Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Вера Постоянный участник |
А не подскажете ли Вы мне, может такое быть или нет: Колонка с Ni-агарозой висела слишком близко к обледеневшей стенке холодильника и замерзла. Я ее растаяла водой и нанесла белок, который сроду с колонки не падал раньше времени. В этом эксперименте белок оказался в проскоке. Единственным видимым отличием при работе было то, что колонка капала быстрее, чем обычно - я даже насос не поставила, она быстро капала самотеком. Скажите мне, други, не случалось ли, не дай Бог, с Вами такого, чтоб колонка с никелем промерзала, и после этого не сорбировала нужные белки? Или не попадались ли Вам в литературе такие данные, что ее категорически нельзя замораживать? Спасибо. |
MMM Постоянный участник |
|
Вера Постоянный участник |
|
Tom1 Постоянный участник |
|
vb Постоянный участник |
(MMM @ 17.10.2018 11:01) Замораживать агарозные(сефарозные) колонки нельзя у них матрица разрушается при замерзании. Что бы не замерзала можно хранить в 20% спирте(в этом случае она еще и зарастает меньше) или глицерине. Ну чтоб матрицу разрушить, ее хорошо так проморозить нужно. Скорее всего трещины в геле или между гелем и стенками. поди переупаковать и дальше пользоваться можно. |
Tom1 Постоянный участник |
(vb @ 17.10.2018 09:55) Ну чтоб матрицу разрушить, ее хорошо так проморозить нужно. Скорее всего трещины в геле или между гелем и стенками. поди переупаковать и дальше пользоваться можно. Да латна чтоб все проскочило ничего не село что за тресчины должны быть.... |
genseq Постоянный участник |
|
Tom1 Постоянный участник |
(genseq @ 17.10.2018 22:12) Агароза с никелем - это агароза с пришитым комплексоном, на который посажен никель. Связывается он с матрицей координационными связями. И ими же связывает белки. Никель понемногу теряется, и в юзанном геле накапливаются свободные комплексоны. Но они не связываются с никелем по стерическим соображениям - в геле позиции и связанного никеля, и свободных комплексонов, фиксированы. При замораживании и оттаивании гель рвётся и у этих групп появляется возможность провзаимодействовать. Отсюда и потеря белка. Его там связывать уже некому. полковник ты точно гонишь... ))))) |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |