Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Irenemor |
Картинки: 2016_11_17_13.00.47.png — (414.98к) |
ship Постоянный участник Moscow |
|
Irenemor |
|
ksm Постоянный участник |
Сообщение было отредактировано ksm - 18.11.2016 00:49 |
Irenemor |
|
Panaev Постоянный участник |
Теоретически ДНК из пробы может быть. Но эукариотическая чаще всего валится на фрагменты 2-10 кб. Чтоб так мелко пощепилась я не видел. |
Irenemor |
|
Guest IP-штамп: frChUhTI1vb3o гость |
|
Irenemor |
|
ship Постоянный участник Moscow |
ну и кстати 1 мкл в реакцию 10 мМ праймеров - это перебор. вероятно все таки сток праймеров 10 мкМ? |
Irenemor |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Ляпнула так ляпнула! Шефиня - дура. Школьники, стюденты, аспиранты понятно, но форез ... это ужас, постараться надо. |
Irenemor |
|
dk Постоянный участник Россия |
|
Irenemor |
В общем, моя психическая адекватность, кажется, доказана. А то, что она дура - это ее личные проблемы, ей с ними и жить. Спасибо огромное! |
Veshka Постоянный участник Москва |
Но кого это волнует? Праймеры, шраймеры.. Есть ПЦР и больше ничего не нужно, в 99% случаев. |
Irenemor |
|
ksm Постоянный участник |
|
ship Постоянный участник Moscow |
(genseq @ 21.11.2016 08:07) Если мне не изменяет склероз, 1 pМ в 1 мкл соответствует концентрации 1 мкМ. На реакцию (на 20...25 мкл) требуется 4...5 pM каждого праймера, хотя если ампликоны короткие, то можно добавить и 10 pM. Если добавить 1 мкл праймеров с концентрацией 10 мМ (!!!), то концентрация праймера в реакции (на 20...25 мкл) составит 400...500 мкМ. Т.е. каждый микролитр реакционной смеси будет содержать 400...500 pМ каждого праймера. А микролитров там 20...25. Наверное, исходная концентрация была не 10 мМ, а 10 мкМ. Тогда в каждом микролитре будет по 0,4...0,5 pМ каждого праймера. А в реакционной смеси объёмом 20 мкл праймеров будет по 8...10 pМ. Если всё-таки исходная концентрация составляла 10 мМ, то на форезе светятся праймеры. Причём при такой концентрации могли бы светиться и поярче. прежде чем все эти расчеты писать можно было бы прочитать всю ветку,где автор уточнила, что олиги были 10 микромолярные |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
Химики все, во всяком случае мои, выдают продукцию в разжеванном виде - #толькодабавьводы#, а лучше ТЕ нужного объема и будет у Вас 10 или 100 мкМ концентрация, т.е. 10- или 100- кратный раствор. И все, оптимизируй конечную концентрацию, которая, как правило, получается меньше 1 мкМ. А термины "количественно, в пкмолях" - не комильфо, лаб.жаргон. |
genseq Постоянный участник |
(-Ъ- @ 25.11.2016 10:20) Ты прав. Увидел явную лажу, но не стал вчитываться в последующие поправки и выпендрился не по делу. Надеялся, что после зачистки об этом никто не вспомнит, но ошибся. |
dk Постоянный участник Россия |
Тут не то что "соринку в глазу" - тут каждый пкмоль будут припоминать до смерти! |
nigoal123 IP-штамп: frAWeMdOsBSXM гость |
organic traffic from |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |