Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
MOW-7798 |
Основной вопрос о возможности рефолдинга без b2m и влияния высокого (>10) pH на белок. |
genseq Постоянный участник |
Мембранные белки лучше не восстанавливать, а получать бесклеточным синтезом в присутствии детергентов. Или даже не детергентов, а мембран, в которые они встраиваются в процессе синтеза. Файл/ы:
|
MOW-7798 |
(genseq @ 03.06.2017 19:03) А зачем Вам рефолдинг? Мембранные белки лучше не восстанавливать, а получать бесклеточным синтезом в присутствии детергентов. Или даже не детергентов, а мембран, в которые они встраиваются в процессе синтеза. Предполагается дальше передавать белок на иммунизацию, а при бесклеточном синтезе, насколько я понял, выход слабый для таких целей. |
genseq Постоянный участник |
|
MOW-7798 |
(genseq @ 03.06.2017 22:01) Обычно нарабатывают 2...3 мг/мл. Для иммунизации вполне достаточно. Действительно, интересно. Тогда изучу подробней, там может еще вопросы будут) Спасибо за информацию) |
MMM Постоянный участник |
|
MOW-7798 |
(MMM @ 04.06.2017 00:53) Чтобы получать антитела на нативную форму белка. |
MMM Постоянный участник |
|
MOW-7798 |
(MMM @ 04.06.2017 07:38) Ооо! Нативная форма белка вовсе не гарантирует получение антител именно на нативную форму, а денатурированная воавсе не гарантирует что полученные антитела не будут видеть нативную. Вот если только вам нужны антитела, которые будут отличать нативную форму от денатурированной вот только тогда надо использовать нативный белок для иммунизации и делать панели моноклонов и только моноклонов и еще не факт, что с одной панели и одной гибридизации удастся получить необходимый клон. Это все понятно, но шансов больше) ну уж на методику получения антител я повлиять не смогу, с меня белок) |
MMM Постоянный участник |
|
Fritz Постоянный участник Москва |
Тем не менее, учитывая структурные особенности, МНС - Вам бы конкретный домен выбрать, а там уже поискать не особо консервативные регионы, 2-3 шт, да просто пептидным синтезом обойтись (ИМХО). |
Fritz Постоянный участник Москва |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |