molbiol.ru -> myeloperoxidase & horseradish peroxidase

> Все форумы > Тематические форумы > Молекулярная и клеточная биология

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Правила FAQ* Поиск* Участники* Календарь* Избранные темы* Форум Форумов*

Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ]

Форум:

* myeloperoxidase & horseradish peroxidase

Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

anti anti

07.06.2019 10:58

URL #1

Асалам алейкум братья! Вопрос такой: могут ли конкурировать за субстрат эндогенные пероксидазы человека (из сыворотки) и пероксидаза хрена (из конъюгата) и путём восстановления перекиси и окрашивания хромогена в ИФА или вестерне давать фон?

MMM
Постоянный участник

07.06.2019 12:27

URL #2

А откуда на блоте человеческая сыворотка. Если это ЭФ-проба, то там все пероксидазы хорошо так проварились. Но даже если мы допустим, что они частично ренатурировали, то фона они давать не могут, а должны давать артефактные дополнительные бэнды.

Сообщение было отредактировано MMM - 07.06.2019 12:28

anti anti

07.06.2019 12:46

URL #3

Спасибо МММ что откликнулись, чтоб я без вас делал! Человеческая сыворотка - как источник антител. Но не суть, вот смотрите, ставим блот или ифа или вообще дот блот без эф разделения, не важно что сорбируем(какой-либо антиген) на пластик/мембрану, далее капаем сыворотку => капаем конъюгат с HRP => капаем ТМБ и детектируем сигнал и может ли так получится что мембрана посинела/проба окрасилась из-за эндогенной пероксидазы сыворотки а не HRP конъюгата?

MMM
Постоянный участник

07.06.2019 15:51

URL #4

Если вы нормально забили мембрану и используете хороший ,буфер, препятствующий неспецифическому связыванию, то - нет.
Кстати, при забивке молоком фон может теоретически давать лактопероксидаза, но я с этим никогда не сталкивался.

anti anti

07.06.2019 18:51

URL #5

не не никаких молок, только казеинат натрия, буфер нормальный вроде, с бса

MMM
Постоянный участник

08.06.2019 08:57

URL #6

(anti anti @ 07.06.2019 19:51)

не не никаких молок, только казеинат натрия, буфер нормальный вроде, с бса

Тогда как пероксидаза из сыворотки сможет зацепиться за мембрану или какую другую поверхность? К тому же пользоваться сывороткой, а не аффинно-очищенными АТ - это моветон.

watchesbiz
Постоянный участник

11.11.2021 10:50

URL #7

http://replicarolexwatches.simpsite.nl/
https://www.smore.com/rj7kh-best-replica-watches
https://www.athleticsnation.com/users/Replicarolexwatches
https://pastebin.pl/view/ab0e458a
https://mix.com/watcheshutukcom
https://www.woddal.com/post/359216_tiny-acc...nybody-039.html
https://share.naturalnews.com/posts/3904099
https://demo.wowonder.com/post/214429_the-i...-producers.html
https://rapichat.com/post/5369_our-purpose-...ible-there.html
https://dashburst.com/replicarolexwatches/1
https://sway.office.com/KifcQvn36MK821G8
https://flipboard.com/@replicarolex24
https://getpocket.com/redirect?url=https%3A...eshut.uk.com%2F
https://www.openstreetmap.org/user/Hints%20...20Rolex%20Watch

watchesonline89
Постоянный участник

25.12.2022 10:34

URL #8

https://ameblo.jp/omegawatches89/entry-12756646005.html
https://omegawatches89.bigcartel.com/produc...s-replica-rolex
https://penzu.com/p/d8b4c076
https://omegawatches89.gumroad.com/p/reason...-are-so-popular
https://omegawatches89.gumroad.com/p/tips-f...replica-watches
https://omegawatches89-95.webselfsite.net/a-propos
https://anotepad.com/notes/2w2d9wgq
https://www.myminifactory.com/stories/reaso...s-6331ca21647d6
https://omegawatches89.seesaa.net/article/490300837.html
https://blog.udn.com/omegawatches89/176226733
https://62e8da780bf7c.site123.me/blog/where...-watches-online
https://wakelet.com/wake/NSGeOdLxkniZ60lTSrkpM
https://telegra.ph/Replica-Watches-Find-Hig...ms-Online-08-03
https://omegawatches89.simplesite.com/452939025

Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.

Имя:

Отправка сообщений использует JavaScript операции. В вашем броузере не
установлено/отключено выполнение JavaScript программ. Используйте Netscape Navigator
или Internet Explorer (не ранее 3 версии); убедитесь, что выполнение JavaScript
программ разрешено в настройках вашего броузера.