Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
guest: Алекса IP-штамп: frjSx8r9LmZ92 гость |
(arndt @ 18.12.2013 11:02) а-ха-ха действительно бранд пошел легким путем, просто впихнул оксид титана в пластик. Обалдеть. Ну хорошо хоть, не все производители так делают. |
Redman Постоянный участник |
(guest: Алекса @ 18.12.2013 17:46) зачем? Для вашего прибора низкопрофильные нужны. Кстати, у аксигена нет высокопрофильных. У них только со стандартным (средним профилем), наверное, их и имеете ввиду. Скорее всего Вы правы. Не я заказывал. Я говорил, что нужны низкопрофильные. |
arndt Постоянный участник |
(Redman @ 18.12.2013 18:00) Купили высокопрофильные стрипы и закрываем их крышками, все аксигеновское. Сигнал видно - все хорошо. С маслом кривые покрасивше выходят. По халатности, моей в том числе, форез ставился в той же комнате, где раскапывался ПЦР, а еще в этой комнате выделяем ДНК и растворяли ДНК быка(около 5г). Теперь праймеры+микс - выходят на 10 циклов позже чем праймеры+микс+ДНК. Но кривые плавления отличаются. Как с этим бороться? Уже месяц, как форез переехал в другую комнату. ДНК выделяем в этой комнате, но под вытяжкой. Раскапываем в ламинарном боксе, но без обдува. Ясно, что было грубое нарушение. Было предложение взять озонатор, чтобы он все окислил. Можно УФ ламп в комнату натащить... Если что, то через месяц будем капать в другой комнате. Немного смущает, что кривые плавления отличаются в контроле и опыте, на разных праймерах. главно потом не будет жалко за бесцелно прожитые годы положите в негатив контрол один нанограм спермы соломона |
arndt Постоянный участник |
(Redman @ 18.12.2013 18:00) Купили высокопрофильные стрипы и закрываем их крышками, все аксигеновское. Сигнал видно - все хорошо. С маслом кривые покрасивше выходят. По халатности, моей в том числе, форез ставился в той же комнате, где раскапывался ПЦР, а еще в этой комнате выделяем ДНК и растворяли ДНК быка(около 5г). Теперь праймеры+микс - выходят на 10 циклов позже чем праймеры+микс+ДНК. Но кривые плавления отличаются. Как с этим бороться? Уже месяц, как форез переехал в другую комнату. ДНК выделяем в этой комнате, но под вытяжкой. Раскапываем в ламинарном боксе, но без обдува. Ясно, что было грубое нарушение. Было предложение взять озонатор, чтобы он все окислил. Можно УФ ламп в комнату натащить... Если что, то через месяц будем капать в другой комнате. Немного смущает, что кривые плавления отличаются в контроле и опыте, на разных праймерах. на сибрах всегда димеры - заточить сибр без димеров высший пилотаж это вам на ТакМан |
arndt Постоянный участник |
(guest: Алекса @ 18.12.2013 18:52) а-ха-ха действительно бранд пошел легким путем, просто впихнул оксид титана в пластик. Обалдеть. Ну хорошо хоть, не все производители так делают. дак весь "белый ПЦР пластик" с титаном например Еппендорф |
arndt Постоянный участник |
(guest: Алекса @ 18.12.2013 18:52) а-ха-ха действительно бранд пошел легким путем, просто впихнул оксид титана в пластик. Обалдеть. Ну хорошо хоть, не все производители так делают. не вижу конкретики - какие производители белого ПЦР пластика не исползуют титан поименно |
arndt Постоянный участник |
(guest: Алекса @ 18.12.2013 18:52) а-ха-ха действительно бранд пошел легким путем, просто впихнул оксид титана в пластик. Обалдеть. Ну хорошо хоть, не все производители так делают. ну АБИ никогда не делала "белые плашки " для Реалтайма - чего АБИ побороть слабо - так пошло махало белыми плашками ? |
arndt Постоянный участник |
(Redman @ 18.12.2013 18:00) Купили высокопрофильные стрипы и закрываем их крышками, все аксигеновское. Сигнал видно - все хорошо. С маслом кривые покрасивше выходят. По халатности, моей в том числе, форез ставился в той же комнате, где раскапывался ПЦР, а еще в этой комнате выделяем ДНК и растворяли ДНК быка(около 5г). Теперь праймеры+микс - выходят на 10 циклов позже чем праймеры+микс+ДНК. Но кривые плавления отличаются. Как с этим бороться? Уже месяц, как форез переехал в другую комнату. ДНК выделяем в этой комнате, но под вытяжкой. Раскапываем в ламинарном боксе, но без обдува. Ясно, что было грубое нарушение. Было предложение взять озонатор, чтобы он все окислил. Можно УФ ламп в комнату натащить... Если что, то через месяц будем капать в другой комнате. Немного смущает, что кривые плавления отличаются в контроле и опыте, на разных праймерах. у вас прибор страшно старый и корявый на этой чудовище вы просто зазря потратите молодость вместо науки вы тратите времы на то почему у Жигулей летит шаровая опора |
Redman Постоянный участник |
(arndt @ 18.12.2013 20:47) у вас прибор страшно старый и корявый на этой чудовище вы просто зазря потратите молодость вместо науки вы тратите времы на то почему у Жигулей летит шаровая опора Так Вы думаете, что никакого загрязнения нет, а вся беда в приборе и димерах? |
Redman Постоянный участник |
(arndt @ 18.12.2013 19:08) главно потом не будет жалко за бесцелно прожитые годы положите в негатив контрол один нанограм спермы соломона Это слишком тонко для меня. Ничего не понял |
arndt Постоянный участник |
(Redman @ 19.12.2013 09:54) выже мелткурв ставите - пик вашего продукта осталное димеры мултимеры купите топ-10 сибр мастермиксов и закажите 5 пар праймеров на ваш таргет |
Redman Постоянный участник |
(arndt @ 18.12.2013 19:12) Проверку ставили на роторджине6000. Там никакого продукта в эппендорфах без днк не наблюдали. |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(arndt @ 18.12.2013 21:15) А почему бы не делать с золотом, но металлическим. И красивее будет, наверное, заблестит. |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(arndt @ 18.12.2013 20:12) ... выбрать идеальные праймеры (без димеров) практически невозможно, а Сибр их обнаруживает на "мелткурвах". А молодежь твоих тонких соломоновых намеков не понимает. |
Guest IP-штамп: frjSx8r9LmZ92 гость |
(-Ъ- @ 19.12.2013 11:53) про соломона-то все ясно. А вот тут что-то совсем тонкое. Мне непонятно )))) |
guest: Алекса IP-штамп: frjSx8r9LmZ92 гость |
(arndt @ 18.12.2013 20:34) ну АБИ никогда не делала "белые плашки " для Реалтайма - чего АБИ побороть слабо - так пошло махало белыми плашками ? ну не надо уж молиться всю жизнь на АБИ. Не всегда и не везде они "впереди планеты всей" и потом, такие монстры как АБИ больше половины продуктов сами не производят. |
guest: Алекса IP-штамп: frjSx8r9LmZ92 гость |
(arndt @ 18.12.2013 20:19) пардоньте, так сходу боюсь соврать... поищу |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(Guest @ 19.12.2013 13:06) Нанозолото добавляют в реакционную смесь для проводимости, а почему бы нет и в пластик тоже. Вообще-то я имел ввиду Redman |
Redman Постоянный участник |
(arndt @ 18.12.2013 19:12) У нас есть и такман. Сегодня-завтра вымываем лабораторию - и поставим еще на них. |
arndt Постоянный участник |
(Redman @ 19.12.2013 15:48) мои любимые мастермиксы ТакМан - квантика особенно на геномке держит до 150 нфнограм геномки на 20 миклов все осталные отдыхают СИБР - Биолайн , без димеров и сурпризов ЕваГреен - биорад |
arndt Постоянный участник |
(Redman @ 19.12.2013 15:48) зачем мыть лабу пипеткой направо налево не размахивай у меня форез и реалтайм в одной комнате никаких проблем |
Redman Постоянный участник |
(arndt @ 19.12.2013 16:47) зачем мыть лабу пипеткой направо налево не размахивай у меня форез и реалтайм в одной комнате никаких проблем Дак в том то и дело, что не размахиваю. И носы новые с фильтрами и наборы. И в шкафу ламинарном раскапываю. Хотя была мысль, что это все от кривых ручек или слабой головушки. Будем работать |
arndt Постоянный участник |
(Redman @ 20.12.2013 01:08) Дак в том то и дело, что не размахиваю. И носы новые с фильтрами и наборы. И в шкафу ламинарном раскапываю. Хотя была мысль, что это все от кривых ручек или слабой головушки. Будем работать с 1998 первый раз вижу что пср в ламинарах ТакМан 35-40 минут СИБР с кривой плавления 50-55 еффективность 95-105 % десятикратные стандартные разведения матрицы и кривые на сцену |
arndt Постоянный участник |
(Redman @ 20.12.2013 01:08) Дак в том то и дело, что не размахиваю. И носы новые с фильтрами и наборы. И в шкафу ламинарном раскапываю. Хотя была мысль, что это все от кривых ручек или слабой головушки. Будем работать вопрос народу у кого есть первый коммерчесский циклер Перкин Елмера образца 1987 куплю дорого |
Redman Постоянный участник |
(arndt @ 20.12.2013 05:50) с 1998 первый раз вижу что пср в ламинарах ТакМан 35-40 минут СИБР с кривой плавления 50-55 еффективность 95-105 % десятикратные стандартные разведения матрицы и кривые на сцену Мы так капать начали только после того, как начал лезть сигнал в контроле. Такман мне не дали. Делал то же самое... и получил то же самое. Сообщение было отредактировано Redman - 20.12.2013 14:01 |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(arndt @ 20.12.2013 07:14) На фига? Купи на ебае, говорят там бывают. |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(Redman @ 20.12.2013 01:08) Дак в том то и дело, что не размахиваю. И носы новые с фильтрами и наборы. И в шкафу ламинарном раскапываю. Хотя была мысль, что это все от кривых ручек или слабой головушки. Будем работать Мысли интересные, но главное - правильные! |
kloun IP-штамп: frz4Hw2duM8Wk гость |
(arndt @ 20.12.2013 06:14) Нужно искать эту машину Baby Blue - но нет её на Ебэе - за неё точно к пенсии много денег дадут: |
Redman Постоянный участник |
(arndt @ 20.12.2013 05:50) с 1998 первый раз вижу что пср в ламинарах ТакМан 35-40 минут СИБР с кривой плавления 50-55 еффективность 95-105 % десятикратные стандартные разведения матрицы и кривые на сцену Такман, то мне дали, но он не оптимизирован... Не уверен можно ли его оптимизировать в данных условиях. 50-55 - это время всей реакции? мы используем трёхшаговый цикл с удержанием по 25(52) 25(72det) 30(95) (40 циклов) и плавление 50-98 с шагом 0.5 градуса - это у нас занимает чуть менее трех часов. Сегодня искал, мб какой праймер не будет давать сигналов - все, что отжигалось при заданной температуре, дало сигнал в смеси без ДНК. Такое впечатление, что мы что-то упускаем. Сообщение было отредактировано Redman - 23.12.2013 17:47 |
Redman Постоянный участник |
Первый график(FAM) - это стандарты. На втором(HEX) стандарты, а циан и розовый - пробы. Картинки: ___.jpg — (97.31к) |
Redman Постоянный участник |
Картинки: Telo.jpg — (124.39к) |
avial Постоянный участник |
|
Redman Постоянный участник |
|
Guest IP-штамп: fr0cSKW7.X7b6 гость |
вот плашки подходят - для MJ Research Inc. PTC-200 DNA Engine Chromo4 96 x 0.2ml MJ Research Inc. PTC-220 DNA Engine Dyad Chromo4 96 x 0.2ml MJ Research Inc. PTC-221 DNA Engine Disciple Chromo4 96 x 0.2ml Bio-Rad Laboratories DNA Engine Chromo4 96 x 0.2ml и других Хромо4 , я так понимаю приборы все одни и те же. 3500р за 25 плашек. |
st3 |
Покупали б/у интернет магазине. При поставке "забыли" положить блок питания для оптического блока. Нужна распиновка 9-пин разъема питания. Может кто-то сможет замерить. Благодарность не будет знать границ. Файл/ы:
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |