Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Результаты поиска -- Найденные сообщения --

страницы (21):  1 2 3 > » 

Новая научная разработка. Просьба прочесть, признать, запустить в работу.
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 05.10.2021 20:09  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #2068157  |  Ответов: 75  |  Просмотров: 20 386
Ну хорошо, попробую задать вам пару вопросов, может быть они помогут вам немного более критично посмотреть на вещи:
1. как вы думаете откуда в базах данных взялись последовательности белков, которые вы так ловко переводите в антисмысловые?
2. Чем антисмысловые (в кавычках, конечно) белки отличаются от рэндомных последовательностей аминокислот?

Если вы правильно ответите на эти вопросы, то многое проясниться, и по поводу новой ветви знаний и по поводу приоритетов (это конечно самое смешное).

Димеры праймеров
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 10.09.2021 20:01  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #2053760  |  Ответов: 5  |  Просмотров: 3 694
Димеров не видно на форезе. Неспецифика на 300 но.

Новая научная разработка. Просьба прочесть, признать, запустить в работу.
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 07.09.2021 23:38  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #2051694  |  Ответов: 75  |  Просмотров: 20 386
Вам очень вежливо и тактично (по местным меркам) намекнули об абсолютной бессмысленности ваших умозаключений. Ничего, кроме как принять это и заняться чем то более соответствующим вашей квалификации, никто здесь вам не сможет посоветовать. Или присоединиться к сонму альтернативщиков шарлатанов, увы.

SARS-подобные вирусы в подковоносах на юге России
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 22.05.2021 23:13  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1981395  |  Ответов: 5  |  Просмотров: 1 398
Всем интересующимся представляю первые результаты нашего проекта по изучению SARS-подобных коронавирусов на территории России. Их носителями являются подковоносы рода Rhinolophus – летучие мыши с характерным кожным выростом на морде (можно увидеть на фото). У нас они распространены на юге, главным образом на Кавказе, черноморском побережье и в Крыму. Мы обследовали подковоносов из нескольких известных пещер и ряда других локаций в районе Сочи-Адлер. В результате были найдены два новых коронавируса, которые мы назвали Хоста-1 и Хоста-2, поскольку первая находка была в пещере Хоста 1. В целом вирусы найдены в трех из пяти обследованных пещер, причем в пещере Колокольная вирус Хоста-1 обнаружен у 15 из 24 особей большого подковоноса т.е. их зараженность составила более 60%. Эти вирусы выделяются с фекалиями летучих мышей в очень высоком титре.
В генетическом плане найденные вирусы Хоста-1 и Хоста-2 являются ближайшими родственниками как вирусов SARS и SARS-2 (КОВИД-19), так и их многочисленных вариантов из китайских летучих мышей.

Статья доступна на биоархиве по ссылке.
https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2021.05.17.444362v1

Случайная сортировка fastq ридов
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 27.09.2019 17:29  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1770632  |  Ответов: 5  |  Просмотров: 3 968
В биопитоне это все можно сделать одним скриптом

Next-gen секвенирование в России
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 05.02.2019 12:35  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1743444  |  Ответов: 3342  |  Просмотров: 563 811
Коллеги, летом понадобиться прогнать NGS на HiSeq.

Где нынче это хорошо и недорого сделать? Евроген? Генотек? Сколково? Где еще? Что лучше по цене/качеству HiSeq2500, 4000 или еще что?

Речь идет именно о прогоне готовой мультиплексной б-ки.

Next-gen секвенирование в России
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 28.01.2019 17:50  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1742815  |  Ответов: 3342  |  Просмотров: 563 811
(anti anti @ 28.01.2019 18:44)
Ссылка на исходное сообщение  ну они первые в россии MinION и запустили


запустили MiniION......

в космос что ли?

гель NimaPOP-7
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 13.11.2018 17:08  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1736384  |  Ответов: 2  |  Просмотров: 2 871
Неужели все только на родном гоняют ? confused.gif

гель NimaPOP-7
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 12.11.2018 17:57  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1736307  |  Ответов: 2  |  Просмотров: 2 871
Коллеги, у кого был опыт использования геля NimaPOP-7 в ABI3100/3130 секвенаторе?
Я вот решил его попробовать, но что-то полная хня получается.

Как лучше для сборки де ново НГС?
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 27.08.2018 15:09  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1727021  |  Ответов: 14  |  Просмотров: 2 868
(ksm @ 27.08.2018 15:12)
Ссылка на исходное сообщение  да, я уж разобрался, спасибо за пояснения! буду знать об этой возможности.
по поводу длины: например в спейдсе вы сможете собирать геном при максимальной длине к-мера - 127. в случае 75*2 - только при <75 (но это если не триммированные, что не рекоммендуют). парные риды можно слить, но нужно чтобы они пересекались. что у вас за библиотека?


обычная РНК библиотека с вирусными геномами. Я длину слова больше 64 не ставлю (в CLC это вообще максимум). Обычно 24-32

Как лучше для сборки де ново НГС?
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 27.08.2018 13:42  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1727009  |  Ответов: 14  |  Просмотров: 2 868
(ksm @ 23.08.2018 03:57)
Ссылка на исходное сообщение  
Single Reads 22-25 M; Paired-End Reads 44-50 M.


M - это число ридов, а не н.о. Просто в первом случае это риды по 150, во втором риды по 75.

Как лучше для сборки де ново НГС?
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 23.08.2018 20:11  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1726726  |  Ответов: 14  |  Просмотров: 2 868
(ksm @ 23.08.2018 03:57)
Ссылка на исходное сообщение  

Single Reads 22-25 M; Paired-End Reads 44-50 M. Картридж не 150РЕ, а 150 циклов.  Т.е. 75 прочтет и нах пошлет!


Это с чего бы ? PE от SE отличается только наличием еще одного праймера для второго "конца". Можете хоть 600 с одного конца зарядить (с понятным результатом), прибору абсолютно все равно. Тип картриджа ему нигде не закладывается.

Вопрос то больше по сборке де ново, что лучше будет собираться 150 или 2х75

Как лучше для сборки де ново НГС?
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 22.08.2018 23:53  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1726631  |  Ответов: 14  |  Просмотров: 2 868
Почему качество будет хуже? Из-за длины? Или из-за перевертыша?

Я вот думаю что 150 по крайней мере будет быстрее ....

Обнаружение вирусов гепатита В и С в организме
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 22.08.2018 22:25  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1726622  |  Ответов: 21  |  Просмотров: 8 399
Можно подумать, что в данном случае есть еще методы кроме ИФА и ПЦР. ТС не ищите заговор там, где его нет. Анализы на ВГС и ВГБ, предлагаемые в любом КДЛ это наиболее релевантные и чувствительные тесты на сегодняшний день. И врачи вас не обманывают, именно так все и обстоит. Не найдете вы других ответов.

Как лучше для сборки де ново НГС?
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 22.08.2018 22:19  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1726621  |  Ответов: 14  |  Просмотров: 2 868
Вопрос к мирозданию : запускаю MiSeq картридж v3 150PE. Мучительно думаю как лучше 150 в одну сторону или два раза по 75. Дальше будет сборка де ново. Что думаете, НГСники?

Российский фонд фундаментальных исследований
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 16.06.2018 18:31  |  Организация работы группы/лабораторииОрганизация работы группы/лаборатории  |  link: #1717788  |  Ответов: 929  |  Просмотров: 326 241
Мне в этом году просто перечислили на карту все деньги на зарплату всем исполнителям, все командировки, и т.д. и т.п. Главный бухгалтер сказала, что как я буду тратить эти деньги ее больше не касается. Все вопросы с налоговой и РФФИ это теперь проблема грантополучателей. Так что все движется в правильном направлении.

Инфекционные Заболевания.
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 11.06.2018 11:00  |  БеседаБеседа  |  link: #1717208  |  Ответов: 150  |  Просмотров: 19 894
Сдается мне, что этот свежевысранный гений- самородок играет в долгую и готовиться использовать ссылки на molbiol для своей дальнейшей респектализации.

Пока не поздно, сносите всю эту пустую трепотню

Инфекционные Заболевания.
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 09.06.2018 10:40  |  БеседаБеседа  |  link: #1716989  |  Ответов: 150  |  Просмотров: 19 894
Какое восхитительное абсолютное невежество

Вы что -то очень легко путаете наше - ваше, когда пишете о том, что ВАМ неизвестно и непонятно.

И откуда убеждение о "полуразваленой" системе противочумных станций?

Дилетант

Малый выход РНК
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 16.05.2018 21:41  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1714108  |  Ответов: 21  |  Просмотров: 4 665
Какие лунки? Т.е. сколько вы ожидали получить? 20 нг на мкл это 1 мкг в 50 мкл, а это много, а не мало.

Российский фонд фундаментальных исследований
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 16.05.2018 21:33  |  Организация работы группы/лабораторииОрганизация работы группы/лаборатории  |  link: #1714105  |  Ответов: 929  |  Просмотров: 326 241
(NPR @ 16.05.2018 06:21)
Ссылка на исходное сообщение  Да это понятно, как ясный день. Вопрос в другом. Чем грозит такое положение дел и поведение организации и ее руководсва: 1) самой организации, которая, зная установленный РФФИ Порядок, подписав соответствующее соглашение, наплевала на все это; 2) руководителю проекта, которому не удалось отстоять свои законные права; 3) исполнителям. Понятно, что руководитель и исполнители теряют треть бюджета выделенного на исследования. Какие санкции со стороны РФФИ могут последовать по этим трем позициям. Проблема в том, что и руководитель и исполнители по основному месту работы заняты в организации и руководство использует это для оказания давления по принципу "ну попробуй поспорь, посмотрим долго ли после этого ты у нас проработаешь". При этом других организаций, через которые можно было бы получать гранты в регионе практически нет. Люди по этому и не спорят, мирятся с таким положением дел, но если последуют какие-либо санкции со стороны РФФИ, то пострадают в первую очередь именно руководитель и исполнители, например за то, что не проинформировали РФФИ о нарушениях условий соглашения. Поэтому хотелось бы знать - чем грозит и как с этим бороться.


Держатель гранта пострадает только тем, что 30% лишние отдадите с зарплаты. Все претензии к организации. Но вообще то эта тема не новая, за последние годы поднималась много раз и в бухгалтериях институтов вроде бы уже должны это все знать. У вас что это первый грант РФФИ в истории института?

Российский фонд фундаментальных исследований
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 16.05.2018 21:31  |  Организация работы группы/лабораторииОрганизация работы группы/лаборатории  |  link: #1714103  |  Ответов: 929  |  Просмотров: 326 241
20% с РФФИ брать это форменное жлобство. Так и передайте руководству организации

Выделение РНК из культуры клеток тризол(invitrogen)
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 12.05.2018 22:53  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1713486  |  Ответов: 24  |  Просмотров: 5 554
(ship @ 12.05.2018 17:37)
Ссылка на исходное сообщение  Это что за бред? снятие клеток ГТЦ?

Что вообще тут развели про РНК в двух тема за ахинею.
Все прекрасно выделяется и тризолом и ГТЦ, и  выбор методов и подходов опрелделяется
типом образцов, его количеством, нужной фракцией РНК, и тп. Выход в ГТЦ никак не на порядок меньше чем с тризолом.
Откуда инфа про стеклянные бусы для лизиса? ГТЦ все прекрасно лизирует если и так, ну можно лизат через шприц прогнать.

На дворе 21 век, а вы тут опять про самопалные буферы и методы на коленке.
Выделять надо китами, если есть возможность.

Если дорого или очень много образцов - то пожалуйств, можно тризолом или подобным реагентами.
Евроген вон продает такой реагент, почитайте протокол как клетки лизировать. Можно прям в чашке. Если стремно - то трипсином снять и открутить. то же самое в китах qiagen, хотите Qiazol заливайте в чашку, хотите трипсинизируйте.


здесь речь как раз о самых фирменных китах и растворах. Про то, что для эффективного выделения РНК пробы нужно гомогенизировать, написано в инструкции RNeasy. Может быть с бусами я немного перебрал (я при любом таком случае использую TissueLyser ))), но дополнительный степ гомогенизирования в лизирующем буфере просто необходим и об этом написано в инструкции. Я только отметил, что на этот момент обычно забивают.

Выделение РНК из культуры клеток тризол(invitrogen)
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 12.05.2018 22:43  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1713480  |  Ответов: 24  |  Просмотров: 5 554
МММ, нет, мне никто не наступал на мозоль ))). Просто есть очень большой опыт по выделению РНК из клеток, тканей, жидкостей и т.д. И не просто РНК, а как правило вирусной, которая дальше на НГС, нозерн и прочее, т.е. не просто для ПЦР, а по сути препаративное, когда даже 2-4-6 кратная разница в выходе имеет значение.

Лично испытаны практически все киадженовские РНК киты, несколько Зиморесечей и т.д.
Так вот самая эффективная по чистоте и выходу схема это лизис клеток тризолом, а затем водную фазу на колонку из RNeasy или любую другую (это кстати есть у них такой кит - для жирных тканей).
Что бы убедиться в этом достаточно просто выделить РНК из двух одинаковых матрасов тризолом и просто китом и измерить РНК на Qubit.
Судя по комментариям никто из участников темы этого не делал, а я делал и поэтому пишу с такой уверенностью.


Возвращаясь к сути вопроса: ТС спросил можно ли ему заливать монослой тризолом, я ему рекомендую - не просто можно, а нужно )).

бесфенольные методы очистки нуклеиновых кислот
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 12.05.2018 14:31  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1713400  |  Ответов: 100  |  Просмотров: 15 970
Передовое человечество как раз тризолом все и выделяет. Ибо быстро и эффективно.

Но за статью спасибо ))

Выделение РНК из культуры клеток тризол(invitrogen)
ASDF
Постоянный участник


Отправлено: 12.05.2018 14:30  |  Молекулярная и клеточная биологияМолекулярная и клеточная биология  |  link: #1713399  |  Ответов: 24  |  Просмотров: 5 554
Есть один момент, который как то в стороне остается - что бы 100% (как тризолом) лизировать клетки ГТЦ их нужно с керамическими бусами перетрясти в гомогенизаторе. (например кайджин так и пишет об этом в инструкции мелкими буквами).

Но этим никто не заморачивается, итог - выход РНК в разы меньше, чем просто тризолом.

А по поводу пластика, вам шашечки или ехать? Никаких проблем с выделением НК из монослоя при залитии его тризолом не наблюдается в принципе.
страницы (21):  1 2 3 > »  

Новые сообщения  Есть новые сообщения
Нет новых сообщений  Нет новых сообщений
Нет новых сообщений*  Тема с вашим участием
Горячая тема - новые сообщения  Горячая тема (есть новые сообщений)
Горячая тема - нет новых сообщений  Горячая тема (нет новых сообщений)
Важно - нет новых сообщений  Важная тема
Опрос - есть новые голоса  Опрос — есть новые голоса
Опрос - нет новых голосов  Опрос — нет новых голосов
Опрос -нет новых голосов  Опрос с вашим участием
Объявление  Объявление
Тема закрыта  Закрытая тема
Тема перемещена  Перемещённая тема


Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.04.24 12:54
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft