molbiol.ru -> Выделение лейкоцитов из крови

> Все форумы > Тематические форумы > Клеточные технологии

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Правила FAQ* Поиск* Участники* Календарь* Избранные темы* Форум Форумов*

Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ]

Форум:

* Выделение лейкоцитов из крови -- Как попроще выделить из крови лейкоциты? --

Компания Biocommerce - официальный дистрибьютер продукции компаний Miltenyi Biotec GmbH (Германия) и RanD S.r.l. (Италия).

Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

Пасюк

13.02.2009 16:51

URL #1

Доброго времени суток.

Задача - поделить кровь на отдельные фракции клеток.
Минимум - выделить лейкоциты (суммарную фракцию).
Максимум - поделить на фракции и их, + получить чистые тромбоциты и эритроциты (это я так понимаю обязательно или градиент фиколл или с магнитными шариками).
Если методика используется в клинике - вообще шикарно.
Цель - определение активности фермента в лизате клеток.

Нашел на форуме
" 1.Забор крови с антикоагулянтом.
(можно использовать готовые Вакутайнеры с антикоагулянтом, но у них Объем около 7-8 мл крови, если Вам хватит... - это дороже. но удобней и быстрей.)
2. Добавление желатины аптечной на "глаз" 1:4 или 1:3 или 1:2, для усиления аггрегации эритроцитов
(Желатину можно заменить...., но это дорого)
3. Отстаивание при комнатной темп. до осаждения эритроцитов - 1-2- 3 часа.
4. Сбор плазмы с лейкоцитами, над осевшими эритроцитами.
5. Отмывка раствором Хэнкса без Са и Мg центрифугированием 3 раза.
6.После 3-й отмывки. ресуспендируете в в рабочей среде - Хенкс полный, Забуференный физ-раствор, среда 199 (если она не мешает Вашей ТХС). Подсчитываете концентрацию и вперед и спесней на ТСХ.

В этой клеточной суспензии будет много лимфоцитов кроме лейкоцитов, поэтому если Вам нужны высокоочищенные лейкоциты, хорошо бы эту суспезию прогнать через фиколл-уротраст (фиколл-пак) d=1.077, лимфоциты останутся на интерфазе, а лейкоциты "упадут" ниже -Вы их соберете и опять вперед и с песней. "

1. Какой антикоагулянт лучше если потом биохимия - наверно цитрат?
2. Желатину советуют заменить декстраном - какой декстран?
Есть некий декстрансульфат 500, натриевая соль - пойдет?
Или нужен Декстран 40 [ср. мол.масса 35000-45000] раствор для инфузий, раствор для инфузий [в растворе натрия хлорида 0.9%]
Или еще какой?
Какой концентрации раствор и сколько добавлять?
3. При какой температуре оставлять садиться? Можно ли то же за пару минут на низких оборотах центрифуги сделать?
4. При отстаивании как определить, что эритроциты уже сели? Другие типы клеток тоже ведь частично садятся? Если да то какая их часть примерно?
5.Где в этой методике оказываются тромбоциты?

С ув., Дмитрий.

seomind
Постоянный участник

05.12.2021 16:48

URL #2

I don t have the time at the moment to fully read your site but I have bookmarked it and also add your RSS feeds. I will be back in a day or two. thanks for a great site. Periodontist

seomind
Постоянный участник

05.12.2021 16:53

URL #3

I have a mission that I’m just now working on, and I have been at the look out for such information Periodontist

seomind
Постоянный участник

05.12.2021 16:56

URL #4

I am genuinely thankful to the holder of this web page who has shared this wonderful paragraph at at this place Periodontist

seomind
Постоянный участник

05.12.2021 17:00

URL #5

Great Article it its really informative and innovative keep us posted with new updates. its was really valuable. thanks a lot. Periodontist

seomind
Постоянный участник

05.12.2021 17:10

URL #6

This is a fantastic website and I can not recommend you guys enough. Periodontist

seomind
Постоянный участник

05.12.2021 17:14

URL #7

I am very enjoyed for this blog. Its an informative topic. It help me very much to solve some problems. Its opportunity are so fantastic and working style so speedy. Periodontist

seomind
Постоянный участник

05.12.2021 17:18

URL #8

Wow, happy to see this awesome post. I hope this think help any newbie for their awesome work. By the way thanks for share this awesomeness from Periodontist

seomind
Постоянный участник

05.12.2021 17:22

URL #9

I feel a lot more people need to read this, very good info! . Periodontist

seomind
Постоянный участник

05.12.2021 17:26

URL #10

Nice blog. Found this while searching through Periodontist

seomind
Постоянный участник

05.12.2021 17:29

URL #11

Thanks for such a great post and the review, I am totally impressed! Keep stuff like this coming. Periodontist

alpshare

15.12.2021 10:21

URL #12

Мне очень понравился этот блог. Это познавательная тема. Это мне очень помогает решить некоторые проблемы. Его возможности такие фантастические, а стиль работы такой быстрый. shareit app vidmate apk

Сообщение было отредактировано alpshare - 15.12.2021 10:22

Ufa1688
IP-штамп: frpYd0YygcNIA
гость

20.06.2022 12:33

URL #13

The West must ufabet เข้า สู่ระบบ prepare for a long war บาคาร่า in Ukraine as Russia แทงบอลออนไลน์ makes incremental gains แทงบอล168 in a furious battle รูเล็ต to control the country's east หวยฮานอยthe NATO Secretary General Jens 1688.com Stoltenberg and สล็อต ufa1688 British Prime หารายได้เสริม Minister Boris Johnson ทางเข้าufa1688 have both said.

pinkysharma

26.06.2022 18:18

URL #14

This is an incredibly energizing article. I'm basically content with your unprecedented work. You put truly inconceivably consistent data.
Bangalore Call Girls
Escorts Service in Bangalore
Bangalore Escorts Service
Independent Call Girls in Bangalore
Call Girls Service in Bangalore
Russian Call Girls in Bangalore
African Call Girls in Bangalore

Ufa1688
IP-штамп: frdN6q3cADZrs
гость

28.06.2022 08:38

URL #15

Within the last week ufabet เข้า สู่ระบบ the Russians have aff 1688 been rewarded for ทางเข้าufa1688 their intense some would สล็อต ufa1688 say merciless bombardments Live22 of the remaining parts ไฮโล of the Luhansk region หวยลาว held by Ukrainian forces แทงบอล168 which have finally given KA Gaming up Severodonetsk and D88 Green Dragon lost territory south of Lysychansk.

Ufa1688
IP-штамп: frdN6q3cADZrs
гость

28.06.2022 08:38

URL #16

Ufa1688
IP-штамп: frGvfkzt/vMtQ
гость

29.06.2022 08:39

URL #17

Japan's coast guard ทางเข้าufa1688 said Friday the aff 1688 Chinese vessels entered ufabet เข้า สู่ระบบ Japanese waters D88 Green Dragon in the East China Sea สล็อตออนไลน์ during the early hours dragoonsoft of Tuesday and KA Gaming remained to surveil a Japanese บาคาร่า fishing boat that แทงบอล168 was operating in the หวยฮานอย area, before exiting Thursday evening

guest: Ufa1688
IP-штамп: fr/1ZkUsuBQOE
гость

02.08.2022 20:09

URL #18

The murder of dozens Funta Gaming of people over the last EVOPLAY two years, including two บาคาร่า chiefs in Marsabit, 160 แทงบอลออนไลน์ miles north of Isiolo แฮนดิแคป town, and eight others บอลสเต็บ in one attack last May แทงบอล168 not far from the regional ufabet เข้า สู่ระบบ capital, has prompted a ferocious ufa1688auto crackdown by Kenya's ทางเข้าufa1688 police and other forces.

guest: Ufa1688
IP-штамп: fr/1ZkUsuBQOE
гость

09.08.2022 13:08

URL #19

Colin Kahl, the ดรีมเกมส์ under secretary of aff 1688 defense for policy ทางเข้าufa1688 said at a press briefing ufabet เข้า สู่ระบบ that the US had sent a number D88 Green Dragon of the missiles without Big gaming specifying how many the บาคาร่า US has provided or แทงบอลออนไลน์ when they were sent. Kahl did หวยออนไลน์ not explicitly say what type หวยยี่กี of anti-radiation missile was sent.

Ufa1688
Постоянный участник

15.05.2023 12:31

URL #20

The bottom line 123goal is the following: they promise ปั่นสล็อต to give us ammunition and weapons สูตรสล็อต as much as we need to continue nigoal123 further actions. They swear to us that แฮนดิแคป คือ everything that is necessary ทาง เข้า ufabet มือ ถือ will be on the flank so the enemy сan't ufabet vip cut us off. We are told that we ทาง เข้า ufabet can act in Bakhmut app aff1688 as we see fit," Prigozhin เกมสล็อต said.

Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.

Имя:

Отправка сообщений использует JavaScript операции. В вашем броузере не
установлено/отключено выполнение JavaScript программ. Используйте Netscape Navigator
или Internet Explorer (не ранее 3 версии); убедитесь, что выполнение JavaScript
программ разрешено в настройках вашего броузера.