Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Контаминация культуры? -- Непонятные образования --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Artin




 прочитанное сообщение 06.04.2018 17:57     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Приветствую!

Недавно обнаружил в культуральной среде нитевидные (в том числе и свернутые) образования (спустя три пассажа после высевания). Я промыл флакон PBS-ом (Gibco Invitrogen), пипетируя его на клеточный газон, и заменил среду (после данных процедур этих образований стало меньше, но полностью избавиться от них не удалось). На следующий день обнаружил целые очаги гибели клеток ближе к горлышку флакона (возможно перестарался с пипетированием или же это последствия контаминации). Затем, спустя еще один день, наблюдения в микроскоп показали следующую картину: бОльшая часть клеток растет нормально, но очаги клеточной гибели оказались полностью пустые (полное отсутствие клеток). Я удалил среду и высадил ее в 6-тилуночный планшет, разбавив в 6 раз свежей средой без антибиотика. После нескольких дней инкубации наблюдаю во всех лунках такие же образования, они вроде не растут и число их пока не увеличивается. Клетки HaCAT, среда DMEM (антибиотик+ЭТС).

Как думаете, что это может быть?
Гифы плесени или же просто клеточный мусор/куски из ЭТС
Клетки HaCAT, среда DMEM (антибиотик+ЭТС).

Прилагаю фото этих образований (х50) после культивирования в 6-тилуночном планшете (в 6-тикратно разбавленной свежей среде).

Ссылки на фото (не удалось прикрепить):
http://rgho.st/6LcrFZKCM
http://rgho.st/8Y7FF6xZN
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 06.04.2018 22:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Это пророст, скорее всего грибы. Проверьте на контаминацию бокс, среду и инкубатор. А потом размораживайте новую фасовку клеток из заморозки.
Участник оффлайн! semi
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 07.04.2018 12:57     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

(MMM @ 06.04.2018 23:53)
Ссылка на исходное сообщение  Это пророст, скорее всего грибы. Проверьте на контаминацию бокс, среду и инкубатор. А потом размораживайте новую фасовку клеток из заморозки.

Грибы обычно красивые, а это смахивает на осадок из сыворотки.
Вот похожие картинки, сопровождаемые похожими вопросами:
https://www.researchgate.net/post/Can_anyon...tached_pictures

Всего благодарностей: 2Поблагодарили (2): CowDoc, Знания сила
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 07.04.2018 17:37     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Чой-то не похоже на грыбы....
не просматривауются гифы как правильно заметил коллега " семи" они красивые...
и потом за несколько дней там уже должны плавать такие острова из нормальной плеснюги...
конечно проверить посевом не помешает, но если по быстрому заметить среду и сыворотку ....
Участник оффлайн! LaBord

Монреаль



 прочитанное сообщение 19.04.2018 15:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Среда с заростом заливается ядом (пр., отбеливателем), емкость выбрасывается. Все поверхности бокса стерилизуются спиртом и УФ. Для подстраховки то же - в инкубаторе. Меняются все растворы на новые, даже матричники. Сеются из заморозки.
Всё.
Если беда повторно - предполагать бяку либо в культуре, либо в фильтре бокса.
Участник оффлайн! Знания сила




 прочитанное сообщение 19.04.2018 17:09     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

Никакой это не зарост. И уж точно это не грибные гифы.
Участник оффлайн! LaBord

Монреаль



 прочитанное сообщение 20.04.2018 05:11     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

Да хоть мидихлориане.
По факту клетки гибнут, и не задача пользователя выявлять царство, пустившее корни. Нужно как можно быстрее вернуться к эксперименту и не нести дальнейшие потери реурсов.
Участник оффлайн! Знания сила




 прочитанное сообщение 21.04.2018 00:59     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

(LaBord @ 20.04.2018 06:11)
Ссылка на исходное сообщение  Да хоть мидихлориане.
По факту клетки гибнут, и не задача пользователя выявлять царство, пустившее корни. Нужно как можно быстрее вернуться к эксперименту и не нести дальнейшие потери ресурсов.

Человек спросил, ему ответили, что это не зарост, а ошметки от FCS, которую он называл ЭТС. ЭТС - это крутая смесь белков, которая инактивируется тепловым шоком. Агрегаты белков и всего прочего именно так и выглядят, как первым сообщил semi. Можете профильтровать сыворотку или процентрифугировать от ошметков. Но нафига?

Конечно можете воспользоваться советом советника из Монреаля и сжечь из огнемета весь бокс дабы "как можно быстрее вернуться к эксперименту и не нести дальнейшие потери ресурсов". Метод Солсбери ? jump.gif

Сообщение было отредактировано Знания сила - 21.04.2018 01:06
Участник оффлайн! LaBord

Монреаль



 прочитанное сообщение 22.04.2018 05:38     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

С методом Солсбери не знаком, только с Монте-Карло.
Мое мнение основывается на практике: в инкубаторах стоят клетки трех лабораторий + "гостевые",т.е. при реальной контаминации даже одного посева печальный исход может быть распространен не только на личный результат, нужно помнить о коллегах. В условиях, когда естественно-научное любопытство о природе пророста может перерасти в гибель культур у полутора десятков человек и отбросить работу всех на месяц, а то и два, - да, я предпочитаю потратить пару часов на превентивную дезинфекцию, стоимость которой и так невелика, а по сравнению с возможными неприятностями - ничтожна.
Сожженый из огнемета бокс не прибавит ценности ни эксперименту, ни организации работы, но, возможно, мои знания не столь сильны как участника из ниоткуда.
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  20.11.2021 17:57     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

https://www.uptrennd.com/post-detail/hints-...-watch~ODY3MDU2
https://anotepad.com/note/read/mqg8p5jm
https://www.crokes.com/replicarolexwatches/profile/
https://ko-fi.com/post/Watches-Shopping-Gui...-Watc-E1E13PZV9
https://www.merchantcircle.com/blogs/replic...x-Watch/1966540
https://www.nairaland.com/6427528/watches-s...de-finding-fake
https://www.vingle.net/posts/3587193
https://fortunetelleroracle.com/sport/replica-watches-280478
https://www.goodreads.com/story/show/132736...ake-rolex-watch
https://www.diigo.com/item/note/85twz/phwr?...2395edb2dac07ea
https://github.com/ReplicawatchesUK/Replica...ake-Rolex-Watch
https://www.reddit.com/user/Bestreplicawatc...ke_rolex_watch/
https://slashdot.org/submission/13306958/wa...ake-rolex-watch
https://www.wattpad.com/1030107359-replica-...guide-finding-a
https://www.instructables.com/member/Fakero...licPreview=true
Участник оффлайн! watchesonline89
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  26.12.2022 11:02     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

https://omegawatches89.simplesite.com/452939033
https://dailygram.com/index.php/blog/116219...eplica-watches/
https://plaza.rakuten.co.jp/omegawatches89/...y/202208040000/
https://blog.easyfie.com/how-to-prepare-you...on/#comment-285
https://form.jotform.com/223253786289064
https://discussions.ubisoft.com/user/omegawatches89
https://www.worldranklist.com/profile/108194
https://blog.udn.com/omegawatches89/176226568
https://penzu.com/p/56f52c40
https://62e8ce2ae5d50.site123.me/blog/tips-...replica-watches
https://omegawatches91.mystrikingly.com/
https://ameblo.jp/omegawatches89/entry-12756647425.html
https://telegra.ph/Where-To-Find-Elegant-An...es-Online-08-03
https://omegawatches89.seesaa.net/article/490300768.html
https://medium.com/@omegawatches89/reasons-...ar-e16d1fabc26f
https://omegawatches89.simplesite.com/452939109
https://teletype.in/@omegawatches89/bVw2sShID4x
https://www.pearltrees.com/omegawatches89#item456651209
https://dailygram.com/index.php/blog/116219...eplica-watches/

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.03.24 14:50
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft