metrim, вероятно так оно и есть.
Интересно, производители, часом, не фрицы? DR1 = Drucker ? (принтер по-немецки)

Как распознается прибор в компьютере? (гляньте в диспетчере устройств).
Если камера хоть как-то распознается, гуглите и ставьте дрова в зависимости от ID распознанного устройства.
Еще обратите внимание на использования переходника с LPT на USB. Это, все-таки, проще и дешевле.

Если с геномки трудно хорошие праймеры задизанить - попробуйте nested PCR. Амплифицируйте бОльший кусок с удобными праймерами, а дальше с него уже ПЦРьте ваш ген плохими праймерами, не парясь насчет неспецифики.

Если для РТ-ПЦР нужно - согласен с R.J.Dio, пишите сами.

спасибо! отправил в личку

в том-то и дело, что не. На сайте только апдейт

уважаемые коллеги,
очень нужна программа CFX manager (Bio-Rad)
буду очень признателен если кто-нибудь поделится, подойдет любая версия 2.1–3.0
молбиоловский сервер с софтом чего-то не отвечает

Gibson assembly? сразу вместе с плазмидой

вот и я первый раз слышу )
но, вероятно, e. coli...

А он там пиай был или кто?
Странно если профессор - не самолично же он антитела бодяжил

2 пункт, в целом, инициативу поддерживаю.
Как насчёт самого простого - ограничения для всех новых участников до 10 или даже 5 постов в день. Если всё по делу и без шизы, то ограничение снимать.

Уважаемые модераторы форума!

Не знаю как остальных посетителей, а меня уже порядком достало, что люди с никами "Kapa Parla" , "bee3" и т.п. загаживают ветки форума. Их сообщения явно указывают на психические отклонения авторов и изобилуют матом. Возможно, это один и тот же человек пишет под разными никами, сути это не меняет.
Забаньте вы уже их, наконец, ну сколько можно!

а по-моему, при pH 6 ничего с ним не будет. Вообще ничего.

"- А можешь карету за день починить?
- Могу
- А за три дня?
- Ну... Могу, барин.
- А за неделю починить карету сможешь?
- Ну, если постараться, то и за неделю смогу..."

А если серьезно, со вторым вектором тоже хороший вариант. Надежный, хоть и несколько медленный.

СтОит, еще как! Как раз с плазмидами около 20кб прокатывало "на ура". Много колоний не было, штук 5 с трансформации, зато почти все нужные.

Но сильно зависит от эффективности фосфорилирования. Лучшие результаты были когда заказывали 5' фосфорилированные олиги, хотя бы один. Если кинировались обычные, эффективность была похуже.

У папы Карло самый жизнеспособный вариант. Не забудьте дефосфорилировать концы фрагмента с антибиотик-резистентным геном.

Про малый фрагмент из олигов забудьте - согласен с R.J.Dio, будет очень криво.

А вот инвертированную ПЦР как самый быстрый вариант я все-таки попробовал бы - 20 кб много, но не предел, полимераза Phusion от Thermo, к примеру, с плазмиды и 30 поднимает влегкую, сам видел.

просто фосфорилируете олиги (в них только сайты с доп. буквами чтоб по обоим потом можно было порезать, ничего лишнего) и пцрите ваши 20 кб. Потом режете из геля и лигируете фрагмент сам на себя (Phusion оставляет тупые концы).

Плюсы - 1. можно добавить сайты абсолютно куда угодно, уникальный сайт рестрикции как место вставки не нужен. 2. С тамими размерами плазмиды у вас практически все клоны будут правильные, интер-продуктов не будет.

Думаю, как раз из-за хорошей теплопроводности и не рекомендуют керамику для "совсем мини" использовать - у ней, в отличие даже от "просто мини", не предусмотрено водяного охлаждения.

Другое дело, насколько это имеет смысл - в повседневных мини гелях охлаждением мало кто заморачивается.

гель увидел, когда фронт дальше половины убежал, потому решил догнать уже этот срам до конца, чтоб выяснить где пробы и что к чему.
фронт к этому времени шел сильно загнувшись книзу по краям.
Вариант "совсем-совсем перепутали буфер", кстати, в голову не приходил.

Update: повторный SDS-PAGE с теми же пробами прошел в штатном режиме.
Боюсь, что причина безобразия останется загадкой.

вроде если трисы путают, то шмер ровный, фронт плывет. Тут ведь еще варианты могут быть - перепутать можно по-разному

МММ, вот вполне допускаю, что могли быть пузыри, и что буфер мог убежать из-за неплотно прижатого сэндвича с гелем, что и повлияло на контакт...

С электродом все в порядке, это первым делом проверил.

МММ, если путают трисы, вроде иначе выглядит...

R.J.Dio, это сколько ж соли надо, чтобы так скукожить

Доброго дня, товарищи.
Студент довольно необычно запорол гель, см. картинку.
Гель 10%, справа и слева маркеры, между ними 8 проб.
Очевидно, что где-то косяк, но в целях профилактики хочется понять где именно.
Сорри за качество фото, это с телефона, да и гель отмыт от кумаси-г не полносью

- Нам нужно 3 млд $ чтобы найти Бозон Хиггса
- Стоп. Разве вы его уже не нашли год или 2 назад?
- Ну.. Эээ... В общем...
- Только не говорите, что вы его потеряли!
- Послушайте. В нашу защиту скажу, что он оочень маленький

баш

wtf?