Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Выделение лейкоцитов из цельной крови
Компания Biocommerce - официальный дистрибьютер продукции компаний Miltenyi Biotec GmbH (Германия) и RanD S.r.l. (Италия).
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Колегова Жанна




 прочитанное сообщение 17.09.2008 03:58     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Доброго времени суток!

Стоит задача выделить лейкоциты из 100 мл цельной крови.
Как максимально эффективно отделить эритроциты без центрифугирования?

Я слышала, что оптимальным вариантом будет добавить гепарин, полиглюкин, дождаться осаждения эритроцитов, а потом аккуратно собрать иглой плазму со взвешенными в ней лейкоцитами.

Если я права, подскажите оптимальное соотношение крови и полиглюкина, сколько времени и при какой температуре лучше осаждать.
Если нет, подскажите альтернативный метод.

Лейкоциты должны остаться живыми, т.к. затем планируется инкубация их с лекарственным пераратом и введение пациенту.

Ссылки на подобные методики горячо приветствуются.

Заранее спасибо
Guest
IP-штамп: fr1SnqfFFL55o
гость



 прочитанное сообщение 01.10.2008 23:49     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

оптимальный метод удаления эритроцитов - их лизирование.. методик на форуме было опубликовано целая куча...
Участник оффлайн! Колегова Жанна




 прочитанное сообщение 16.10.2008 04:50     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

А прямой ссылкой не поделитесь?
А то беглый поиск по форуму ничего не дал frown.gif
Участник оффлайн! draculka




 прочитанное сообщение 29.10.2008 18:42     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

Позвольте в качестве бреда...если речь идет о больном (млекопитающее 50-90кг), то искомую дозу лейкоцитов можно получить от объема 450 мл (стандартный мешок с кровью, минимальный, продаваемый в Москве - 250 мл), в котором уже цитрат присутствует (экономим гепарин). По поводу центрифугирования: оно помогает большинству лейкоцитов переместиться в тот самый волшебный слой, где Вы, даже имея некоторые приспособления, зачерпнете и плазму, и эритроциты, что не страшно (по сравнению с самими лейкоцитами). Можно попробовать от обратного. Берем систему для лейкофильтрации, пропускаем через нее кровь, отрезаем лейкофильтр и физраствором вымываем содержимое. Никогда не пробовал,но при Ваших требованиях,чем не вариант.
Фенол
IP-штамп: frXBaTONIry9A
гость



 прочитанное сообщение 24.11.2008 13:00     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

2Dracula: Фильтрационный лейкаферез-это хорошо,но в данном случае слишком технически громоздко, не говоря уже о том, что лейкоциты с фильтра элюируют не физраствором, а кое-чем посерьёзнее.
2Колегова Жанна (если ещё актуально): возьмите кровь, стабилизированную цитратом (или растворами типа ACD, CPDA), добавьте полиглюкин 1:1 с кровью, оставьте на 1 ч при комнатной температуре и отберите образовавшийся надосадок, т.е. лейкоциты и тромбоциты. Надосадок, конечно, будет загрязнён эритроцитами, но необходимость дальнейшей очистки вы должны определить сами.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Cheri
Участник оффлайн! Дядя ФАКСер
moderator
Nothern Maccaronia, Ticinum



 прочитанное сообщение Сообщение на английском  01.04.2009 12:15     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail  ICQ
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

http://www.miltenyibiotec.com/download/cli...alog%202008.pdf
Guest
IP-штамп: fr4I3qoC2Qq4.
гость



 прочитанное сообщение 28.08.2019 09:16     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

(Фенол @ 24.11.2008 13:00)
Ссылка на исходное сообщение 
2Колегова Жанна (если ещё актуально): возьмите кровь, стабилизированную цитратом (или растворами типа ACD, CPDA), добавьте полиглюкин 1:1 с кровью, оставьте на 1 ч при комнатной температуре и отберите образовавшийся надосадок, т.е. лейкоциты и тромбоциты. Надосадок, конечно, будет загрязнён эритроцитами, но необходимость дальнейшей очистки вы должны определить сами.


Спасибо за совет с полиглюкином.
Я правильно понимаю, что его смесь с плазмой 1:1 имеет плотность меньше, чем у эритроцитов, но больше, чем у остальных клеток крови?
Это однозначное название, или их куча разных?
Где он берется?

У меня та же задача, что у инициатора темы. И я нашел только набор для выделения лимфоцитов (а не всех лейкоцитов) "проба-фикол" https://www.dna-technology.ru/sites/default...ll_28-12-15.pdf .
Он не смешивается с кровью, а кровь на него наслаивается. Эритроциты осаждаются, лимфоциты плавают в фиколе (видимо, имеют ту же плотность), а остальные, видимо, собираются на границе раздела плазмы и фикола (они легче фикола, но тяжелее плазмы).

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Клеточные технологии · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 18.01.20 01:12
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft