Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Новая научная разработка. Просьба прочесть, признать, запустить в работу. | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 05.10.2021 20:09 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #2068157 |
Ответов: 75 |
Просмотров: 20 386
Ну хорошо, попробую задать вам пару вопросов, может быть они помогут вам немного более критично посмотреть на вещи:
1. как вы думаете откуда в базах данных взялись последовательности белков, которые вы так ловко переводите в антисмысловые? 2. Чем антисмысловые (в кавычках, конечно) белки отличаются от рэндомных последовательностей аминокислот? Если вы правильно ответите на эти вопросы, то многое проясниться, и по поводу новой ветви знаний и по поводу приоритетов (это конечно самое смешное). |
Димеры праймеров | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 10.09.2021 20:01 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #2053760 |
Ответов: 5 |
Просмотров: 3 694
Димеров не видно на форезе. Неспецифика на 300 но.
|
Новая научная разработка. Просьба прочесть, признать, запустить в работу. | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 07.09.2021 23:38 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #2051694 |
Ответов: 75 |
Просмотров: 20 386
Вам очень вежливо и тактично (по местным меркам) намекнули об абсолютной бессмысленности ваших умозаключений. Ничего, кроме как принять это и заняться чем то более соответствующим вашей квалификации, никто здесь вам не сможет посоветовать. Или присоединиться к сонму альтернативщиков шарлатанов, увы.
|
SARS-подобные вирусы в подковоносах на юге России | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 22.05.2021 23:13 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1981395 |
Ответов: 5 |
Просмотров: 1 398
Всем интересующимся представляю первые результаты нашего проекта по изучению SARS-подобных коронавирусов на территории России. Их носителями являются подковоносы рода Rhinolophus – летучие мыши с характерным кожным выростом на морде (можно увидеть на фото). У нас они распространены на юге, главным образом на Кавказе, черноморском побережье и в Крыму. Мы обследовали подковоносов из нескольких известных пещер и ряда других локаций в районе Сочи-Адлер. В результате были найдены два новых коронавируса, которые мы назвали Хоста-1 и Хоста-2, поскольку первая находка была в пещере Хоста 1. В целом вирусы найдены в трех из пяти обследованных пещер, причем в пещере Колокольная вирус Хоста-1 обнаружен у 15 из 24 особей большого подковоноса т.е. их зараженность составила более 60%. Эти вирусы выделяются с фекалиями летучих мышей в очень высоком титре.
В генетическом плане найденные вирусы Хоста-1 и Хоста-2 являются ближайшими родственниками как вирусов SARS и SARS-2 (КОВИД-19), так и их многочисленных вариантов из китайских летучих мышей. Статья доступна на биоархиве по ссылке. |
Случайная сортировка fastq ридов | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 27.09.2019 17:29 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1770632 |
Ответов: 5 |
Просмотров: 3 968
В биопитоне это все можно сделать одним скриптом
|
Next-gen секвенирование в России | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 05.02.2019 12:35 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1743444 |
Ответов: 3342 |
Просмотров: 563 811
Коллеги, летом понадобиться прогнать NGS на HiSeq.
Где нынче это хорошо и недорого сделать? Евроген? Генотек? Сколково? Где еще? Что лучше по цене/качеству HiSeq2500, 4000 или еще что? Речь идет именно о прогоне готовой мультиплексной б-ки. |
Next-gen секвенирование в России | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 28.01.2019 17:50 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1742815 |
Ответов: 3342 |
Просмотров: 563 811
|
гель NimaPOP-7 | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 13.11.2018 17:08 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1736384 |
Ответов: 2 |
Просмотров: 2 871
Неужели все только на родном гоняют ?
|
гель NimaPOP-7 | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 12.11.2018 17:57 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1736307 |
Ответов: 2 |
Просмотров: 2 871
Коллеги, у кого был опыт использования геля NimaPOP-7 в ABI3100/3130 секвенаторе?
Я вот решил его попробовать, но что-то полная хня получается. |
Как лучше для сборки де ново НГС? | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 27.08.2018 15:09 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1727021 |
Ответов: 14 |
Просмотров: 2 868
(ksm @ 27.08.2018 15:12) да, я уж разобрался, спасибо за пояснения! буду знать об этой возможности. по поводу длины: например в спейдсе вы сможете собирать геном при максимальной длине к-мера - 127. в случае 75*2 - только при <75 (но это если не триммированные, что не рекоммендуют). парные риды можно слить, но нужно чтобы они пересекались. что у вас за библиотека? обычная РНК библиотека с вирусными геномами. Я длину слова больше 64 не ставлю (в CLC это вообще максимум). Обычно 24-32 |
Как лучше для сборки де ново НГС? | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 27.08.2018 13:42 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1727009 |
Ответов: 14 |
Просмотров: 2 868
|
Как лучше для сборки де ново НГС? | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 23.08.2018 20:11 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1726726 |
Ответов: 14 |
Просмотров: 2 868
(ksm @ 23.08.2018 03:57) Single Reads 22-25 M; Paired-End Reads 44-50 M. Картридж не 150РЕ, а 150 циклов. Т.е. 75 прочтет и нах пошлет! Это с чего бы ? PE от SE отличается только наличием еще одного праймера для второго "конца". Можете хоть 600 с одного конца зарядить (с понятным результатом), прибору абсолютно все равно. Тип картриджа ему нигде не закладывается. Вопрос то больше по сборке де ново, что лучше будет собираться 150 или 2х75 |
Как лучше для сборки де ново НГС? | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 22.08.2018 23:53 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1726631 |
Ответов: 14 |
Просмотров: 2 868
Почему качество будет хуже? Из-за длины? Или из-за перевертыша?
Я вот думаю что 150 по крайней мере будет быстрее .... |
Обнаружение вирусов гепатита В и С в организме | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 22.08.2018 22:25 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1726622 |
Ответов: 21 |
Просмотров: 8 399
Можно подумать, что в данном случае есть еще методы кроме ИФА и ПЦР. ТС не ищите заговор там, где его нет. Анализы на ВГС и ВГБ, предлагаемые в любом КДЛ это наиболее релевантные и чувствительные тесты на сегодняшний день. И врачи вас не обманывают, именно так все и обстоит. Не найдете вы других ответов.
|
Как лучше для сборки де ново НГС? | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 22.08.2018 22:19 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1726621 |
Ответов: 14 |
Просмотров: 2 868
Вопрос к мирозданию : запускаю MiSeq картридж v3 150PE. Мучительно думаю как лучше 150 в одну сторону или два раза по 75. Дальше будет сборка де ново. Что думаете, НГСники?
|
Российский фонд фундаментальных исследований | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 16.06.2018 18:31 |
Организация работы группы/лаборатории |
link: #1717788 |
Ответов: 929 |
Просмотров: 326 241
Мне в этом году просто перечислили на карту все деньги на зарплату всем исполнителям, все командировки, и т.д. и т.п. Главный бухгалтер сказала, что как я буду тратить эти деньги ее больше не касается. Все вопросы с налоговой и РФФИ это теперь проблема грантополучателей. Так что все движется в правильном направлении.
|
Инфекционные Заболевания. | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 11.06.2018 11:00 |
Беседа |
link: #1717208 |
Ответов: 150 |
Просмотров: 19 894
Сдается мне, что этот свежевысранный гений- самородок играет в долгую и готовиться использовать ссылки на molbiol для своей дальнейшей респектализации.
Пока не поздно, сносите всю эту пустую трепотню |
Инфекционные Заболевания. | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 09.06.2018 10:40 |
Беседа |
link: #1716989 |
Ответов: 150 |
Просмотров: 19 894
Какое восхитительное абсолютное невежество
Вы что -то очень легко путаете наше - ваше, когда пишете о том, что ВАМ неизвестно и непонятно. И откуда убеждение о "полуразваленой" системе противочумных станций? Дилетант |
Малый выход РНК | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 16.05.2018 21:41 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1714108 |
Ответов: 21 |
Просмотров: 4 665
Какие лунки? Т.е. сколько вы ожидали получить? 20 нг на мкл это 1 мкг в 50 мкл, а это много, а не мало.
|
Российский фонд фундаментальных исследований | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 16.05.2018 21:33 |
Организация работы группы/лаборатории |
link: #1714105 |
Ответов: 929 |
Просмотров: 326 241
(NPR @ 16.05.2018 06:21) Да это понятно, как ясный день. Вопрос в другом. Чем грозит такое положение дел и поведение организации и ее руководсва: 1) самой организации, которая, зная установленный РФФИ Порядок, подписав соответствующее соглашение, наплевала на все это; 2) руководителю проекта, которому не удалось отстоять свои законные права; 3) исполнителям. Понятно, что руководитель и исполнители теряют треть бюджета выделенного на исследования. Какие санкции со стороны РФФИ могут последовать по этим трем позициям. Проблема в том, что и руководитель и исполнители по основному месту работы заняты в организации и руководство использует это для оказания давления по принципу "ну попробуй поспорь, посмотрим долго ли после этого ты у нас проработаешь". При этом других организаций, через которые можно было бы получать гранты в регионе практически нет. Люди по этому и не спорят, мирятся с таким положением дел, но если последуют какие-либо санкции со стороны РФФИ, то пострадают в первую очередь именно руководитель и исполнители, например за то, что не проинформировали РФФИ о нарушениях условий соглашения. Поэтому хотелось бы знать - чем грозит и как с этим бороться. Держатель гранта пострадает только тем, что 30% лишние отдадите с зарплаты. Все претензии к организации. Но вообще то эта тема не новая, за последние годы поднималась много раз и в бухгалтериях институтов вроде бы уже должны это все знать. У вас что это первый грант РФФИ в истории института? |
Российский фонд фундаментальных исследований | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 16.05.2018 21:31 |
Организация работы группы/лаборатории |
link: #1714103 |
Ответов: 929 |
Просмотров: 326 241
20% с РФФИ брать это форменное жлобство. Так и передайте руководству организации
|
Выделение РНК из культуры клеток тризол(invitrogen) | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 12.05.2018 22:53 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1713486 |
Ответов: 24 |
Просмотров: 5 554
(ship @ 12.05.2018 17:37) Это что за бред? снятие клеток ГТЦ? Что вообще тут развели про РНК в двух тема за ахинею. Все прекрасно выделяется и тризолом и ГТЦ, и выбор методов и подходов опрелделяется типом образцов, его количеством, нужной фракцией РНК, и тп. Выход в ГТЦ никак не на порядок меньше чем с тризолом. Откуда инфа про стеклянные бусы для лизиса? ГТЦ все прекрасно лизирует если и так, ну можно лизат через шприц прогнать. На дворе 21 век, а вы тут опять про самопалные буферы и методы на коленке. Выделять надо китами, если есть возможность. Если дорого или очень много образцов - то пожалуйств, можно тризолом или подобным реагентами. Евроген вон продает такой реагент, почитайте протокол как клетки лизировать. Можно прям в чашке. Если стремно - то трипсином снять и открутить. то же самое в китах qiagen, хотите Qiazol заливайте в чашку, хотите трипсинизируйте. здесь речь как раз о самых фирменных китах и растворах. Про то, что для эффективного выделения РНК пробы нужно гомогенизировать, написано в инструкции RNeasy. Может быть с бусами я немного перебрал (я при любом таком случае использую TissueLyser ))), но дополнительный степ гомогенизирования в лизирующем буфере просто необходим и об этом написано в инструкции. Я только отметил, что на этот момент обычно забивают. |
Выделение РНК из культуры клеток тризол(invitrogen) | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 12.05.2018 22:43 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1713480 |
Ответов: 24 |
Просмотров: 5 554
МММ, нет, мне никто не наступал на мозоль ))). Просто есть очень большой опыт по выделению РНК из клеток, тканей, жидкостей и т.д. И не просто РНК, а как правило вирусной, которая дальше на НГС, нозерн и прочее, т.е. не просто для ПЦР, а по сути препаративное, когда даже 2-4-6 кратная разница в выходе имеет значение.
Лично испытаны практически все киадженовские РНК киты, несколько Зиморесечей и т.д. Так вот самая эффективная по чистоте и выходу схема это лизис клеток тризолом, а затем водную фазу на колонку из RNeasy или любую другую (это кстати есть у них такой кит - для жирных тканей). Что бы убедиться в этом достаточно просто выделить РНК из двух одинаковых матрасов тризолом и просто китом и измерить РНК на Qubit. Судя по комментариям никто из участников темы этого не делал, а я делал и поэтому пишу с такой уверенностью. Возвращаясь к сути вопроса: ТС спросил можно ли ему заливать монослой тризолом, я ему рекомендую - не просто можно, а нужно )). |
бесфенольные методы очистки нуклеиновых кислот | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 12.05.2018 14:31 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1713400 |
Ответов: 100 |
Просмотров: 15 970
Передовое человечество как раз тризолом все и выделяет. Ибо быстро и эффективно.
Но за статью спасибо )) |
Выделение РНК из культуры клеток тризол(invitrogen) | |
ASDF Постоянный участник |
Отправлено: 12.05.2018 14:30 |
Молекулярная и клеточная биология |
link: #1713399 |
Ответов: 24 |
Просмотров: 5 554
Есть один момент, который как то в стороне остается - что бы 100% (как тризолом) лизировать клетки ГТЦ их нужно с керамическими бусами перетрясти в гомогенизаторе. (например кайджин так и пишет об этом в инструкции мелкими буквами).
Но этим никто не заморачивается, итог - выход РНК в разы меньше, чем просто тризолом. А по поводу пластика, вам шашечки или ехать? Никаких проблем с выделением НК из монослоя при залитии его тризолом не наблюдается в принципе. |
страницы (21): 1 2 3 > » |
Есть новые сообщения Нет новых сообщений Тема с вашим участием |
Горячая тема (есть новые сообщений) Горячая тема (нет новых сообщений) Важная тема |
Опрос — есть новые голоса Опрос — нет новых голосов Опрос с вашим участием |
Объявление Закрытая тема Перемещённая тема |