Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
marykary |
Сообщение было отредактировано marykary - 24.03.2014 16:42 |
guest: ммм IP-штамп: frQlBxj4iQSg. гость |
|
бутанол Постоянный участник Новосибирск |
|
Guest IP-штамп: frGqyYT8IU7LU гость |
1. Хорошо отмывать клетки после фиксации (но не перестарайтесь - формальдегидная фиксация до некоторой степени обратима); 2. Забивать в хлориде аммония можно дольше (1 час, например), но лучше, как уже выше указали, забить натрий борогидридом (инкубируют 30 мин в свежем растворе борогидрида (он водород сильно выделяет) в буфере с рН 8, борогидрида - 2-10 мг/мл, кажется) - борогидрид, из нашего опыта, может давать неплохой результат, но не всегда 3. Забивать в БСА перед первичными и вторичными антителами, с хорошей отмывкой после антител 4. Использовать флюоресценты, не совпадающие со спектром автофлюоресценции 5. Качество фиксатора и время фиксации тоже явно влияет на все это дело. По-разному приготовленный, свежий-несвежий фиксатор дает разные результаты |
guest: marykary IP-штамп: frJsuiia8dM6. гость |
|
watchesonline89 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |