Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Пасюк |
Коллеги, подскажите где в Москве есть планшетные микроскопы (микроскопы, сканирующие 96 и 384 луночные планшеты с программным автосчетом клеток) Пока знаю только 2 BD Pathway на фундамеде МГУ и в онкоцентре. Дмитрий. |
MMM Постоянный участник |
Менее бюджетный но все равно бюджетный это флуоресцентная окраска по инвитроджину и уже флуоресцентный планшетик. И еще, наверное, самое правильное это проточник, который умеет брать пробы с планшета. Это, на мой взгляд лучше чем микроскоп, а цены сопоставимы. Сообщение было отредактировано MMM - 20.05.2015 09:17 |
Пасюк |
Насколько производителен проточник? кроме того, ему в каждой лунке надо снимать клетки, или использовать суспензионную культуру. (Хочется сделать серию хотя бы ~ 10000 точек) |
MMM Постоянный участник |
Если каждая линия окрашена в свой цвет флуоресценции, то это можно смотреть на простом флуориметрическом планшетнике. А если они все одного цвета, то как их отличать в микроскоп. Я например 3Т3, от HeLa не отличу, а анализатор изображений и подавно. --(кстати, что за мосман? Для вас он не подойдет. Это метод оценки количества живых клеток по ферментной активности дегидрогеназ, есть еще безымянное название МТТ - метод(или анализ). Но если интересно первоисточник. --Насколько производителен проточник? Это зависит от модели и комплектации. Зато он для каждой лунки выдаст статистику. Клетки с лунки снимаются трипсин/версеном и переносятся в планшет, в котором они не могут прикрепится к субстрату, например пластик для бактерюг или из полипропилена потом оттуда они засасываются проточником. --Хочется сделать серию хотя бы ~ 10000 точек Че то хило как-то - мелко живете, только не менее 100 000 000 точек могут пролить свет на тайны природы. БОЛЬШАЯ ФАРМА НА МАРШЕ!!!. Эх! Александр Васильевич! Перевелись богатыри на земле русской. |
Пасюк |
Насчет флуориметрического планшетника - не хватает чувствительности и проблемы с автофлуоресценцией клеток светящихся по другим каналам. (10 RFP клеток или пустых вполне перекрывают одну GFP ...). Про мосман - не знал сего слова. МТТ конечно знакомо, на потоке, но в нем несколько линий действительно не совместишь, надо по лунке на каждую. Впрочем если не получится с флуоресцентной детекцией - придется на нем работать (точнее наверно MTS, его растворять не надо). 10000 это немного (при наличии станции автопипетирования), хочется конечно 100-400 тыс (пока так, просто помечтать). Все упирается в стоимость расходников/точку и скорость детекции... Расширю вопрос, у кого в Москве (а в идеале в МГУ) есть планшетный проточник? |
MMM Постоянный участник |
Это вы все про какой-то не оочень хороший прибор пишете. Если у вас по обоим каналам (возбуждения и испускания) стоят монохроматоры, а на детекции ФЭУ. То и избирательность хорошая, лучше чем в любом микроскопе и чувствительность достойная. 2-3 клетки конечно не поймает, а с 1000 уже должен работать. --Расширю вопрос, у кого в Москве (а в идеале в МГУ) есть планшетный проточник? Уточню: проточник,автоматически работающий с пробами из планшета. --хочется конечно 100-400 тыс Гыы! |
MMM Постоянный участник |
с максимальным, разрешением 10мкм - Typhoon 9500, вообще-то он для сканирования гелей в основном предназначен. Но софт и механические адаптеры позволяют обрабатывать планшеты. Правды 4 96 луночных планшета с разрешением 10мкм он снимать будет пару часов наверное. ну микроскоп еще дольше будет снимать. А проточник может и сравнимо. |
Пасюк |
|
Пасюк |
|
MMM Постоянный участник |
Там чувствительность зависит от вольтажа ФЭУ и фильтра. Вы этим игрались? -- А планшетный проточник как выяснилось есть в лабе Недоспасова на биофаке, полностью налажен. Гы. а я тут со специалистом поговорил. Он говорил, что подача с планшетов - редкость, обычно подача идет с карусели из пробирок(типа хроматографического коллектора фракций). --но... час на 96 лунок. А что вы хотели? Он же анализирует в каждой пробе десятки тысяч клеток. И сразу статистика и распределение - самый достоверный способ. |
Пасюк |
"Cytotoxicity Test Based on Human Cells Labeled with Fluorescent Proteins: Fluorimetry, Photography, and Scanning for High-Throughput Assay" Собственно, критично оказалось использовать красные а не зеленые флуоресцентные белки если не меняем среду перед детекцией. Ну и немного шаманства с обработкой данных... Сообщение было отредактировано Пасюк - 15.04.2018 12:28 |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |