Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Проточная цитометрия с визуализацией изображения Amnis ImageStream -- ....приложения. --
Компания Biocommerce - официальный дистрибьютер продукции компаний Miltenyi Biotec GmbH (Германия) и RanD S.r.l. (Италия).
Тема связана с: Amnis ImageStream
Кураторы темы:* Дядя ФАКСер
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Дядя ФАКСер
moderator
Nothern Maccaronia, Ticinum



 прочитанное сообщение 12.09.2017 10:38     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование
Информация
Данная тема создана для размещения материалов и дискуссий по приложениям проточной цитометрии с визуализацией Amnis ImageStream.

картинка: multimag.jpg

Our Amnis® Imaging Flow Cytometers (IFC) synergize three vital Merck principles by providing highly multiparametric analysis to simplify heterogeneous biological systems, increasing data richness, and boosting productivity via simplifying workflows.



скачать файл Imaging_Flow_Cytometry_brochure.pdf
размер: 12.08мб
кол-во скачиваний: 309




  Тема ассоциирована со страницей: Проточная цитометрия с визуализацией изображения Amnis ImageStream  
Участник оффлайн! Дядя ФАКСер
moderator
Nothern Maccaronia, Ticinum



 прочитанное сообщение 22.09.2017 15:56     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Пример использования проточной цитометрии с визуализацией в нейробиологии:

The anti-inflammatory Annexin A1 induces the clearance and degradation of the amyloid-β peptide

Ries et al. Journal of Neuroinflammation (2016) 13:234




Abstract Background: The toxicity of amyloid-β (Aβ) peptide present in the brain of Alzheimer’s disease (AD) patients is thought to be mediated via the increased secretion of pro-inflammatory mediators, which can lead to neuronal dysfunction and cell death. In addition, we have previously shown that inflammation can affect Aβ generation. More recently, we have reported that in vitro administration of the anti-inflammatory mediator Annexin A1 (ANXA1) following an inflammatory challenge suppressed microglial activation and this effect was mediated through formyl peptide receptor-like 1 (FPRL1/FPR2) signalling. The aim of this study was to determine the potential role of ANXA1 in the generation and clearance of Aβ. Methods: We first compared ANXA1 protein expression in the brains of AD patients and healthy controls as well as in the 5XFAD model of AD. To determine the role of ANXA1 in the processing of amyloid precursor protein (APP) and the degradation of Aβ, N2a neuroblastoma cells were treated with human recombinant ANXA1 or transfected with ANXA1 siRNA. We also investigated the effect of ANXA1 on Aβ phagocytosis and microglial activation in BV2 cells treated with synthetic Aβ. Results: Our data show that ANXA1 is increased in the brains of AD patients and animal models of AD at early stages. ANXA1 was able to reduce the levels of Aβ by increasing its enzymatic degradation by neprilysin in N2a cells and to stimulate Aβ phagocytosis by microglia. These effects were mediated through FPRL1 receptors. In addition, ANXA1 inhibited the Aβ-stimulated secretion of inflammatory mediators by microglia. Conclusions: These data suggest that ANXA1 plays a pivotal role in Aβ clearance and supports the use of ANXA1 as potential pharmacological tool for AD therapeutics.


После фагоцитоза, клетки промывали три раза холодным PBS и отсоединяли от планшетов с использованием трипсина (0,20%). Собранные клетки были фиксированы 2% PFA в течение 10 мин при комнатной температуре. Проточная цитометрия с анализом изображений клеток была выполнена на ImageStream X Mark II под управлением ПО INSPIRE (Amnis Corporation). Была зарегистрирована флуоресценция Aβ1-42 с 5-FAM с использованием возбуждения 488 нм лазером при 50 мВт, события собраны с помощью фильтра 480-560 нм в канале 2 (CH2), в то время как светлопольные изображения яркого поля были собраны в каналах 1 (CH1) и 9 (CH9). Образцы BV2, которые не были инкубированы с 5-FAM-мечеными Aβ1-42 (контрольный отрицательный фагоцитоз) собирали при тех же настройках в порядке гейтирования разных популяций клеток (отрицательный или положительный фагоцитоз). Анализ морфологии клеток был осуществлён на основе
В каждом эксперименте шаблон настроек, используемый для анализа
Контрольных клеток был создан и применен ко всем файлам.
Для каждого образца было собрано 10 000 событий; данные были проанализированы с использованием программного обеспечения IDEAS Application 6.1 (Корпорация Amnis).

Для дальнейшего подтверждения специфичности эндогенного ANXA1 эффекта на фагоцитозе Aβ1-42, мы протестировали эффект ANXA1 нокдауна на микроглиальный фагоцитоз 5-FAM-меченых Aβ1-42. BV2-клетки, инфицированные shRNA лентивирус ом(дикого типа, PKCO и shRNA ANXA1-клон 492) инкубировали (3 ч) с 5-FAM-меченным Aβ1-42 (5 мкг / мл) и измеряли фагоцитоз с использованием метода проточной цитометрии изображений клеток ImageStream. Эффективность
shRNA-инфекция показана на рисунках.
Как показано на рисунке, фагоцитоз 5-FAM меченых Aβ1-42 был значительно снижен в ANXA1 нокдаун по сравнению с контрольными клетками BV2 и
mock-инфицированных клеток BV2. Репрезентативные гистограммы цитометрического анализа изображений 5-FAM-меченых Aβ1-42
фагоцитоз показаны также на рисунках.
На рисунке показано количественное определение 5-FAM-меченого фагоцитоза Aβ1-42 клетками BV2.

А. Гистограмма показывает гейтирование клеток BV2.
B. Скаттер- плот показывает гейтирование сфокусированных клеток BV2
С. Гистограмма и изображения отрицательного и положительного 5-FAM-меченного фагоцитирования Aβ1-42 клетками BV2.
D. Репрезентативные гистограммы 5-FAM-меченого Aβ1-42фагоцитирования клетками BV2 (WT, контрольная shRNA и
shRNA ANXA1), инкубировали в течение 3 ч с 5-FAM-меченым Aβ1-42 (5 мкг / мл), добавляли к среде, кондиционированной BV2.

картинка: 1.jpg
картинка: 2.jpg
картинка: 3.jpg
картинка: 4.jpg


скачать файл 2016_Ries_JNeuroinflammation.pdf
размер: 2.42мб
кол-во скачиваний: 198




  Тема ассоциирована со страницей: Проточная цитометрия с визуализацией изображения Amnis ImageStream  
Участник оффлайн! Дядя ФАКСер
moderator
Nothern Maccaronia, Ticinum



 прочитанное сообщение 21.11.2017 10:26     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Параметры чувствительности и селективности являются ключевыми для любого метода измерений. В нижеприведенной короткой презентации сравниваются чувствительности на разных флуоресцентных каналах у BD Fortessa (традиционный проточный цитометр) и Amnis Flowsight (упрощенной версии платформы Amnis Imagestream, с одним мультиспектральным каналом)

картинка: Slide1.JPG

картинка: Slide2.JPG

картинка: Slide3.JPG

картинка: Slide4.JPG

  Тема ассоциирована со страницей: Проточная цитометрия с визуализацией изображения Amnis ImageStream  
Участник оффлайн! Дядя ФАКСер
moderator
Nothern Maccaronia, Ticinum



 прочитанное сообщение 12.12.2017 22:45     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

А вот очень красивый пример использования технологий ImageStream в анализе развития и дифференцировки остеопрогениторов:

Transient Canonical Wnt Stimulation Enriches Human Bone Marrow Mononuclear Cell Isolates for Osteoprogenitors

AGNIESZKA A. JANECZEK,a,b,c RAHUL S. TARE,a,b,c EDOARDO SCARPA,a,b,c INES MORENO-JIMENEZ,a,b,c CAROLINE A. ROWLAND,d DOMINIC JENNER,d TRACEY A. NEWMAN,e RICHARD O. C. OREFFO,a,b,c NICHOLAS D. EVANS a,b,c

ABSTRACT
Activation of the canonical Wnt signaling pathway is an attractive anabolic therapeutic strategy for bone. Emerging data suggest that activation of the Wnt signaling pathway promotes bone mineral accrual in osteoporotic patients. The effect of Wnt stimulation in fracture healing is less clear as Wnt signaling has both stimulatory and inhibitory effects on osteogenesis. Here, we tested the hypothesis that transient Wnt stimulation promotes the expansion and osteogenesis of a Wnt-responsive stem cell population present in human bone marrow. Bone marrow mononuclear cells (BMMNCs) were isolated from patients undergoing hip arthroplasty and exposed to Wnt3A protein. The effect of Wnt pathway stimulation was determined by measuring the frequency of stem cells within the BMMNC populations by fluorescence-activated cell sorting and colony forming unit fibroblast (CFU-F) assays, before determining their osteogenic capacity in in vitro differentiation experiments. We found that putative skeletal stem cells in BMMNC isolates exhibited elevated Wnt pathway activity compared with the population as whole. Wnt stimulation resulted in an increase in the frequency of skeletal stem cells marked by the STRO-1bright/Glycophorin A2 phenotype. Osteogenesis was elevated in stromal cell populations arising from BMMNCs transiently stimulated by Wnt3A protein, but sustained stimulation inhibited osteogenesis in a concentration-dependent manner. These results demonstrate that Wnt stimulation could be used as a therapeutic approach by transient targeting of stem cell populations during early fracture healing, but that inappropriate stimulation may prevent osteogenesis.
STEM CELLS 2016;34:418–430


картинка: osteo.jpg


скачать файл 2016_Janeczek_STEM_CELLS.pdf
размер: 1.07мб
кол-во скачиваний: 334




  Тема ассоциирована со страницей: Проточная цитометрия с визуализацией изображения Amnis ImageStream  
Участник оффлайн! сметана5




 прочитанное сообщение 27.12.2017 16:27     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

дять гейты достаточно халявные

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Дядя ФАКСер


  Тема ассоциирована со страницей: Проточная цитометрия с визуализацией изображения Amnis ImageStream  
Участник оффлайн! watchesonline89
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  05.01.2023 12:02     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

https://62e8ce2ae5d50.site123.me/
https://www.vingle.net/posts/4647029
https://eatsleepride.com/c/383272
https://anotepad.com/notes/prkpsawt
https://demo.wowonder.com/1665548793521727_195426
https://linktr.ee/omegawatches89
https://omegawatches89.gumroad.com/p/reason...replica-watches
https://omegawatches93.mystrikingly.com/
https://writer.zoho.com/writer/open/k3enw04...fea14e95e0ee806
https://www.edocr.com/v/rakkz4oq/omegawatch...-replica-online
https://diigo.com/0pigfx
https://62e8ce2ae5d50.site123.me/blog/reaso...replica-watches
https://www.worldranklist.com/preview/bookm...s-Online-Store-
https://omegawatches89-95.webselfsite.net/contact
https://form.jotform.com/223252982096057

  Тема ассоциирована со страницей: Проточная цитометрия с визуализацией изображения Amnis ImageStream  
Участник оффлайн! watchesonline89
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  09.01.2023 12:16     Сообщение для модератора  Сообщение для куратора темы       Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

https://62e8ce2ae5d50.site123.me/
https://www.vingle.net/posts/4647029
https://eatsleepride.com/c/383272
https://anotepad.com/notes/prkpsawt
https://demo.wowonder.com/1665548793521727_195426
https://linktr.ee/omegawatches89
https://omegawatches89.gumroad.com/p/reason...replica-watches
https://omegawatches93.mystrikingly.com/
https://writer.zoho.com/writer/open/k3enw04...fea14e95e0ee806
https://www.edocr.com/v/rakkz4oq/omegawatch...-replica-online
https://diigo.com/0pigfx
https://62e8ce2ae5d50.site123.me/blog/reaso...replica-watches
https://www.worldranklist.com/preview/bookm...s-Online-Store-
https://omegawatches89-95.webselfsite.net/contact
https://form.jotform.com/223252982096057

  Тема ассоциирована со страницей: Проточная цитометрия с визуализацией изображения Amnis ImageStream  

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Клеточные технологии · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 29.03.24 09:35
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft