Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Zura.zurako |
ПААГ электрофорез белков в денатурирующих условиях (5% концентрирующий гель и 15% разрешающий гель). Длина геля ̶ 10 см., толщина ̶ 0.3 мм. Режим электрофореза: 60 мА для двух гелей при напряжении 130 В (источник питания «Эльф-8»). Есть проблема: белковые треки «пляшут» (см. фото). Сталкивался ли кто-нибудь с подобным? В чём может быть причина? |
Zura.zurako |
|
MMM Постоянный участник |
|
Zura.zurako |
|
MMM Постоянный участник |
|
Zura.zurako |
А может причина "танцев" заключаться в режиме электрофореза? |
MMM Постоянный участник |
(Zura.zurako @ 08.03.2018 14:08) Только если вы сразу начинаете гнать на большом токе. Проблема еще может быть в карманах(неровные) и в пробах(осадки и высокая соль). |
Zura.zurako |
А с карманами, действительно, есть такая проблема: не всегда удаётся убрать то, что не заполимеризовалось, т.к. гель очень тонкий. Правда я не очень понимаю, ведь даже если дно кармана неровное, в концентрирующем геле всё равно всё "сожмётся" в одну узкую (и ровную) полоску и так войдёт в разделяющий? |
MMM Постоянный участник |
|
ship Постоянный участник Moscow |
у меня были похожие волны, когда рН упал до 3. тк со временем раствор закисляется |
Tom1 Постоянный участник |
Никогда не будет пузырей и неровностей... |
Zura.zurako |
(Tom1 @ 09.03.2018 17:15) Если гели сами мастырите то залив разделяюсчииь сверху добавте слегонца бутанола или изопропанола .... как гел запилимеризуется промываите водоиь и заливаите концентрируюсчий.... Никогда не будет пузырей и неровностей... А если сразу дистиллированную воду? Чем она хуже бутанола или изопропанола? |
Zura.zurako |
|
Tom1 Постоянный участник |
вгоняите в концентрируюсчий где-то на 40-60 вольтах, а потом можно до 165-220 вольт погнать, |
guest: Ольга IP-штамп: frjQ2JohnsuSs гость |
|
watchesonline89 Постоянный участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |