Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Базовые методы -- comments to a permanent page of the site --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Тема связана с: Основные приёмы работы
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Forum robot
Постоянный участник
на сервере в Москве



 прочитанное сообщение 11.01.2006 02:07     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Комментарии к постоянной странице сайта: Базовые методы

Базовые методы работы с эукариотическими клетками. Снятие клеток с культуральных сосудов. Замораживание. Размораживание. Определение количества клеток. Транспортировка. Культуральная посуда. Приведена общая схема работы с эукариотическими клетками. Оптимальные условия, времена и концентрации для каждой конкретной клеточной линии подбираются опытным путем.
_Ella_
IP-штамп: frftLGqhpFF.A
гость



 прочитанное сообщение 11.01.2006 02:08     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Довожу до сведения всех присутствующих, что ежели кто, желая снять эукариотические клетки с чашки Петри раствором Версена-трипсина, зальет их вместо этого содержимым стоящей рядом баночки с этанолом, пусть не беспокоится. Ничего страшного, не загнутся, спиртное в малых дозах полезно в любых количествах (спирт, правда, после запоздалого раскаяния лучше слить). Оно конечно не удивляет. Мы-то тоже вроде пока живы.
Участник оффлайн! Olena Bilyk




 прочитанное сообщение 22.02.2006 23:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Дорогие коллеги! Посоветуйте как заморозить клетки асцитической жидкости, взятые непосредственно у онкологических больных. Я первый раз с этим работаю, требуется совет.
Лена
Guest
IP-штамп: frkM0/MHHgnTA
гость



 прочитанное сообщение 22.02.2006 23:16     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

(Olena Bilyk @ 22.02.2006 22:06)
Ссылка на исходное сообщение  Дорогие коллеги! Посоветуйте как заморозить клетки асцитической жидкости, взятые непосредственно у онкологических больных. Я первый раз с этим работаю, требуется совет.
Лена



Точно также, как и все остальные клетки морозят. Сходите на сайт celltransplant.ru - много спецов по этой тематике.
Гость
IP-штамп: frFSEhx7pFQBo
гость



 прочитанное сообщение 23.02.2006 18:52     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Уважаемые коллеги!

Подскажите пожалуйста как можно быстро, дёшево и сердито убить клетки в культуре?
Линия HaCaT(кератиноциты).

Заранее огромное СПАСИБО
гость: Ю
IP-штамп: frn63u3Akg/ZI
гость



 прочитанное сообщение 09.03.2006 18:15     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

(Гость @ 23.02.2006 17:52)
Ссылка на исходное сообщение  Уважаемые коллеги!

Подскажите пожалуйста как можно быстро, дёшево и сердито убить клетки в культуре?
Линия HaCaT(кератиноциты).

Заранее огромное СПАСИБО
Guest
IP-штамп: frn63u3Akg/ZI
гость



 прочитанное сообщение 09.03.2006 18:27     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

(Гость @ 23.02.2006 17:52)
Ссылка на исходное сообщение  Уважаемые коллеги!

Подскажите пожалуйста как можно быстро, дёшево и сердито убить клетки в культуре?
Линия HaCaT(кератиноциты).

Заранее огромное СПАСИБО

Можно использовать облучение ультрафилетом (минут 20), или митомицин С, 50 мкг/мл 1-2 час, или актиномицин Д (1-5 мкг/мл, колхицин и др клеточные яды и противоопухолевые химиопрепараты. А у меня к Вам вопрос как раздобыть клетки HaCaT? Уже давно ищу в бывшем СССР.
Заранее спасибо.
Гость
IP-штамп: frw3GfipDY0Lk
гость



 прочитанное сообщение 10.05.2006 17:59     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

Здравствуйте! Напишите ,пожалуйста,можно ли для снятия клеток NIH3T3 с чашки вместо трипсина использовать раствор Версена и как лучше это выполнить, чтобы получить максимально возможное количество клеток (надо для миграции)? заранее СПАСИБО.
ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 11.05.2006 12:07     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

---Подскажите пожалуйста как можно быстро, дёшево и сердито убить клетки в культуре?
Линия HaCaT(кератиноциты).

НАГРЕТЬ ГРАДУСОВ ДО 50-60.

поменять рН запредельно, или налить окислителя. а еще формалинчик тоже хорошо.
Участник оффлайн! bapik




 прочитанное сообщение 12.09.2006 11:18     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

Всем привет! Коллеги помогите пожалуйста, как прокультивировать некоторое время опухоль вынутую из животного, а потом сделать перевивку уже на несколько животных. Извиняюсь за сумбурное изложение, в таких делах я просто чайник. Посоветуйте, что почитать.
СПАСИБО.
Андрей.
Участник оффлайн! Firefly76




 прочитанное сообщение 28.11.2006 20:01     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

Коллеги, посоветуйте, pls, что делать, если при культивировании клеток среда (DMEM/10%CBS) быстро защелачивается (приобретает фиолетовый оттенок. Клетки пойкилотермных животных, Т=26С, посуда NUNC. CO2 инкубатора нет, но введение газа в емкость не предотвращает этот процесс. ЗАРАНЕЕ БЛАГОДАРЕН.
Участник оффлайн! Ksiysha




 прочитанное сообщение 30.11.2006 17:21     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

а клетки у вас там вообще делятся?
Участник оффлайн! Ksiysha




 прочитанное сообщение 30.11.2006 17:26     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

(Гость @ 10.05.2006 17:59)
Ссылка на исходное сообщение  Здравствуйте! Напишите ,пожалуйста,можно ли для снятия клеток NIH3T3 с чашки вместо трипсина использовать раствор Версена и как лучше это выполнить, чтобы получить максимально возможное количество клеток (надо для миграции)? заранее СПАСИБО.

Можно и версеном, но подержать в инкубаторе придется подольше и снимать механически
Гость
IP-штамп: frGqyYT8IU7LU
гость



 прочитанное сообщение 23.01.2007 17:50     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

Глубокоуважаемые коллеги!
Посоветуйте простому генному механику...
Задача - зафиксировать клетки на чашке, затем провести иммуноокрашивание рекомбинантного белка.
Попробовали: фикс- 4%параформ на PBS+Tw20 0.01%, отмывка, иммуноокраш. с помощью Fab-фрагментов- POD, субстрат ТМБ.
Получилось грязно, видна только внеклеточная локализауия белка.
Кто-нибудь пробовал сапонин (? конц, время) для улучшения проникновения АТ в клетки?
И какие субстраты лучше для такой работы (есть Fab'ы меченные АР) Спасибо
кatia@ibch.ru
guest: ммм
IP-штамп: frHvyGooYAnV2
гость



 прочитанное сообщение 24.01.2007 12:20     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

---зафиксировать клетки на чашке.
Клетки то животные или бактериальные?
Если животные то можно попробовать мягкую фиксацию типа метанол уксус или 80% ацетон при этом и доступ к внутренностям клеточным открывается.

Получилось грязно, видна только внеклеточная локализауия белка.
Может это неспецифика? Клетки-то наверное можно отмыть как-то от внеклеточного белка перед фиксацией.

--есть Fab'ы меченные АР
Для такой хрени используют бром -хлор-индолил фосфат с нитросиним тетразолиевым в паре. Ну и буфер щелочной для субстрата.
Участник оффлайн! curious67
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 18.02.2007 16:24     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

2 guest: ммм
Спасибо за ответ!
Пробовала 80% ацетон и 4%парафрорм на PBS
С ацетоном лучше, для параформа требуется обработка сапонином (чтобы мембраны разрушились и АТ проникли внутрь).
А насчет отмывки - это не грязь и не неспецифика, белок имеет внутри- и внеклеточную локализацию (что видно на флуор. микроскопе, поскольку мы имеем дело с аналогом GFP).
А субстрат у меня ТМБ.
Он выцветает при хранении. Попробую этот ваш бром-хлор...
Спасибо за Ваши комментарии!!!
Guest
IP-штамп: frs8D3rPK85tc
гость



 прочитанное сообщение 18.02.2007 17:04     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

(curious67 @ 18.02.2007 15:24)
Ссылка на исходное сообщение  2 guest: ммм
Пробовала 80% ацетон и 4%парафрорм на PBS


curious67, Вы что, пол сменили? confused.gif
Участник оффлайн! curious67
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 18.02.2007 19:04     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

быстрая реакция! Спасибо за внимание к моей персоне Это другой пользователь, который не спросясь зашел, но не в курсе несколько, как логиниться и тп. Потому как не имеет времени переливать из пустого в порожнее, как мы с Вами. Попробую убедить завести себе ник. Пока не обижайте уж
Участник оффлайн! pchelinka
Участник



 прочитанное сообщение 19.02.2007 09:44     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

[Всем привет! Коллеги помогите пожалуйста, как прокультивировать некоторое время опухоль вынутую из животного, а потом сделать перевивку уже на несколько животных. Извиняюсь за сумбурное изложение, в таких делах я просто чайник. Посоветуйте, что почитать.
СПАСИБО.
Андрей.quote]


мы перевивали мышей сразу (не культивируя дополнительно) - вынутую из мышки опухоль, (асцитная или солидная), переносилась в буфер Хенкса, или в RPMI, объем которых должен быть небольшой - 1-2 ml и температуры чел тела (капля раствора на тыльной стороне руки не чувствуется). Далее концентрация клеток в растворе разводилась до 10*6 (степ) в ml и по 400-500 мкл вводилась в животное уколом в брюхо - для брюшного асцита. Для других опухолевых клеток перевиваемая концентрация может быть другая.
Гость
IP-штамп: frMBK77sTX3LI
гость



 прочитанное сообщение 17.04.2007 10:26     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

Дорогие коллеги,

Чем принципиально отличается работа с культурами клеток насекомых, например, от культур гибридом?
Мне скоро предстоит работать с первыми и хочется быть немножечко "в танке".....
Спасибо.....
Участник оффлайн! kolya1984




 прочитанное сообщение 26.10.2007 13:10     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

Помогите пожалуйста. Кто знает что - нибудь про культивирование нервной ткани расскажите методику и материалы.
Участник оффлайн! Bogatick

о-малое Москвы



 прочитанное сообщение 07.11.2007 19:05     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

Почему благодаря EDTA,содержащемуся в версене, клетки адгезионных культур сходят с поверхности? Почему лишение клеток двухвалентных ионов заставляет их "покидать насиженные места"?
guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 07.11.2007 20:49     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

---Почему благодаря EDTA,содержащемуся в версене, клетки адгезионных культур сходят с поверхности? Почему лишение клеток двухвалентных ионов заставляет их "покидать насиженные места"?

Грубо! - Между субстратом и рецепторами адгезии образуются кальциевые мостики.

типа СОО- +Са+ -ООС.
Участник оффлайн! Bogatick

о-малое Москвы



 прочитанное сообщение 08.11.2007 19:08     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

ммм, спасибо
Гость
IP-штамп: frvwNYUDB8Upk
гость



 прочитанное сообщение 12.11.2007 20:00     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

можно ли заменить со2 инкубатор обычным термостатом при приготовлении препаратов хромосом клеток костного мозга для fish-диагностики и цитогенетического исследования.
guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 12.11.2007 20:29     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

Можно попробовать два варианта первый использоавать среду с HEPES буфером
второй ставить чашку в эксикаторе в котором погасла горящая свеча(от недостатка кислорода). Гарантий никаких при любом из способов, хотя первый предпочтителней.
Гость
IP-штамп: fr3PpYUagJAXg
гость



 прочитанное сообщение 16.11.2007 14:21     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

Bogatick /07.11.2007 19:05/
Почему благодаря EDTA,содержащемуся в версене, клетки адгезионных культур сходят с поверхности? Почему лишение клеток двухвалентных ионов заставляет их "покидать насиженные места"?

кадгерины кальций-зависимы
Гость
IP-штамп: fr3PpYUagJAXg
гость



 прочитанное сообщение 16.11.2007 14:21     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

Bogatick /07.11.2007 19:05/
Почему благодаря EDTA,содержащемуся в версене, клетки адгезионных культур сходят с поверхности? Почему лишение клеток двухвалентных ионов заставляет их "покидать насиженные места"?

кадгерины кальций-зависимы
Гость
IP-штамп: frG/ehwVgdnf.
гость



 прочитанное сообщение 19.11.2007 12:32     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

подскажите кто нибуть самый простой и ефективный метод приготовленния Brhadyrizobium japonicum для проведения фореза
Участник оффлайн! polymerase




 прочитанное сообщение 23.01.2008 23:19     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

Объясните, пожалуйста.
Трансфекция эу-клеток.
Почему, когда мы проводим трансфекцию одновременно двумя плазмидами, считается, что во все клетки попадают обе? Пусть создается смесь трансфекционного реагента и двух плазмид, а затем раскапывается на клетки. Тогда, теоретически, у нас будет 4 вида комплексов: агент, не захвативший ничего, агент захвативший плазмиду1, плазмиду2 и обе. И, если в плазмиды включена кднк GFP, то визуально ну ни как отличишь эти комплексы ( ну то есть светится клеточка, а какая?)! Я в тупике.
Участник оффлайн! Нора
Участник



 прочитанное сообщение 05.06.2008 16:24     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

mol.gif Здравствуйте, коллеги! Подскажите, пожалуйста, при получении первичных кератиноцитов каким образом помещают биоптат в раствор диспаза? И каким образом наносить коллаген на культуральный пластик, в чем его предварительно растворить и чем дополнить?
Огромное спасибо!
myosotica Гость
IP-штамп: fra6xdMWXgbHc
гость



 прочитанное сообщение 19.09.2008 13:33     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #32 множественное цитирование
Важно!
Здравствуйте коллеги!
Подскажите пожалуйста где можно найти протокол получения подкожных человеческих фибробластов? Очень нужно :mol:
Участник оффлайн! chatter
Участник



 прочитанное сообщение 19.09.2008 17:43     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #33 множественное цитирование

(Гость @ 23.02.2006 18:52)
Ссылка на исходное сообщение  Уважаемые коллеги!

Подскажите пожалуйста как можно быстро, дёшево и сердито убить клетки в культуре?
Линия HaCaT(кератиноциты).

Заранее огромное СПАСИБО

Хромпиком.
Участник оффлайн! chatter
Участник



 прочитанное сообщение 19.09.2008 17:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #34 множественное цитирование

(polymerase @ 23.01.2008 23:19)
Ссылка на исходное сообщение  Объясните, пожалуйста.
Трансфекция эу-клеток.
Почему, когда мы проводим трансфекцию одновременно двумя плазмидами, считается, что во все клетки попадают обе? Пусть создается смесь трансфекционного  реагента и двух плазмид, а затем раскапывается на клетки. Тогда, теоретически, у нас будет 4 вида комплексов: агент, не захвативший ничего, агент захвативший плазмиду1, плазмиду2 и обе. И, если в плазмиды включена кднк GFP, то визуально ну ни как отличишь эти комплексы ( ну то есть светится клеточка, а какая?)! Я в тупике.

Один липофектаминовый комплекс включает в себя много-много плазмид. При эквимолярном соотношении векторов в смеси довольно сложно себе представить, как липофектамин матерясь ползает по пробирке, собирая исключительно GFP-вектора лишь бы вам нагадить. smile.gif
Гость
IP-штамп: frDQwa9k7riYg
гость



 прочитанное сообщение 09.02.2009 18:19     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #35 множественное цитирование

Коллеги, есть серьезные подозрения, что фетальная сыворотка Hyclon заражена микоплазмой. После фильтрации предварительно вылеченные клетки вроде не приобретают микоплазму (по тесту с DAPI). Есть ли у кого-нибудь опыт очитки сыворотки (а е клеток) от микоплазмы? Сами клетки прекрано лечатся Mycoplasma Removing Agent производства ICN. Но с сывороткой непонятно что делать. Главное, много ее накупил.
Гость
IP-штамп: frltbIKmJu36Q
гость



 прочитанное сообщение 27.02.2009 14:10     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #36 множественное цитирование

это не чиститься, насколько мне известно, просто обращаетесь к производителю и они ОБЯЗАННЫ поменять вам сыворотку на нормальную
Guest
IP-штамп: frWNOAHXr90iU
гость



 прочитанное сообщение 27.02.2009 20:36     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #37 множественное цитирование

(Firefly76 @ 28.11.2006 19:01)
Ссылка на исходное сообщение  Коллеги, посоветуйте, pls, что делать, если при культивировании клеток среда (DMEM/10%CBS) быстро защелачивается (приобретает фиолетовый оттенок. Клетки пойкилотермных животных, Т=26С, посуда NUNC. CO2 инкубатора нет, но введение газа в емкость не предотвращает этот процесс. ЗАРАНЕЕ БЛАГОДАРЕН.



1. Если добавляете НЕРЕS, не добавлять.
2. Увеличить на порядок концентрацию клеток (если не слишком большая)
3. Увеличить концентрацию фетальной сыворотки (смело можно до 20%)
4. В свое время, когда у нас не было СО2 инкубатора , мы добавляли СО2 в эксикатор с помощью бытового сифона и балончиков с СО2 для сифонов (сейчас их продают для пистолетов), но добавляли каждые 6 часов и крышку эксикатора смазывали глицерином.
5. каждые 4 -6 часов менят среду культивирования на новую
Успехов
Гость
IP-штамп: fr84SLI.CBe9Q
гость



 прочитанное сообщение 28.02.2009 02:31     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #38 множественное цитирование

Коллеги помогите!!! Для отработки методики нужны эпителиальные клетки кишечника человека. Конечно хотелось бы нормальных не раковых клеток, но вряд ли существуют такие клеточные линии. Подскажите пожалуйста какую использовать клеточную линию которая максимально сохранила свойства эпителия кишечника человека.
Участник оффлайн! katya-akts
Участник
Москва



 прочитанное сообщение 16.03.2009 15:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #39 множественное цитирование

Вопрос к Гостю, писавшему про сыворотку HyClone и микоплазму:
не могли бы Вы уточнить номер партии сыворотки, на которую такие подозрения?

моя почта katya_akts{sobaka}mail.ru
Участник оффлайн! galina.glousker




 прочитанное сообщение 22.03.2009 14:47     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #40 множественное цитирование

Уважаемые коллеги, нужен совет: культура неиммортализованных человеческих фибробластов ночь простояла в пониженной концентрации углекислого газа - кто-то умный перекрыл вентель на баллоне. Клетки вроде живы, но мы работаем с ДНК - кто-нибудь знает, насколько серьезны могут быть повреждения у выживших клеток и как это проверить? Заранее спасибо
Гость
IP-штамп: fr7Ufi3qeYVAg
гость



 прочитанное сообщение 27.03.2009 11:00     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #41 множественное цитирование

Добрый день!
Подскажите, пожалуйста!
Я хочу выделить белок из эндотелиальных микрочастиц плазмы крови - как можно разрушить мембрану, но так, чтобы не денатурировал белок? - Может быть, ультразвуком, но в течение какого времени?
Гость
IP-штамп: frlnAsDr.5x7A
гость



 прочитанное сообщение 02.04.2009 14:36     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #42 множественное цитирование

Здравствуйте, подскажите , пожалуйста, как фиксировать клетки млекопитающих, чтобы посмотреть внутриклеточную локализацию рекомбинантного белка с GFP?
Участник оффлайн! alsan




 прочитанное сообщение 25.10.2014 20:52     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #43 множественное цитирование

Подскажите пожалуйста, как организовать работу с суспензионными культурами клеток. В каких колбах качать, какие крышки можно использовать? Или только Corning PC c вент крышкой?
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 26.10.2014 08:23     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #44 множественное цитирование

(alsan @ 25.10.2014 21:52)
Ссылка на исходное сообщение  Подскажите пожалуйста, как организовать работу с суспензионными культурами клеток. В каких колбах качать, какие крышки можно использовать? Или только Corning PC c вент крышкой?

Если вы не собираетесь растить их мегалитрами, то подходит ЛЮБАЯ культуральная посуда для адегизионных культур. Так же можно использовать ПС чашки для бактерий. Качать в колбах низя. Они не бактерии потоки жидкости не любят. Их если в масштабах литров растят, то при ооочень медленном перемешивании в лабах обычно с помощью ролерной технологии, а в производстве в спец ферментерах.
Участник оффлайн! alsan




 прочитанное сообщение 26.10.2014 16:37     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #45 множественное цитирование

Т.е. суспензию без перешивания? В CO2? Или можно и с резиновой крышкой?
guest: ммм
IP-штамп: frQlBxj4iQSg.
гость



 прочитанное сообщение 26.10.2014 18:07     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #46 множественное цитирование

В СО2 конечно, бЕз СО2 можно, но на спец среде и не всякую суспензию. При большом объеме - сотни мли более - либо нужно много мелкой посуды, либо все таки перемешивание нужно но мееедленное типа один цикл в 5-10 минут, можно еще медленнее.
Участник оффлайн! Dr. Lektor




 прочитанное сообщение 03.08.2016 13:21     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #47 множественное цитирование

Уважаемые коллеги. Подскажите пожалуйста как получить чистую линию макрофагов человека из венозной крови, как их содержать и какова их жизнеспособность?
Заранее благодарен.
Участник оффлайн! CowDoc
Постоянный участник
Middle East



 прочитанное сообщение 20.09.2016 19:07     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #48 множественное цитирование

(MMM @ 26.10.2014 08:23)
Ссылка на исходное сообщение  Качать в колбах низя. Они не бактерии потоки жидкости не любят. Их если в масштабах литров растят, то при ооочень медленном перемешивании в лабах обычно с помощью ролерной технологии, а в производстве в спец ферментерах.

Не слушайте! Все зависит от вида клеток и среды. И опыта. Посмотрел бы я на вас, как бы вы [/b]очень медленно перемешивая выращивали бы простейшие BHK-21

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 22.02.19 06:10
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft