Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Вопрос по электрофорезу -- закупка реактивов --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! yanovskaya




 прочитанное сообщение 17.05.2019 05:44     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Добрый день уважаемые форумчане! Мне, как начинающему специалисту в области электрофореза, очень нужна ваша помощь. Я выложу список реактивов, которые планирую закупать. Достаточно ли мне этого будет для старта? Может что-то нужно добавить, без чего невозможно обойтись и провести 2D электрофорез. Бюджет правда очень ограничен. Спрашиваю у вас для подстраховки, так как сами понимаете, как "быстро" в России проводится закупки. Можно писать в личку.
1. Акриламид 2х перекристаллизованный (2К), не менее 98%, для электрофореза, Standard grade, extrapure, 500 г;
2. Акриламид 4х перекристаллизованный (4К), не менее 99,9%, для электрофореза, ultrapure, 500 г;
3. Аммоний персульфат (надсернокислый), для электрофореза, >98%, 250 г;
4. Бромфеноловый голубой (200- 350 п.о.), сод. красящего в-ва не менее 95%, Импорт, 25 г;
5. Глицин, molecular biology grade, 99.5%, 500 г;
6. Дитиотреитол-DL, >100 %, Импорт, 5 г;
7. Масло минеральное, для Protean i12 IEF и Protean IEF systems, 500 мл;
8. Метилен-бис-акриламид, более 99%, Mol bio grade, 50 г;
9. Мочевина, для электрофореза, 500 г;
10. Натрия додецилсульфат, >99%, BioChemical, 250 г;
11. Стрип IPG готовый, 7 см, pH 3-10 NL, 12 шт/уп, 1 уп;
12. Стрип IPG готовый, 7 см, pH 3–10, 12 шт/уп, 1 уп;
13. ТЕМЕД, 25 мл;
14. Трис гидрохлорид, Molecular biology grade, 250 г;
15. Трис(гидроксиметил)аминометан, не менее 99,0 % 100 г;
16. ЧАПС, не более 99%, 5 г.

Сообщение было отредактировано yanovskaya - 17.05.2019 05:49
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 17.05.2019 07:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Тиомочевина нужна. трис солянокислый не нужен, а вот соляная кислота нужна. Еще агарозки немного.
И совершенно непонятно чем вы собираетесь красить(выявлять) белки. Кумаси ярко синий хотя бы предусмотреть надо. Маркер мол весов белковый нужен. Ну по мелочи - глицерин к примеру. И зачем вам два акриламида? Берите какой-нибудь один.
Участник оффлайн! vooden




 прочитанное сообщение 17.05.2019 08:24     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

(MMM @ 17.05.2019 08:32)
Ссылка на исходное сообщение  Трис солянокислый не нужен, а вот соляная кислота нужна.

Соляная кислота - прекурсор. Если лаборатория уже не работает с прекурсорами, то ради одной соляной кислоты заводить систему учета нерационально. Лучше по таблицам мешать хлорид и гидрооксид.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 17.05.2019 11:23     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

(vooden @ 17.05.2019 09:24)
Ссылка на исходное сообщение  Соляная кислота - прекурсор.

Какой ужас!!!!! Ну собственно если лаборатория не работает с третьей таблицей четвертого списка, то это вроде как и не лаборатория, а офис.

Однако! Даже если и не работают. Можно использовать 10-12% солянку, которая прекурсором не является.

Таблиц для трисовых буферов для фореза в справочниках нет. А что бы одни справочные данные пересчитать в другие - боюсь у таких специалистов будут проблемы.
Участник оффлайн! Asterix
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 17.05.2019 13:49     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Самое главное это пропорции ... ТРИС закупайте по 5 кг обычного и может 1 кг суперчистого... Его очень много будет уходить на буфер, так же как и глицина . Все остальное у вас вполне в нормальных количествах , с хорошим избытком даже.

Ну и как сказали , кумасси и маркеры мол-веса. Берите крашеные , которые видно в геле , точный молекулярный вес по маркерам все равно не определить, это индикатор скорее.

Ну и кумасси для окраски геля растворяют в уксусной кислоте с метанолом и этим же составом и отмывают. Поетому их необходимо довольно много, даже если и рециклировать .. Ну по 5 литров закажите для начала.
Участник оффлайн! dk
Постоянный участник
Россия



 прочитанное сообщение 17.05.2019 20:01     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

Разрешите, и я вставлю свои "пять копеек".
Для фореза АкА не нужен высокой чистоты, возмите 2Х - хватит более чем.
ПерАм и ТЕМЕД очень много (если только про запас, но персульфат это не очень любит).
Если проблемы с солянкой - можно на трис-ЭДТА-борате работать, но он не для всех ферментов подходит.
Маркер белковых весов (не знаю, правда, с какими вы будете работать) можно "дёшево и сердито" на альбумины заменить.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 17.05.2019 20:42     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

(dk @ 17.05.2019 21:01)
Ссылка на исходное сообщение 
Для фореза АкА не нужен высокой чистоты, возмите 2Х - хватит более чем.

Это не правда. Акриламид нужен хороший(это не значит, что на нем должно быть обязательно написано: electrophoresis grade). Просто, покупая акриламид какой-нибудь для оргсинтеза. Можно нарваться как на великолепный, так и на ужасный препарат. А вот electrophoresis grade может быть не блестящим, но плохи не бывает. А то, что плохой акриламид есть причина размытых и хвостящих белковых зон - это медицинский факт.
Участник оффлайн! Asterix
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 17.05.2019 23:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

Да кстати , ЭДТА забыли ... тоже нужно пол-кило минимум ... он везде идет, нужный реактив.
Участник оффлайн! yanovskaya




 прочитанное сообщение 20.05.2019 11:25     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Спасибо большое всем за помощь!
Участник оффлайн! Blaid
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 20.05.2019 15:20     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

А что после двумерника (2D-электрофореза) делать собираетесь? Или он Вам нужен "сам по себе", без какого-либо продолжения (в виде, допустим, вестерн-блота или масс-спектрометрии)?
Если только форезом ограничиваться не собираетесь, то для продолжения понадобятся дополнительные реактивы и расходники.

А вариантов прокраски гелей (и их последующей отмывки) существует достаточно много. Есть такие, где нужны уксусная к-та и метанол, а есть такие, где понадобится что-то другое (или к уксусной и метанолу нужно будет что-то ещё, например медный купорос для контрастирования и повышения чувствительности).

Аналогом дитиотрейтола может быть бета-меркаптоэтанол (хотя он не очень удобен в работе из-за вонючести).

Сообщение было отредактировано Blaid - 20.05.2019 15:30
Участник оффлайн! yanovskaya




 прочитанное сообщение 21.05.2019 05:25     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

Вообще задача глобальная - развитие протеомных исследований в лаборатории.
Но на данные момент необходимо поставить методику оценки изоформ цитохрома P450. Дальше планируем проводить масс-спектрометрический анализ. Есть масс с ионной ловушкой и MALDI. Буду все пробовать.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 21.05.2019 10:22     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

Тогда вам ещё понадобиться бикарбонат аммония, трипсин для секвенирования или для масс-спектрометрии, ацетонитрил HPLC grade и матрица для MALDI. Из оборудования центрифужный вакуумный концентратор.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 21.05.2019 10:24     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

Отдельная, песня - это DIGE.
Участник оффлайн! TAMARA5
Участник



 прочитанное сообщение 22.05.2019 14:43     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

меняйте желтки на днк там форез можно гонять в водопроводной воде
https://www.researchgate.net/publication/82...onductive_media
Участник оффлайн! Fritz
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 23.05.2019 12:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

2 yanovskaya:
Если лаборатория/институт располагают имейджером (на манер ChemiDoc XRS+), то для целей высокой протеомики, вместо колдовства с окрасками-отмывками, можно с успехом использовать 2,2,2-трихлорэтанол и счастью не будет предела wink.gif
Участник оффлайн! Asterix
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 23.05.2019 23:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

2,2,2-трихлорэтанол - это отличный наркотик... весьма пролонгированного действия... Если будет возможность купить за грант и оформить на таможне как научный реактив, ... берите литрами ... потом все окупите сторицей
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 24.05.2019 07:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

(Asterix @ 24.05.2019 00:37)
Ссылка на исходное сообщение  2,2,2-трихлорэтанол  - это отличный наркотик... весьма пролонгированного действия... Если  будет возможность  купить  за  грант  и оформить на таможне как научный реактив,  ... берите литрами ...  потом все окупите сторицей


А вы не попутали его с хлораль гидратом. Трихлорэтанол относительно лабилен и склонен выделять HCl, так что он скорее язву желудка может вызвать, чем наркотическое опьянение.

Всего благодарностей: 2Поблагодарили (2): Fritz, Asterix
Участник оффлайн! Fritz
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 24.05.2019 16:57     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

(Asterix @ 23.05.2019 22:37)
Ссылка на исходное сообщение  2,2,2-трихлорэтанол  - это отличный наркотик... весьма пролонгированного действия... Если  будет возможность  купить  за  грант  и оформить на таможне как научный реактив,  ... берите литрами ...  потом все окупите сторицей


Что-то и правда не в ту степь, ибо....c трихлофосом Вы его перепутали, очевидно umnik.gif
Упрощенная матчасть: https://en.wikipedia.org/wiki/2,2,2-Trichloroethanol
Участник оффлайн! Daemonarchestratygos
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 30.05.2019 19:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

(MMM @ 17.05.2019 05:32)
Ссылка на исходное сообщение  трис солянокислый не нужен, а вот соляная кислота нужна.

А если у них рН-метра нет, с Tris-совместимым электродом? smile.gif
Участник оффлайн! dk
Постоянный участник
Россия



 прочитанное сообщение 30.05.2019 20:13     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

Можно у Досона в справочнике биохимика посмотреть объёмные прописи для нужного pH трис-HCl. Я так сто лет уже его не титрую - и всё ОК. Книжки для этого и пишутся.

Сообщение было отредактировано dk - 30.05.2019 20:14

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Daemonarchestratygos
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 31.05.2019 11:52     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

(Daemonarchestratygos @ 30.05.2019 20:37)
Ссылка на исходное сообщение  А если у них рН-метра нет, с Tris-совместимым электродом? smile.gif

А если у них весов нет и мерных цилиндров?..... confused.gif weep.gif shuffle.gif jump.gif?
Да, и "трис совместимые электроды" - это миф, выдуманный маркеторасами. mad.gif

Сообщение было отредактировано MMM - 31.05.2019 11:57

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): -Ъ-
Участник оффлайн! valiksharov




 прочитанное сообщение 31.05.2019 12:35     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

(MMM @ 31.05.2019 12:52)
Ссылка на исходное сообщение  А если у них весов нет и мерных цилиндров?.....  confused.gif  weep.gif  shuffle.gif  jump.gif?
Да, и "трис совместимые электроды" - это миф, выдуманный маркеторасами. mad.gif

вот тут днк можно быстро гнать в воде
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20471423
Участник оффлайн! Daemonarchestratygos
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 03.06.2019 01:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

(dk @ 30.05.2019 18:13)
Ссылка на исходное сообщение  Можно у Досона в справочнике биохимика посмотреть объёмные прописи для нужного pH трис-HCl. Я так сто лет уже его не титрую - и всё ОК. Книжки для этого и пишутся.

https://www.liverpool.ac.uk/pfg/Research/To...alc/Buffer.html
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 03.06.2019 05:49     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

(MMM @ 31.05.2019 09:52)
Ссылка на исходное сообщение  А если у них весов нет и мерных цилиндров?.....  confused.gif  weep.gif  shuffle.gif  jump.gif?
Да, и "трис совместимые электроды" - это миф, выдуманный маркеторасами. mad.gif

Ну вообще справедливости ради, если нормальные реактивы, то смешивая основной и гидрохлорид, мы получаем более стабильные результаты. Так как меньше возможности ошибки совершить. Правильно титровать и измерять рН еще нужно научить и не всегда это получается. Лаборанты ну очень разные бывают.
таблицы были прям в каталоге сигмы smile.gif
Участник оффлайн! R-J-Dio
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 03.06.2019 07:04     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

И то верно. Если объемы невеликие, тем более
Участник оффлайн! hopfen
Участник



 прочитанное сообщение 03.06.2019 18:28     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

(MMM @ 17.05.2019 08:32)
Ссылка на исходное сообщение  Тиомочевина нужна. трис солянокислый не нужен, а вот соляная кислота нужна. Еще агарозки немного.
И совершенно непонятно чем вы собираетесь красить(выявлять) белки. Кумаси ярко синий хотя бы предусмотреть надо. Маркер мол весов белковый нужен. Ну по мелочи - глицерин к примеру. И зачем вам два акриламида? Берите какой-нибудь один.

https://en.wikipedia.org/wiki/SB_buffer
Участник оффлайн! Alex1979

Россия



 прочитанное сообщение 19.07.2019 14:02     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

Добрый день. Коллеги, хочу приобрести CE (пептидные карты и многое другое). Выбираю между двумя производителями Sciex CESI8000Plus и Agilent 7100 с возможность подключения к мс-мс. Последний привлекательнее по цене. Но, хотелось бы услышать мнения тех, кто работал с ними. Стоит ли переплачивать? Очень важен качественный сервис и аппликационная поддержка. На Sciex получили предложение от двух фирм М-спектр и Альгимед, кто сталкивался с ними?
Участник оффлайн! Arbeiter-Samaritier-Bund




 прочитанное сообщение 19.07.2019 19:33     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

(Alex1979 @ 19.07.2019 15:02)
Ссылка на исходное сообщение  Добрый день. Коллеги, хочу приобрести ЦЕ (пептидные карты и многое другое). Выбираю между двумя производителями Сциех ЦЕСИ8000Плус и Агилент 7100 с возможность подключения к мс-мс. Последний привлекательнее по цене. Но, хотелось бы услышать мнения тех, кто работал с ними. Стоит ли переплачивать? Очень важен качественный сервис и аппликационная поддержка. На Сциех получили предложение от двух фирм М-спектр и Альгимед, кто сталкивался с ними?

Агилент в свое время меня достал уебисчем в виде ДНК микроаррев lol.gif lol.gif
с капами Агилента не работал но с микроарреями и сканнерами weep.gif weep.gif weep.gif weep.gif
Агилент 7100 с
Ваамсчето Агилент исcторичесcки американсcкие електрики которых ешо током не убило beer.gif beer.gif jump.gif
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  10.11.2021 19:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

https://wanelo.co/replicarolexwatches
https://musescore.com/fakerolexwatches
https://www.racked.com/users/Replicarolexwatches
https://sketchfab.com/Rolexrelicawatches
http://www.video-bookmark.com/bookmark/433...eplica-watches/
https://www.slideserve.com/ReplicawatchesUK...pt-presentation
https://www.theverge.com/users/Replicarolexwatches
https://www.yumpu.com/en/document/read/6532...lica-watches-uk
https://online.flippingbook.com/view/152275247/
https://www.instapaper.com/p/8767342
https://www.bigblueview.com/users/Replicarolexwatches
https://weheartit.com/watcheshutuk
https://sites.google.com/view/replicarolexwatches24/home
https://www.indiehackers.com/post/hints-on-...atch-113aef73a9
http://replicawatchesuk.esportsify.com/for...ica-rolex-watch
Участник оффлайн! watchesonline89
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  25.12.2022 10:40     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

https://omegawatches89.seesaa.net/article/490300647.html
https://list.ly/i/8020067
https://wakelet.com/wake/FbtgXuYkRErMzQ1HUDcgZ
https://fortunetelleroracle.com/fashion/exc...a-online-737625
https://omegawatches89.blog.hu/2022/11/13/u...log_hu-n_109243
https://trello.com/w/omegawatches891/account
https://omegawatches89-95.webselfsite.net/notre-produit
https://blog.udn.com/omegawatches89/176226699
https://omegawatches89.seesaa.net/article/490300795.html
https://ameblo.jp/omegawatches89/entry-12756688272.html
https://www.vingle.net/posts/4647040
https://wakelet.com/wake/H0vWrtoDDLsN1D3RnAjp6
https://penzu.com/p/5778d3b5
https://telegra.ph/Exciting-Deals-Offered-O...ca-Online-08-03
https://omegawatches89.simplesite.com
https://ameblo.jp/omegawatches89/entry-12756647075.html
https://omegawatches89.simplesite.com/452939039
https://telegra.ph/Amazing-Offers-Available...es-Online-08-03

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.03.24 14:58
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft