 * |   |
|
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда |  Zbio-wikiNG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: |
|
Правила
* Diatom DNA Elution -- Набор реагентов для элюции ДНК --
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.
   |
 IskusnykhGermany  |
 22.11.2010 10:56
|
|
Guest IP-штамп: fr53Mfolz7edU гость |
22.11.2010 11:18
(Iskusnykh @ 22.11.2010 10:56)  Срочно нужен протокол для набора Diatom DNA Elution (Состав набора: Солюбилиз. реагент, Связывающий реагент, солевой буфер, нуклеос+, Экстранген Е). Сейчас я в командировке и кому-то звонить и искать в интернете у меня нет возможности и времени. Буду очень благодарен, если кто-то поможет у кого этот протокол под рукой или кто не полениться написать.7.2. К пробе объмом до 100 мкл добавить 300 мкл Солюбилизирую-щего реагента (не менее трех объемов реагента). 7.3. Добавить в эту же пробирку 10-20 мкл NucleoS+. Количество добав-ляемого сорбента следует изменять в зависимости от количества ДНК в пробе. Например, для очистки 10 мкг ДНК следует добавлять 20 мкл NucleoS+. 7.4. Содержимое пробирки перемешивать 5-7 мин переворачиванием пробирки. Постоянное перемешивание на ротаторе способствует максимальной сорбции ДНК на NucleoS+ и, следовательно, потери ДНК в итоге минимальны. 7.5. Центрифугировать 10-15 сек при 5 000 g. 7.6. Супернатант отбросить, а к осадку добавить 1,0 мл рабочего раствора Солевого буфера. Для полного удаления супернатанта рекомендуется использовать водоструйный насос. 7.7. Суспендировать на вортексе 5-10 сек содержимое пробирки до гомогенного состояния Внимание! Если суспендирование на вортексе затруднено из-за сильного слипания сорбента (при большой нагрузке ДНК), рекомендуется осторожное механическое измельчение осадка наконечником пипетки и последую- щее встряхивание на вортексе до полного гомогенного со- стояния содержимого пробирки. 7.8. Центрифугировать 10 сек при 5 000 g. Далее повторить положения 7.6., 7.7. и 7.8. 7.9. Супернатант отбросить, а осадок подсушить при температуре 65 0С в течение 3-4 мин. 7.10. В эту же пробирку добавить 50-100 мкл ЭкстраГена Е (объем элюирующего ЭкстраГена E зависит от количества ДНК. Эффек- тивность элюции снижается при добавлении менее 50 мкл Экстра Гена Е). Внимание! ЭкстраГен E следует отбирать от общего объема при постоянном перемешивании. 7.11. Суспендировать содержимое пробирки на вортексе 5-15 сек до получения гомогенной суспензии, термостатировать 4-5 мин при 65 0С. 7.12. Еще раз суспендировать содержимое пробирки на вортексе пе- ред центрифугированием. 7.13. Центрифугировать 2 мин при 10 000 g. Перенести супернатант с элюированной ДНК в чистую пробирку. Хранить при -20 0С. ---------------------------- Приготовление рабочего раствора Солевого буфера. Содержимое флаконa с Солевым буфером (10 мл) перенести в мерный цилиндр, довести бидистиллированной водой до метки 50 мл, а затем 96% этанолом до метки 200 мл и перемешать.
|
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
22.11.2010 13:33
(Iskusnykh @ 22.11.2010 11:56) Срочно нужен протокол для набора Diatom DNA Elution (Состав набора: Солюбилиз. реагент, Связывающий реагент, солевой буфер, нуклеос+, Экстранген Е). Сейчас я в командировке и кому-то звонить и искать в интернете у меня нет возможности и времени. Буду очень благодарен, если кто-то поможет у кого этот протокол под рукой или кто не полениться написать.Связывающий реагент давно (лет 5 назад) исключен из состава... |
|
admin121 Постоянный участник |
 31.05.2021 05:08
|
|
watchesbiz Постоянный участник |
31.05.2021 07:04
|
|
watchesbiz Постоянный участник |
25.09.2021 08:33
|
|
watchesonline89 Постоянный участник |
24.12.2022 11:28
|
| « Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |
 |
· Викимарт - все интернет-магазины в одном месте · Доска объявлений Board.com.ua ·
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---
Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Powered by Invision Power Board(Trial) v2.0.0 © 2024 IPS, Inc.