Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
jelenarus |
Тут решили фосфорилировать праймеры и начал амплифицироваться СОВЕРШЕННО другой Бенд, да ещё такой яркий, а днк нужного размера либо очень слабая, либо её Вообще нет и куууча неспецифики! В чем может быть проблема? |
ksm Постоянный участник |
|
MMM Постоянный участник |
Сообщение было отредактировано MMM - 12.04.2018 19:02
|
Mykhaylo Постоянный участник Україна |
|
R-J-Dio Постоянный участник |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(R-J-Dio @ 13.04.2018 03:18) проблема в дополнительном магнии, который пришел в ПЦР из киназного буфера вместе с кинированными олигами. Можно посоветовать кинировать в более концетрированном виде и класть соответственно поменьше по объему в ПЦР или же оттитровать EDTA в сторону уменьшения (связывания) магния. Можно резко повысить темп.отжига, если дело в избытке магния. Да и почистить праймеры на ПААГе тоже вариант. Я бы пересинтезировал указав на возникшую проблему исполнителю. |
R-J-Dio Постоянный участник |
|
watchesonline89 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |