Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Антитела к Flag тэгу -- надо проверить --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Demyanov
Постоянный участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 11.04.2012 00:38     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Помогите проверить антитела к DYKDDDDK, известному как FLAG tag. Я получил кроличью антисыворотку к коньюгату DYKDDDDK-BSA, аффинно почистил на колонке с DYKDDDDK. Пока готовых белков нет, потому проверить не на чем. Если кому надо, примите в дар в обмен на результаты проверки в Вестерн Блоте. Мои антитела в ИФА с сорбированным чистым DYKDDDDK дают титр х20000.

Сообщение было отредактировано Demyanov - 11.04.2012 10:27
Участник оффлайн! ship
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 11.04.2012 11:40     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

а какой смысл получать антитела, которые продаются на каждом шагу????

confused.gif
Участник оффлайн! Demyanov
Постоянный участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 11.04.2012 13:57     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

(ship @ 11.04.2012 09:40)
Ссылка на исходное сообщение  а какой смысл получать антитела, которые продаются на каждом шагу????

confused.gif


Очень простой смысл. 0,2мг таких антител у сигмы стоит примерно 15-20круб, а у меня их теперь несколько мг и это не предел. Проверить только в блоте осталось :-)
Вобщем, если кому интересно, вышлю за свой счет и довольно много. Вам нужно только протестировать их на белках с флагом на С-конце, на N-конце, в середине, у кого какие есть.
Участник оффлайн! ship
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 11.04.2012 15:05     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

а вы их для себя делаете? или есть планы коммерциализовать?
да, вам проще плазмиду найти с ФЛАГом и самим сделать лизаты, в своих руках то надежнее проверять, за одно и протокол для Вестерна отработать можно. А то мало ли кто и как и где их будет проверять.
guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 11.04.2012 16:15     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Берете коньюгат DYKDDDDK-BSA и на блот. smile.gif
Участник оффлайн! Demyanov
Постоянный участник
Санкт-Петербург



 прочитанное сообщение 12.04.2012 12:17     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

(ship @ 11.04.2012 13:05)
Ссылка на исходное сообщение  а вы их для себя делаете? или есть планы коммерциализовать?
да, вам проще плазмиду найти с ФЛАГом и самим сделать лизаты, в своих руках то надежнее проверять, за одно и протокол для Вестерна отработать можно. А то мало ли кто и как и где их будет проверять.


У меня есть одна плазмида с белком с флагом, но она для экспрессии в эукариотах и пока ее не получается запустить.
В принципе у меня есть выход на коммерцию и если АТ будут хорошие, то я могу выставить их на продажу.

Берете коньюгат DYKDDDDK-BSA и на блот.


Это я, конечно, сделал. Антитела работают, но у BSA около 60 сайтов, куда залип Флаг, а хотелось бы проверить по единичным флагам с обоих концов белка.
guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость



 прочитанное сообщение 12.04.2012 13:21     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

Ну в принципе можно же получить БСА с меншим содержанием FLAG. Правда тут встает вопрос что проще. Получить от добрых людей лизат или возится с коньюгатами.
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 12.04.2012 17:02     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

Проблема в не в том что антитела узнавали на вестерне таг таких дешевых хоть попой ешь, а проблема что бы они были высокоспецифичны в реакции иммунопреципитации.
Не зря же Сигма патентовала М2 антитела.....
имха поликлоны пассажира скорее всего не покатят для ИП, значит очедной "велосипед" изобретен...
такие времена....
lol.gif
Участник оффлайн! ship
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 12.04.2012 18:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

(Tom1 @ 12.04.2012 15:02)
Ссылка на исходное сообщение  
имха поликлоны пассажира скорее всего не покатят для ИП, значит очедной "велосипед" изобретен...
такие времена....
lol.gif

да, еще и для ИФ надо чтоб работали, с низким бекграундом.
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 12.04.2012 19:15     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

(ship @ 12.04.2012 08:30)
Ссылка на исходное сообщение  да, еще и для ИФ надо чтоб работали, с низким бекграундом.

плюсанусь одназначно....
Участник оффлайн! ship
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 12.04.2012 19:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

вот еще одна мысль пришла, иммунизировали конъюгатом с БСА, значит, скорее всего, будут и сыворотке и антитела к БСА. может ли ваша очистка на колонке гарантировать, что вы полностью от антител к БСА избаивитесь?
БСА это же маммалиан белок, а обычно люди с KLH конъгируют пептиды, тк KLH из морского зверя
Участник оффлайн! Tom1
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 12.04.2012 22:05     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

тупого включил ???
сказано, что чистили на колонке с пришитым пептидом ..
так что тут все ок....
Участник оффлайн! xenopus
Постоянный участник
Moscow



 прочитанное сообщение 13.04.2012 02:33     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

Мы регулярно работаем с флагом. Интерес есть. Напишите плз на xenopus (at) nm (dot) ru
Участник оффлайн! Olympus




 прочитанное сообщение 03.06.2013 12:37     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

Срочно нужны антитела к FLAG-тэгу. Нахожусь в Москве. Готов проверить по блоттингу
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  06.12.2021 17:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

http://www.authorstream.com/Replicawatches24/
https://about.me/Replicawatches24
https://moz.com/community/users/17050093
https://trello.com/rolexrelicawatches/activity
https://replicarolexwatches.dreamwidth.org/365.html
https://visual.ly/users/watcheshutuk/portfolio
https://www.viki.com/users/watcheshutuk_549/about
https://www.academia.edu/s/14bdb7d4fe?source=link
https://www.slideshare.net/Nowseore/guide-o...ex-watch-online
https://audiomack.com/rolexrelicawatches
https://soundcloud.com/replicarolexwatches
https://www.bagtheweb.com/u/fakerolexwatches/profile
https://www.flipsnack.com/ReplicawatchesUK/...ca-watches.html
https://www.4shared.com/office/zA4L7Rmzea/G...hase_a_Fak.html?
https://codepen.io/Rolexrelicawatches/full/abBEzaQ

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 29.03.24 00:59
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft