Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Peppermint |
|
Asterix Постоянный участник |
|
Vadim Sharov Постоянный участник Россия |
Но мне кажется, проблема в -47, а не в 24 часах. Может - 47 и азот слишком крутой переход. |
Peppermint |
(Asterix @ 06.06.2019 14:18) Вы абсолютно правы .. если у вас нет -80, то попробуйте сразу на лед , ну пока дойдете до дьюара с азотом они и охладятся во льду и в жидкий азот, без вот этих охлаждений на +4 и -20, ... и все получится .. Ну 70% уж точно будет жизнеспособность. Спасибо Вам большое за ответ! |
Peppermint |
(Vadim Sharov @ 06.06.2019 14:24) Попробуйте на 3 часа на -47. Но мне кажется, проблема в -47, а не в 24 часах. Может - 47 и азот слишком крутой переход. Тогда попробуем оба варианта: одну пробирку сразу в лед и потом в азот, вторую на пару часов на -47, а далее в азот. |
Vadim Sharov Постоянный участник Россия |
Открою тайну: сухой лед в термоконтейнере можно купить (хотя коробку найти легко, на термоконтейнере можно съэкономить), про баллон с газом напомнил любителю биохакинга, или вдруг Вы в лесу замораживаете фибробласты чукокабры. Набиваете "сухой лед купить" и будет Вам счастье. |
Asterix Постоянный участник |
Что значит нет -80? Да в любом Боинге и Эйрбасе стоят такие компактные морозильники малого размера , в них компьютеры охлаждаются и сотвественно на Е-бае их полно старых но вполне рабочих еще , и совсем недорого , кому они нахрен нужны еще , а там надежность сами понимаете , для авиации делали. Мы, биохакеры-подпольщики, именно их используем .. когда нам нужно -80 вот позарез. Там внутрений обьем - это стандартный компьютерный ящик, идеально решает все проблемы .. одному человеку большего обьема и не надо для работы. |
Asterix Постоянный участник |
это холодная баня ... очень старинный агрегат... Ну или скажем так специализированный ... видимо на научной барахолке по-дешевке взяли, когда какая-то биотехкомпания разорилась. Прям как у нас ... такие потрясающие инвентарные номера висят на нашем старье , ... иных уж нет, а те далече. Один ИнноГенетикс чего стоит ... |
kenseq Участник |
|
Кузбассовец |
|
kenseq Участник |
Институт цитологии Российской академии наук Тихорецкий проспект 4 Санкт-Петербург 194064 Россия. Телефон: +7 (812) 297-18-29 +7 (812) 297-18-29. |
ship Постоянный участник Moscow |
главное правило -медленно замораживаем, быстро оттаиваем. моя обычная заморозка - поставил ампулу в пенопластовую коробочку и на -70С. если у вас -47С - то не думаю что это так сильно влияет. особенно если вы их там долго не держите и сразу убираете в азот. а вот вся эта фигня с +4С , -20С и тп - вот этого вот не надо точно. даю вам 100%.
|
kenseq Участник |
(ship @ 15.07.2019 02:36) шип если про вотку то да шип фибры заморозит разморозит куня попробуй гибридомы с моноклонами шип не хочу открыват новую тему пачаму после размарозки гибридом не дают выхлоп моноклоналных антитеl хотйя растут ссуки |
Peppermint |
(kenseq @ 09.07.2019 18:31) Если даже и перепутала по причине недавней регистрации на сайте, не думаю, что это меняет суть вопроса. Тему либо переместят, либо мне самой нужно это сделать каким-нибудь образом. |
Peppermint |
(Кузбассовец @ 14.07.2019 03:36) Погрузите пробирки в контейнер с изопропанолом, и сразу отправляйте на -47. В изопропаноле скорость охлаждения - 1 градус в минуту Благодарю за совет! |
Peppermint |
(ship @ 15.07.2019 02:36) топик стартер - а напишите как вы их размораживаете. почему вы думаете что дело в заморозке? главное правило -медленно замораживаем, быстро оттаиваем. моя обычная заморозка - поставил ампулу в пенопластовую коробочку и на -70С. если у вас -47С - то не думаю что это так сильно влияет. особенно если вы их там долго не держите и сразу убираете в азот. а вот вся эта фигня с +4С , -20С и тп - вот этого вот не надо точно. даю вам 100%. Сначала криопробирки достаются из жидкого азота и опускаются в водяную баню (+37С). Пробирки с замерзшей средой не полностью погружены в теплую воду, где-то наполовину, и среда отогревается до момента, пока в ней не остается плавать маленький кусочек льда. Далее, оттаявшая суспензия клеток помещается либо в культуральный флакон с 15-ю мл теплой среды (с учетом того, что объем замороженной суспензии клеток составлял 1 мл) и убирается в инкубатор, либо же оттаявшая суспензия центрифугируется, супернатант сливается и клетки так же помещаются во флакон. На следующий день среда заменяется, но, чаще всего, выживших либо нет, либо критически мало. Предполагаем, что дело в заморозке, потому что разморозку делали по инструкции к клеткам с сайта "спутник". Спасибо большое за совет, попробуем все без стадий на +4 и -20С. Сообщение было отредактировано Peppermint - 19.07.2019 10:29 |
watchesonline89 Постоянный участник |
|
UMAIR Постоянный участник |
|
guest: seo IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
UMAIR Постоянный участник |
|
sarfaraz IP-штамп: frNmR5X46wtQE гость |
|
sarfaraz IP-штамп: frNmR5X46wtQE гость |
|
sarfaraz IP-штамп: frNmR5X46wtQE гость |
|
sarfaraz IP-штамп: frNmR5X46wtQE гость |
|
TopboosterSEO IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
TopboosterSEO IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
UMAIR Постоянный участник |
|
guest: SEO1 IP-штамп: frNmR5X46wtQE гость |
|
TopboosterSEO IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
UMAIR Постоянный участник |
|
guest: SEO1 IP-штамп: frNmR5X46wtQE гость |
|
TopboosterSEO IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
UMAIR Постоянный участник |
|
TopboosterSEO IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
sarfaraz IP-штамп: frNmR5X46wtQE гость |
|
UMAIR Постоянный участник |
|
TopboosterSEO IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
UMAIR Постоянный участник |
|
topboosterseo IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
simon707 IP-штамп: frNmR5X46wtQE гость |
|
sarfaraz IP-штамп: frNmR5X46wtQE гость |
|
TopboosterSEO IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
guest: SEO1 IP-штамп: frNmR5X46wtQE гость |
|
Guest IP-штамп: fr.vwiRMFbky2 гость |
|
TopboosterSEO IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
TopboosterSEO IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
Link Alternatif Macanbola IP-штамп: frxwqRM9LKN8w гость |
|
UMAIR Постоянный участник |
|
TopboosterSEO IP-штамп: froGyfM7ueoVc гость |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |