Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Анастейша |
1.перемешали на магнитной мешалке полиакриламидную смесь до полного растворения, добавили 40 мкл ТЕМЕDа, 2.отлили 5 мл на пробку и поставили обратно на магнитную мешалку, 3.к 5 мл добавили 12 мкл ТЕМЕDа и 62 мкл PSA 10% и перемешали, 4.залили пробку в камеру, 5.к оставшиеся 35 мл полиакриламидной смеси добавили 293 PSA 10%, перемешали и залили в камеру, 6.оставили полимеризоваться, 7.по истечению времени (минут 40) внесли пцр пробы по 5 мкл и 2 мкл маркера, 8.электрофорез шёл 1 час 20 минут, сняли гель под струёй воды, 9.выдержали гель в бромистом этидии 5 минут, 10.положили гель на трансиллюминатор и получили следующую картину: Картинки: P9297310.JPG — (1.36мб) |
ksm Постоянный участник |
|
Ivalex Участник |
|
Анастейша |
|
dk Постоянный участник Россия |
|
Ivalex Участник |
(Анастейша @ 02.10.2017 15:44) вопрос заключается в том,почему он получился таким нечетким и пятнистым, в чём может быть причина?)) Пятнистый потому что грязный. Стекла плохо мылись или что-то еще. Сравнение с серебряным крашением, конечно, некорректное, но вот у нас был плохой тиосульфат, от него была куча пятен. Поменяли - стало хорошо А сам гель достаточно четкий, остальное - работа в графическом редакторе для улучшения визуализации результата. Контраст, цвета, все такое. |
X34 Участник |
а вам анастасия над бы к шефу подойти и тонко намекнуть, что де 21-й век на дворе, хорош этидием молодых симпатичных барышней травить |
X34 Участник |
(гель @ 02.10.2017 15:18) ну ландно чиго на девушку наехали ну касяк у меня однажды китайсский аспирант за ночь умудрился обламать все ухи на вертикольных гелях а вот за это в 90-х просто убивали |
Анастейша |
|
Анастейша |
|
-Ъ- Постоянный участник Москва |
После этидия 10-15 мин отмачивайте (отмывайте) в воде в два захода. И вообще, с ДНК еще в прошлом веке работали на агарозе, 3-4%. АА, если не денатурирующий, все размеры фрагментов искажает в зависимости от состава.
|
Анастейша |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |