003905">عبايات ملونة فخمة </a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D9%85%D9%84%D9%88%D9%86%D9%87-%D9%81%D8%AE%D9%85%D8%A9/c2122003905">عبايات كحلي سادة </a> <a href="https://talafashion.com.sa/">عبايات ملونة </a> عبايات مناسبات <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%B1%D8%B3%D9%85%D9%8A%D8%A9/c1354349013">عبايات المناسبات </a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D9%8A%D8%A7%D8%AA-%D8%B1%D8%B3%D9%85%D9%8A%D8%A9/c1354349013">عبايات رسمية </a> <a href="https://talafashion.com.sa/">عبايات رسمية </a> متعددة القطع <a href="https://talafashion.com.sa/%D9%85%D8%AA%D8%B9%D8%AF%D8%AF%D8%A9-%D8%A7%D9%84%D9%82%D8%B7%D8%B9/c2026610750">عبايات متعددة القطع </a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D9%85%D8%AA%D8%B9%D8%AF%D8%AF%D8%A9-%D8%A7%D9%84%D9%82%D8%B7%D8%B9/c2026610750">عبايات قطعتين </a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D9%85%D8%AA%D8%B9%D8%AF%D8%AF%D8%A9-%D8%A7%D9%84%D9%82%D8%B7%D8%B9/c2026610750">عباية قطعتين </a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D9%85%D8%AA%D8%B9%D8%AF%D8%AF%D8%A9-%D8%A7%D9%84%D9%82%D8%B7%D8%B9/c2026610750">عبايات متعددة القطع </a> <a href="https://talafashion.com.sa/">عبايات قطعتين </a> النقاب <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%A7%D9%84%D9%86%D9%82%D8%A7%D8%A8/c1656109623">نقاب قصير</a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%A7%D9%84%D9%86%D9%82%D8%A7%D8%A8/c1656109623">نقاب رسمة عين</a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%A7%D9%84%D9%86%D9%82%D8%A7%D8%A8/c1656109623">لثام بمطاط خلفي</a> الطرحة <ahref="https://talafashion.com.sa/%D8%B7%D8%B1%D8%AD%D8%B3%D9%88%D8%AF%D8%A7%D8%A1%D9%88%D9%85%D8%B7%D8%B1%D8%B2%D8%A9/c316762400">افخم طرح ملونه</a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B7%D8%B1%D8%AD%D8%B3%D9%88%D8%AF%D8%A7%D8%A1%D9%88%D9%85%D8%B7%D8%B1%D8%B2%D8%A9/c316762400">اجمل طرح مطرزه</a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B7%D8%B1%D8%AD%D8%B3%D9%88%D8%AF%D8%A7%D8%A1%D9%88%D9%85%D8%B7%D8%B1%D8%B2%D8%A9/c316762400">افضل طرح سوداء</a> <a href="https://talafashion.com.sa/%D8%B7%D8%B1%D8%AD%D8%B3%D9%88%D8%AF%D8%A7%D8%A1%D9%88%D9%85%D8%B7%D8%B1%D8%B2%D8%A9/c316762400">طرح سوداء ومطرزة</a> |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |