Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Rob Участник |
имеется белок, размер 75kDa. Я его биотинилировал вот этим биотином. При расчете брал избыток 20 (фолд) при концентрации 1mg/mL . Мой руководитель сказал, что надо бы брать избыток около 4. Какой оптимальный избыток по вашему мнения верный? |
MMM Постоянный участник |
Избыток вы привели молекулярный или весовой? Сколько лизинов в молекуле белка? Какую цель преследует биотинилирование? Важно ли сохранить нативность и функцию белка? |
Rob Участник |
Я надеюсь с помочью умных людей разобраться в механизме биотинилирования. Формула такова: (mL protein)x(concentration protein mg/mL)x(1mmol protein/mw protein Da)x(20mmolBiotin/1mmol protein)=mmol Biotin Если Вы знакомы с принципами биотинилирования EZ-Link™ Sulfo-NHS-Biotin и готовы помочь, то буду благодарен. 20 moles Биотина на 1 mole белка. Про лизины - нету информации. Цель биотинилирования - Элайза. Благодарю |
MMM Постоянный участник |
Первичные аминогруппы поставляются только не модифицированными по амину лизинами белка и не кэпированной(не модифицированной) аминогрупой N-концевой аминокислоты. Остальное определяется желаниями исследователя и влиянием биотинилирования на функции белка. Как водится, эти факторы зависят от исследователя и белка и в каждом случае носят индивидуальный характер. Я надеюсь, что не сообщил вам ничего нового, если же вы надеялись получить какую-то более прекрасную информацию, то надежды ваши были напрасны.
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |