Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* ELISA
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 08.08.2017 21:54     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Добрый день!
Вопрос по ELISA.

Был взят Стандард коммерческий и титровался для сравнения с белком, который я бы хотел в дальнейшем использовать, как Стандрад. Коммерческий Стандард показал хорошие значения OD, в то время как белок-образце, концентрацию, которого я привел к стандарду, не показал титрования. В чем могут быть ошибки? Спасибо

ng/mL Стандард Образец
1000 2.710033333 2.335733333
500 2.644633333 2.312733333
250 2.173333333 2.349583333
125 1.445733333 2.458033333
62.5 0.775333333 2.614033333
31.3 0.397833333 2.243033333
15.6 0.187133333 1.612733333
0 -0.000266667
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 08.08.2017 23:09     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Вы ошиблись в определении концентрации антигена в образце
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 03:15     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

Я тоже так подумал...но если концентрация 5mg/mL и развожу до 0,001mg/mL, т.е. 1микролитр образца на 4999 микролитров PBS. То могу предположить, что ошибки в разведении не может быть.
Может образец надо начинать титровать с меньшей концентрации, скажем, с 500ng/mL? Т.к. его область насыщения ниже и потому надо делать более сильное разведение?
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 05:27     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Откуда вы взяли, что в исходнике концентрация антигена 5 мг/мл?
Разводить лучше взяв 5(10 )мкл и развести до 50(100),а потом из полученного раствора взять 5 (10)мкл и развести до 2500(5000), хотя в вашем случае это не могло дать ошибку на порядок, как следует из ИФА.
Антиген в стандарте и в образце идентичного происхождения?
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 05:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

Концентрация коммерческого белка 5mg/mL. Я планировал взять его в будующем за Стандарт. И потому решил его протестировать сперва, как образец с неизвестной концентрацией. Стандарт и Образец были приведены к одинаковой концентрации 1000ng/mL. И все еще не понятно, почему не титруется образец.

Стандарт - Иммуноглобулин
Коммерческий белок - Fc секретируемый белок.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 09:15     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

--Коммерческий белок - Fc секретируемый белок.
Мол. вес какой у этого белка? В каком виде поставляется белок? Вы как нибудь проверяли его концентрацию или только руководствовались сопроводительными документами?

И чем у вас лунки сенсибилизированы, а то я не очень понимаю схему вашего ИФА.

Сообщение было отредактировано MMM - 09.08.2017 09:19
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 10:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

1. Использовать в ифа стандарт отличный по природе от аналита - очень плохая идея. Даже, если аналит есть фрагмент стандарта. Что собственно и показали ваши результаты.
2. Если бы у вас и там и там был один и тот же белок, то я бы посоветовал просто сделать предварительно разведение образца в 16-20 раз.
3. Если бы у вас была какая-то экзотика, то еще можно было бы пофантазировать. Но IgG вполне доступен, не вижу причин искать себе проблем на ровном месте.
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 13:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

Спасибо друзья за участие!

Был куплен кит https://www.thermofisher.com/order/catalog/...-srp-BMS2091TEN. Кит пригоден для тестирования связывания IgG и Fc.
К нему прилагается Стандарт, который надо было протестировать с нашим имеющимся белком, чтобы в дальнейшем белок использовать для ИФА сделаного в лабе.

Коммерческий белок имеет размер 73кДа...И имеются образцы аналогичного белка, но произведенного в лабе, концентрации которых нам и на узнавать в конечной цели. Т.к. наши белки и коммерческий имеют Fc, то мы решили, что Стандарт из кит, который идет для определения IgG, может нам подходить. Хотя, в описании кита говориться, что подходит для плазмы и сыворотки.

А протокол самый стандартный. ПОкрытие плитки на ночь human IgG. Потом блокировка BSA. Далее, добавление стандарта и образцов...потом HRP, субстрат и остановка реакции.
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 13:49     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

Концентрация белка подтверждалась на спектрофотометре. Поставляется в сухом виде.
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 13:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

(vb @ 09.08.2017 11:53)
Ссылка на исходное сообщение  1. Использовать в ифа стандарт отличный по природе от аналита - очень плохая идея. Даже, если аналит есть фрагмент стандарта. Что собственно и показали ваши результаты.
2. Если бы у вас и там и там был один и тот же белок, то я бы посоветовал просто сделать предварительно разведение образца в 16-20 раз.
3. Если бы у вас была какая-то экзотика, то еще можно было бы пофантазировать. Но IgG вполне доступен, не вижу причин искать себе проблем на ровном месте.


Можете объяснить почему не корректно использовать такие сравнения. В обоих случаях идет речь о молекуле Fc.
Забыть про Стандарт из кита и использовать коммерческий белок, как Стандарт и от него отпределять концентрации неизвестных образцов?
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 15:20     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

(Rob @ 09.08.2017 14:48)
Ссылка на исходное сообщение  
Был куплен кит https://www.thermofisher.com/order/catalog/...-srp-BMS2091TEN. Кит пригоден для тестирования связывания IgG и Fc.

Коммерческий белок имеет размер 73кДа..

Это два ключевых момента.
1)Кто вам сказал, что кит работает на Fc. Это как-нибудь проверялось или это информация полученная от техподдержки набора?
Производитель нигде не пишет о локализации эпитопов распознаваемых используемыми в наборе моноклональными антителами. Он пишет что они узнают IgG человека и все.
Представьте себе, что планшет сенсибилизирован антителами, которые распознают эпитоп на Fab фрагменте антител, а коньюгат с ПХ распознает эпитоп на Fc фрагменте, тогда если ваш образцовый белок не содержит эпитопа из Fab фрагмента он вообще не свяжется с антителами, которыми сенсебилизирован планшет, и коньюгату просто не с чем будет связываться.

2)Коммерческий белок имеет размер 73кДа
Вот вот не размер он имеет, а массу молекулярную - в данном случае это имеет ключевое значение и уже объясняет ошибку в оценке концентрации в 2 раза.
Вы никогда не задумывались над тем, что килограмм гексана содержит почти в пять раз меньшее число молекул, чем килограмм воды, потому что масса одной молекулы гексана почти в 5 раз больше массы молекулы воды. Это означает, что если вы возьмете свой образцовый белок 73кДа и IgG 150кДа в одинаковой массовой концентрации, то молекул образцового вещества в единице объема будет в два раза больше чем молекул IgG. А ИФА измеряет в итоге количество молекул фермента, а не его массу.

--Концентрация белка подтверждалась на спектрофотометре.
Ага! На вскидку можно перечислить 5(пять) СФ методов для определения концентрации белка, каким пользовались вы? Спектрфотометр был типа нанодропа?

---Поставляется в сухом виде.
Очень хорошо! В этом самом сухом виде больше ничего нет? Может есть еще вспомогательные вещества: буфер(высушенный) или тригалоза, или сахароза, полимеры?
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 15:43     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

Измерялась концентрация на нанодропе.

Что еще может быть в сухом веществе белка не известно.

Если этот белок начинает титроваться с меньшей концентрации, значит мне надо его разводить начинать, к примеру с 500ng/mL? И могу ли я его использовать тогда в качестве Стандарта для образцов, которые мы трансфекцируем? Точнее для тестирования клеточной среды с нашими образцами, которые сконструированы на основе этого коммерческого белка.
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 15:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

В описании кита указывается, что IgG1 связывается с Fc фагов, неофинс, киллеров.
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 16:31     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

(Rob @ 09.08.2017 11:53)
Ссылка на исходное сообщение  Можете объяснить почему не корректно использовать такие сравнения. В обоих случаях идет речь о молекуле Fc.
Забыть про Стандарт из кита и использовать коммерческий белок, как Стандарт и от него отпределять концентрации неизвестных образцов?

1. Как объяснил ниже ммм у стандарта и аналита разные мол массы. То есть 1 молекула стандарта и 1 молекула аналита дадут одинаковый сигнал в ифа, а по массе-то они разные. Дальше сами.
2. Кроме очевидной разницы в массе у них будут разная скорость диффузии, разная аффинность, соотвнтственно разная кинетика свчзыания. Ифа по конечной точке можно оптимизировать, наверное, до каких-то допустимых погрешностей. Но лучше всего проверить методом параллельных линий. Если критерий параллельности при титровании не выполняется, то результаты невалидны. Иногда даже матрица (прочие компоненты образца) влияют на результат существенно. Тогда приходится стандарт делать близкий по составу к образцу.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 16:32     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

-В описании кита указывается, что IgG1 связывается с Fc фагов, неофинс, киллеров.
Это не в описании кита, а в описании IgG, которое приводится в водной части описания кита.

Типа: Уважаемый клиент вы купили пылесос. Пыль - это ужасная вещь, которая скапливается в жилище людей и служит для размножения клещей, патогенных грибов и микрофлоры, может вызывать аллергическую реакцию и тд и тп(ЭТО О ПЫЛЕ, а вовсе не о принципе действия пылесоса.)

--На нанодропе.
Нанодроп это спектрофотометр. Им можно измерять концентрацию белка разными способами:
Например 1)биуретовой реакцией, 2)Методом Лоури, 8)Методом Брэдфорд, 4)Методом с бицинхоиновой кислотой, 5)методом измерения абсорбции на 280нм. Какой метод использовали вы?
Аминокислотная последовательность белка-образца известна?

Сообщение было отредактировано MMM - 09.08.2017 16:33
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 16:47     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

--Можете объяснить почему не корректно использовать такие сравнения. В обоих случаях идет речь о молекуле Fc.
Да вовсе не о ней(об одной молекуле Fc ) идет речь. То что Fc фрагмент является частью разных молекул еще не означает, что эти разные молекулы будут себя одинаково вести в отношении используемой вами тест-системы. Вот для примера взять те же IgG. Fc-фрагмент у них одинаковый, а вот антигены они связывать могут совершенно разные.

У вас ваши Fc в образце, могут не связываться с нижними антителами, но зато могут например неспецифически связываться с белком (защиты например с BSA). Производитель же разрабатывал тест систему для анализа IgG человека в сыворотке крови и не рассчитывал на то, что вы евонным "мелкоскопом будете гвозди забивать".

Сообщение было отредактировано MMM - 09.08.2017 16:48
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 20:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

(vb @ 09.08.2017 17:31)
Ссылка на исходное сообщение   Но лучше всего проверить методом параллельных линий. Если критерий параллельности при титровании не выполняется, то результаты невалидны. Иногда даже матрица (прочие компоненты образца) влияют на результат существенно. Тогда приходится стандарт делать близкий по составу к образцу.


В чем суть метода параллельных линий?
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 20:15     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

(MMM @ 09.08.2017 17:32)
Ссылка на исходное сообщение  
--На нанодропе.
Нанодроп это спектрофотометр. Им можно измерять концентрацию белка разными способами:
Например 1)биуретовой реакцией, 2)Методом Лоури, 8)Методом Брэдфорд, 4)Методом с бицинхоиновой кислотой, 5)методом измерения абсорбции на 280нм. Какой метод использовали вы?
Аминокислотная последовательность белка-образца известна?


Измеряли методом измерения абсорбции на 280нм, с учетом Масс коефф.
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 20:19     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

Если Стандарт и Образец были бы приведены к единой концентрации в молях, то сравнивать возможно их?

Если масса Стандарта 150кДа, а белка 73кДа, то коеффициент разведения должен был бы быть 2...Но мои данные показывают гараздо больший разрыв.
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 20:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

(Rob @ 09.08.2017 18:13)
Ссылка на исходное сообщение  В чем суть метода параллельных линий?

Я в его математике не очень разбирался. Но по сути это разновидность дисперсионного анализа. Реализован во многих программах для анализа ифа. В принципе, описан в европейской фармакопее.
Участник оффлайн! vb
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 20:53     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

(Rob @ 09.08.2017 18:19)
Ссылка на исходное сообщение  Если Стандарт и Образец были бы приведены к единой концентрации в молях, то сравнивать возможно их?

Если масса Стандарта 150кДа, а белка 73кДа, то коеффициент разведения должен был бы быть 2...Но мои данные показывают гараздо больший разрыв.

Ну я же вам объяснял, что дело не только в молекулярной массе. Вы вообще читаете, что вам пишут?
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 21:34     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

Измеряли методом измерения абсорбции на 280нм, с учетом Масс коефф

Масс. коефф. с какого потолка брали?

Сообщение было отредактировано MMM - 09.08.2017 21:36
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 09.08.2017 22:27     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

(MMM @ 09.08.2017 22:34)
Ссылка на исходное сообщение  Масс. коефф. с какого потолка брали?


Посмотрел на http://www.expasy.org/proteomics
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 10.08.2017 10:00     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

(Rob @ 09.08.2017 21:19)
Ссылка на исходное сообщение  Если Стандарт и Образец были бы приведены к единой концентрации в молях, то сравнивать возможно их?

Вы работаете с закрытой системой вы не знаете как работают антитела в коммерческом наборе. Производитель не может гарантировать вам, что если у него в инструкции написано заправлять автомобиль бензином октановым числом 95, а вы заправили его керосином, что автомобиль будет работать корректно. Но это не мешает вам изгаляться над купленным за ваши деньги автомобилем как угодно. Поэтому вы можете сравнивать размеры носорога и бегемота, но может оказаться, что к размерам слона это не имеет никакого отношения.

Представьте что у вас, например есть фотографии девушки вы показываете их компьютерной программе и учите прграмму узнавать эту девушку. В результате вам удается научиь программу эту девушку узнавать. Потом вы берете и делаете гибрид из двух фотографий юноши и девушки или даже например кошки и девушки и хотите что бы компьютерная программа узнала в этой химере девушку. Вы ставите себя в похожую ситуацию.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 10.08.2017 10:07     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

(Rob @ 09.08.2017 23:27)
Ссылка на исходное сообщение  Посмотрел на http://www.expasy.org/proteomics

Где здесь конкретно? Какой базой данных или инструментом из указанного списка вы воспользовались, что бы узнать связь значения поглощения на 280нм с концентрацией белка?
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 10.08.2017 18:52     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

В отделе Protein Param просто вставить аминокислотную последовательность и по ней выдается Масс коеф.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 10.08.2017 19:27     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

Ага! Этот инструмент скорее занижает значение экстинкции чем завышает. Так что вряд ли вы завысили истинное значение концентрации белка.
Сколько в вашем белке аминокислот 650-670? и сколько у него фенилаланинов, гистидинов, тирозинов и триптофанов?
Да, и кстати вы белок перед измерением разводили или так, типа "5мг/мл" и капали на нанодроп?
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 11.08.2017 01:14     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

))) Конечно, капал 1мкл, как есть, без всякого разведения.

Состав посмотрю в лабе.
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 11.08.2017 01:18     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

Переделал эксперимент, и свой образец взял за стандарт теперь. Разводил не как прошлый раз 1мкл в 4999 мкл, а сделал ступенчатое разведение. В этот раз с каждым понижением концентрации было видно снижение OD.
Как быть? Можно использовать этот белок, как Стандарт для аналогов, произведенных в лабе?
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 11.08.2017 09:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

(Rob @ 11.08.2017 02:14)
Ссылка на исходное сообщение  ))) Конечно, капал 1мкл, как есть, без всякого разведения.


Ага! "Не правильно ты дядя Федор, бутерброд ешь"<c>

Разводить надо концентрированные растворы. В сильно концентрированных растворах концентрация занижается причем, чем концентрированнее раствор, тем больше это занижение.

В общем , я думаю гипотеза, "неправильно померил концентрацию" себя оправдала.

Ошибка не учета мол.масс белков плюс занижение истинной концентрации при замере на CФ и вот вам результат.
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 11.08.2017 17:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

Благодарю...Буду переделывать
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 14.08.2017 15:13     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #32 множественное цитирование

(MMM @ 11.08.2017 10:13)
Ссылка на исходное сообщение  Ага! "Не правильно ты дядя Федор, бутерброд ешь"<c>

Разводить надо концентрированные растворы. В сильно концентрированных растворах концентрация занижается причем, чем концентрированнее раствор, тем больше это занижение.

В общем , я думаю гипотеза, "неправильно померил концентрацию" себя оправдала.

Ошибка не учета мол.масс белков плюс занижение истинной концентрации при замере на CФ и вот вам результат.



И вопрос все еще остается...Можно ли Стандарт из кита использовать для замера концентрации белков, производимых в лабе? Или лучше использовать коммерческий белок с известной концентрацией, аналог которого мы и пытаемся произвести?
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 14.08.2017 17:39     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #33 множественное цитирование

Вопрос остается: можно ли вообще использовать данный тест для определения белков не являющимися IgG человека. И тут я бы обсуждал это с тех поддержкой производителя кита.
Участник оффлайн! Rob
Участник



 прочитанное сообщение 15.08.2017 03:07     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #34 множественное цитирование

Моя оплошность, я не уточнил, что коммерческий белок Fc..
Корректно ли делать Элайзу в лабе, и за стандарт брать этот белок?
Мне подали идею использовать, как стандарт BSA....не знаю уже

Кит был нужен всего лишь для сравнения его Стандарта с коммерческим белоком, который мы собираемся использовать в качестве Стандарта для Элайзы сделанной в лабе.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 15.08.2017 07:47     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #35 множественное цитирование

-- Моя оплошность, я не уточнил, что коммерческий белок Fc.
Нет, ваша оплошность не в этом. Что с того, что он Fc?
-- Корректно ли делать Элайзу в лабе, и за стандарт брать этот белок?
Нет, некорректно. За стандарт в ИФА всегда берется тот аналит, на который получена данная система ИФА. То есть стандартом для ИФА набора на ваш белок должен быть ваш чистый белок.
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  23.11.2021 15:06     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #36 множественное цитирование

http://replicarolexwatches.simpsite.nl/
https://www.smore.com/rj7kh-best-replica-watches
https://www.athleticsnation.com/users/Replicarolexwatches
https://pastebin.pl/view/ab0e458a
https://mix.com/watcheshutukcom
https://www.woddal.com/post/359216_tiny-acc...nybody-039.html
https://share.naturalnews.com/posts/3904099
https://demo.wowonder.com/post/214429_the-i...-producers.html
https://rapichat.com/post/5369_our-purpose-...ible-there.html
https://dashburst.com/replicarolexwatches/1
https://sway.office.com/KifcQvn36MK821G8
https://flipboard.com/@replicarolex24
https://getpocket.com/redirect?url=https%3A...eshut.uk.com%2F
https://www.openstreetmap.org/user/Hints%20...20Rolex%20Watch

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.04.24 22:12
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft