Rambler's Top100
 		Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Pace makers в ИЭФ -- Что это за штука? --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

 
 Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Olivka
Участник
 прочитанное сообщение 04.02.2017 18:43     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование
Дорогие специалисты!

Не могли бы вы подсказать, что может означать "Pace makers" в ИЭФ?
Написано, что их наносят на 1-ю и 12-ю дорожку геля, а на 2-юи 11-ю наносят маркер pI.

Что это может быть? В гугле в контексте ИЭФ не нашла такого.

В методике написано так: Pace makers are loaded in the first and the last lane (lanes 1 and 12).

Спасибо заранее!
Участник оффлайн! Olivka
Участник
 прочитанное сообщение 04.02.2017 19:50     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование
На фотографии геля видно, что образец на этих дорожках такой же, как исследуемый, картина такая же. Могут это быть некие образцы, которые показывают отсутствие краевого эффекта на пластине?

Что-то вроде "граничных"образцов?

Нигде такого не нашла, впрочем.
Участник оффлайн! Olivka
Участник
 прочитанное сообщение 04.02.2017 20:10     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование
Разметочный образец?
Участник оффлайн! Zaec
 прочитанное сообщение 04.02.2017 21:52     Сообщение для модератора         Фотография  Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование
Возможно имелась ввиду метка из окрашеного белка с известным pI для слежения за ходом электрофореза. Это еще более вероятно, если ваш набор маркеров pI не содержит цветной метки.
Нашел такое упоминание (на на русском) у Остермана в "Исследование биологических макромолекул...", там говорилось о наборе Focusing Calibration Kit от Pharmacia
Участник оффлайн! Olivka
Участник
 прочитанное сообщение 04.02.2017 22:08     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование
Спасибо, почитаю про это. Да, Pace вполне может нести смысл "хода" анализа.

Писали корейцы, поэтому выбор слов не всегда поддается пониманию.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник
 прочитанное сообщение 05.02.2017 07:27     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование
А они часом потом блот из этого не делают? Или вообще что они потом делают с пластиной.
Второе измерение? Массспек? Или просто красят на белок и сравнивают?
Участник оффлайн! Olivka
Участник
 прочитанное сообщение 05.02.2017 18:00     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование
Просто красят и сравнивают расположение полос испытуемого и стандартного образца.

Это анализ для подтверждения подлинности моноклонального антитела.

Думаю все-таки это окрашенный маркер для определения времени завершения фокусирования.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник
 прочитанное сообщение 05.02.2017 19:25     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование
Для фокусирования нет понятия времени завершения. Т.е. оно важно только если у вас времени в обрез и вы хотите поскорее его остановить. А так ИЭФ - не форез - никуда не убежит. И чем дольше оно идет, тем лучше.

Так это точно НЕ контрольные образцы сравнения?? А они точно предокарашенные? Сомневаюсь что предокрашенный образец точно совпадал бы с анализируемым образцом по положению.
Участник оффлайн! Olivka
Участник
 прочитанное сообщение 06.02.2017 20:30     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование
МММ, спасибо за внимание к моему вопросу!

Нет, это не образцы сравнения, точно. У них другие дорожки.

Вы пишете, что в ИЭФ нет понятия времени завершения. Вот в Гос. фармакопее в статье "ИЭФ" написано так:

Время завершения процесса изофокусирования в полиакриламидных гелях, как правило, определяют по предварительно окрашенным стандартным белкам - маркерам (например, гемоглобину), нанесенным на гель в различные точки одновременно с исследуемыми образцами. Процесс считается завершенным в том случае, если все стандартные образцы образуют полосы в установленном месте. Если завершение процесса изофокусирования определяют по времени, прошедшему с момента нанесения образцов, установленное время должно быть обосновано.

Поэтому я и решила, что это может быть такой образец.
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник
 прочитанное сообщение 06.02.2017 23:52     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование
Это неправильно! Гемоглобин в стандартных условиях ИЭФ с высоким содержанием мочевины - сравнительно маленький белок(около 16кДа). Подвижность гемоглобина в растворе в несколько раз выше подвижности альбумина и тем более иммуноглобулина. А это значит, что фокусироваться он будет в несколько раз быстрее, чем эти белки. Т.е. гемоглобин уже сфокусировлся, а иммуноглобулин только только начал локализоваться в своей зоне. Поэтому создать маркер адекватно коррелирующей с фокусированием всех белков в пробе весьма не тривиальная задача. В ИЭФ если и использут стандарты, то только рН для построения кривой градиента, а стандарты процесса фокусировки - это все весьма стремное занятие.
Guest
IP-штамп: frTlWdNmzlEpc
гость
 прочитанное сообщение 09.02.2017 13:34     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование
17 кДа - это миоглобин, может быть
Участник оффлайн! MMM
Постоянный участник
 прочитанное сообщение 09.02.2017 13:51     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование
--МММ, википедия думает, что молекулярный вес гемоглобина - 70 кДа.
Это в грубом приближение тетрамер(димер димеров), в 8М мочевине он превращается в мономер.

Сообщение было отредактировано MMM - 09.02.2017 13:52
Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): ksm
Участник оффлайн! watchesbiz
Постоянный участник
 прочитанное сообщение Сообщение на английском  23.11.2021 15:42     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование
https://app.ex.co/stories/bestreplicawatche...-regime-for-you
https://rolexrelicawatches.hpage.com/replica-watches-uk.html
https://www.cgmimm.com/articles/hints-to-he...lica-watches-uk
https://www.deviantart.com/fakerolexwatches...es-UK-871090193
https://replicawatches24.exposure.co/best-r...eplicawatches24
https://knowyourmeme.com/users/replicawatchesuk
https://www.scoop.it/topic/bestreplicawatch...ica-rolex-watch
https://uberant.com/article/1268140-hints-o...ca-rolex-watch/
https://devpost.com/watcheshutuk
https://www.ted.com/profiles/26540630/about
https://drive.google.com/file/d/1uTx90WraSJ...iew?usp=sharing
https://ibb.co/hgfZwb0
https://writer.zohopublic.com/writer/publis...10192bd4c742ceb
https://replicawatches24.mystrikingly.com/b...ica-rolex-watch
https://my.desktopnexus.com/ReplicawatchesU...a-rolex--31049/
https://sway.office.com/Tqm7mC7s0VWLhKAl

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики 		Назначение кнопок:
   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -  
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 16.04.24 19:09
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft
Powered by Invision Power Board(Trial) v2.0.0 © 2024  IPS, Inc.