Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
poanik Подольск |
Симметричная (линейная) ПЦР - один праймер отжигается на обеих нитях ДНК. Асимметричная ПЦР - одного праймера раз в 5-10 меньше, и большая часть продукта получается одноцепочечной. Выходит в последнем случае на форезе мы получим две полоски: тонкую, скажем, 300 п.н. и толстую 150 п.н.? Или иначе? И зачем это нужно? И потом: Будет ли в толстой полоске 150 п.н.? Ведь её размер будет ограничивать только сила полимеразы и заданное время при 72 гр.? |
K-2 Постоянный участник |
[ 14-08-2002: Сообщение отредактировано: K^2 ] |
poanik Подольск |
|
tima |
[Текст переведён с транслита] |
K-2 Постоянный участник |
http://www.uct.ac.za/microbiology/manualin.htm Они вообще рекомендуют соотношение праймеров 1:100, но реально это редко получается. Асимм. ПЦР - один из стандартных способов получения ssDNA. После истощения одного из праймеров в каждом цикле синтезируется одна нить, причем матрицей для нее в основном служит уже наработанный двуцепочечный фрагмент. В результате получается ss фрагмент фиксированного размера. Симм. ПЦР, в противоположность, вероятно, обычная. Кстати, интересно, сколько праймеров в ПЦР использует уважаемая(ый) poanik и что при этом получается? А что Вы имели в виду под толстой/тонкой полосками разного размера, я, к сожалению, вообще не понимаю. Объясните, пожалуйста... [ 14-08-2002: Сообщение отредактировано: K^2 ] |
poanik Подольск |
P.S. Под толстой/тонкой полосками я подразумеваю обычные полоски ПЦР-продукта на эл/форезе, англосаксы их называют бэнды. Их толщина говорит мне об их примерной концентрации. |
petr Постоянный участник |
ОТ дальнобойности полимеразы тоже зависит, но это начинается с длины амплифицируемого продукта от 3000bp и выше. |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |