Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
alkhimmikk UQ |
Проблема в том, как их наколупать из мух с наибольшим выходом. Может кто-то может посоветовать високо эффективный способ, который был уже апробирован. Наперед спасибо, всем, кто отпишеться. PS: извините, если не совсем в тему форума |
bee1 Постоянный участник |
|
bee1 Постоянный участник |
(alkhimmikk @ 10.11.2011 09:40) В процесе моего проекта посвященному дрозофилам появилась необходимость сделать первичную клеточную линию с гемоцитов. Проблема в том, как их наколупать из мух с наибольшим выходом. Может кто-то может посоветовать високо эффективный способ, который был уже апробирован. Наперед спасибо, всем, кто отпишеться. ПС: извините, если не совсем в тему форума из кого из мух или из личинок ? |
bee1 Постоянный участник |
(alkhimmikk @ 10.11.2011 09:40) В процесе моего проекта посвященному дрозофилам появилась необходимость сделать первичную клеточную линию с гемоцитов. Проблема в том, как их наколупать из мух с наибольшим выходом. Может кто-то может посоветовать високо эффективный способ, который был уже апробирован. Наперед спасибо, всем, кто отпишеться. ПС: извините, если не совсем в тему форума огласите весь список "дрзофилиных клеточных линий" доступных коммерчески |
Panaev Постоянный участник |
|
alkhimmikk UQ |
Я использую линию S2, но знаю, що есть еще около десятка дрозофилячих линий - так как у наших колаборейторов есть они. Но у них нету поставленой методики выделения гемоцитов - они работают или с целыми мухами или делают "экстракцию" отдельных органов и частей тела - голова, ШКТ и т.п. А вот клетками - не занимаются. А мне желательно (очень) смочь выделить гемоциты, простимулировать их и посмотреть результат - то есть вести их надо будет до недели. На счет готовые рецепты или фантазии - хоть что-то. Потому как кроме банального - оттяпать голову и выдавить все - ничего не приходит. Но как потом их выбрать? |
Tom1 Постоянный участник |
пы.сы. если нет доступа к статье напишите свое мыло. отправлю. shibire mutations reveal distinct dynamin- independent and -dependent endocytic pathways in primary cultures of Drosophila hemocytes A. Guha1,2,*, V. Sriram1,*, K. S. Krishnan2,‡ and S. Mayor1,‡ 1National Center for Biological Sciences, Tata Institute of Fundamental Research, GKVK, Bangalore 560 065, India 2Department of Biological Sciences, Tata Institute of Fundamental Research, Homi Bhaba Road, Bombay 400 005, India Journal of Cell Science 2003, 116, 16 3373-3386 пы.сы.сы. К сожалению данный форум не дает выложит статью прямо тут.
|
Guest IP-штамп: frDIe.Rf.q8ow гость |
А если попробовать сделать клеточную суспензию из мухи, а потом на сортере виделить гемоцити? |
bee1 Постоянный участник |
(Tom1 @ 10.11.2011 19:34) 1. Не обращайте внимания на пьяную "пчелу" он окромя "писуар" ничего не знает. 2. Гляньте на сей опус может быть полезным. пы.сы. если нет доступа к статье напишите свое мыло. отправлю. шибире мутатионс ревеал дистинцт дынамин- индепендент анд -депендент ендоцытиц патхщаыс ин примары цултурес оф Дросопхила хемоцытес А. Гуха1,2,*, В. Срирам1,*, К. С. Кришнан2,‡ анд С. Маёр1,‡ 1Натионал Центер фор Биологицал Сциенцес, Тата Институте оф Фундаментал Ресеарч, ГКВК, Бангалоре 560 065, Индиа 2Департмент оф Биологицал Сциенцес, Тата Институте оф Фундаментал Ресеарч, Хоми Бхаба Роад, Бомбаы 400 005, Индиа Ёурнал оф Целл Сциенце 2003, 116, 16 3373-3386 пы.сы.сы. К сожалению данный форум не дает выложит статью прямо тут. Том -клтки ХеЛа могу растить и человечи хромосомы сортировать на ФАКСтар ПЛУС гемоциты лучше выделять из бальшой "мухи" типа Тигровая Креветака ( P.monodon) |
alkhimmikk UQ |
почитал, буду узнавать сможем ли мы это сделать на оборудовании у колаборейторов-муховодоведов. Guest IP-штамп: frDIe.Rf.q8ow - мы думали об этом, но хотим оставить это как последний вариант. Там их очень мало - около 20 тисяч на особь. И сложно выбрать то, по чем сортировать - есть у мухи большое "fat body" которое тоже иммуный орган и экспрессирует часто то же, что и гемоциты. |
bee1 Постоянный участник |
(alkhimmikk @ 11.11.2011 03:04) Большое спасибо Том1, почитал, буду узнавать сможем ли мы это сделать на оборудовании у колаборейторов-муховодоведов. Гуест ИП-штамп: фрДИе.Рф.я8ощ - мы думали об этом, но хотим оставить это как последний вариант. Там их очень мало - около 20 тисяч на особь. И сложно выбрать то, по чем сортировать - есть у мухи большое "фат боды" которое тоже иммуный орган и экспрессирует часто то же, что и гемоциты. просче сделать обратную сортировку на магнитных шариках если ест антитела |
alkhimmikk UQ |
|
Lolik Постоянный участник |
Я не знаю, насколько в Вашей работе нужны именно гемоциты взрослых мух, и есть ли какие-то принципиальные различия, но из личинок культуры получаются довольно просто, методом прокалывания их сзади и самоистечения гемолимфы. Помнится, он делал, в течение пары часов, ведро этих гемоцитов, так что хватало и еще выбрасывал. Отпишитесь, если нужен протокол.
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |