Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* "Слетает полплашки". В чем может быть проблема?
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! DeaRiate




 прочитанное сообщение 22.04.2021 23:25     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование
Проблема
Уважаемые коллеги, вечер добрый.

Может кто сталкивался с проблемой - при поставновке ПЦР-реал тайм слетает полплашки, сигнала просто нет, словно контроль.

Реакция генотипирования с двумя зондами, ставила эту систему не один раз. Но сейчас переклинило и все пошло по одному месту. В верхних рядях почему-то пропал сигнал, и появляется по нарастающей к нижним рядам - где все окей.

Смесь одна и та же, пробовала менять образцы местами - картина та же, внизу плашки образец проходит, сверху - практически нет.

Сначала думали, что проблема с детекцией (несмотря на то, что такая проблема только у меня). Прибор откалибровали. Снова та же картина. Проверила на форезе - реакция не идет, почему то что-то ее ингибирует, но вопрос, что? Как? Я уже всю голову сломала....

Пока перешла на стрипы, с ними хоть как-то. Но опять же, выборочно сверху в 4-8 столбиках 1-3 ряд некоторые ячейки имеют более слабый сигнал у техн. повторов.

Но ставить постоянно на стрипах не вариант, у кого-то была подобная ситуация? В чем может быть проблема? Что я такое могу заносить в реакцию?
Участник оффлайн! dk
Постоянный участник
Россия



 прочитанное сообщение 25.04.2021 17:05     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Я бы поставил всю плашку с одним миксом, который точно даёт реакцию. И тогда посмотреть - во всех ли лунках одинаковый сигнал. Если всё везде ОК - надо грешить на подготовку ПЦР. Если и так всё "криво" - то у вас проблема с ПЦРницей. Может, элементы Пельтье помирают, может как-то на температурный градиент переклинило у него в "мозгах".
Участник оффлайн! DeaRiate




 прочитанное сообщение 26.04.2021 00:00     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

В том то и суть, что у всех остальных реакция проходит нормально.

Когда я ставила 6 стрипов - тоже все прошло. Ставлю плашку - верхние ряды лежат...

То есть какой-то косяк при постановке, но вот хоть убейте не понимаю в чем именно. Микс - рабочий, образцы тоже. Я уже просто отчаялась понять что не так frown.gif

Сообщение было отредактировано DeaRiate - 26.04.2021 00:01
Участник оффлайн! dk
Постоянный участник
Россия



 прочитанное сообщение 26.04.2021 10:48     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Странно, т.е. Вы считаете что блок греется нормально? Тогда остаётся поставить ту же рекцию на другом приборе - больше ничего тут не придумаешь. Если и там будут такие же "чудеса" - то остаётся только грешить на пластик (взять плашки другого типа?).
У вас в настройках программы точно никакой градиент не включился случайно? Если у Вас верхние ряды не идут - очень уж похоже...

Сообщение было отредактировано dk - 26.04.2021 10:51
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 27.04.2021 11:40     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Миксы сами варите, что за плашки, ПЦРник какой у Вас и сколько лет отработал и, наконец, какую программу для ПЦР используете, плавное затухание сигнала???? Всю эту инфу прошу в студию!
Я тоже склоняюсь к тому, что сказал dk - термоблок "чудит", т.е. работает на грани. У других проходит - значит, программа у них с запасом по времени, а у Вас на грани, балансируете со своим генотипированием и зондами в одной пробирке.
Совет мой - добавьте для каждой температуры еще по 20 сек, а на денатурации доведите температуру до 95-96. Если все пойдет нормально на такой программе, везите прибор на починку. Дело только в нем (сказал он с умным выражением лица). smile.gif
Участник оффлайн! banned sceptique-NMRguy
Постоянный участник
временной жизни



 прочитанное сообщение 27.04.2021 14:05     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

Раз в 3 (три) года положено менять термоболок в Вашем приборе. Зовите инженеров производителя и ищите деньги на это у государства. ПРоцедура это не дешевая, но пельтье сейчас стали делать так, чтобы раз в 3-5 лет они плыли и ломались.

Еще вариант: поставьте в планшете с "юбкой" или "полуюбкой" - если опять начнет всё получаться - то это точно термоблок. Проверьте, не проминаются ли Ваши пробирки в верхних рядах при их зажатии крышкой прибора. Если Ваши и других коллег пробирки отличаются и прибор откалиброван по высоте пробирок под другие - ваши анализы могут не идти.

Сообщение было отредактировано banned sceptique-NMRguy - 27.04.2021 14:07
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  02.06.2021 04:34     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

https://wanelo.co/replicarolexwatches
https://musescore.com/fakerolexwatches
https://www.racked.com/users/Replicarolexwatches
https://sketchfab.com/Rolexrelicawatches
http://www.video-bookmark.com/bookmark/433...eplica-watches/
https://www.slideserve.com/ReplicawatchesUK...pt-presentation
https://www.theverge.com/users/Replicarolexwatches
https://www.yumpu.com/en/document/read/6532...lica-watches-uk
https://online.flippingbook.com/view/152275247/
https://www.instapaper.com/p/8767342
https://www.bigblueview.com/users/Replicarolexwatches
https://weheartit.com/watcheshutuk
https://sites.google.com/view/replicarolexwatches24/home
https://www.indiehackers.com/post/hints-on-...atch-113aef73a9
http://replicawatchesuk.esportsify.com/for...ica-rolex-watch
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  25.09.2021 06:33     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

https://archives.profsurv.com/forum/Profess...ert/-67881.aspx
https://atlanta.bubblelife.com/community/an...ex_Watch_Online
https://gumroad.com/rolexrelicawatches/p/di...replica-watches
https://onmogul.com/stories/guide-on-how-to...ex-watch-online
https://list.ly/i/5704105
https://www.behance.net/gallery/114237003/Replica-Rolex
https://www.mlbdailydish.com/users/Replicarolexwatches
http://replicawatches24.simplesite.com/
https://watcheshutuk.cabanova.com/
https://www.pinterest.com/watcheshutuk/_saved/
https://www.linkedin.com/pulse/guide-how-pu...online-hei-bai/
https://justpaste.it/8t11q
https://padlet.com/watcheshutuk/in2opwnfmnmclce8
https://www.allforxi.com/users/Replicarolexwatches
https://profile.hatena.ne.jp/Rolexrelicawatches/profile

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 20.04.24 02:59
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft