molbiol.ru -> Сложные буфера

> Все форумы > Тематические форумы > Молекулярная и клеточная биология

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Правила FAQ* Поиск* Участники* Календарь* Избранные темы* Форум Форумов*

Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ]

Форум:

* Сложные буфера -- comments to a permanent page of the site --

Тема связана с: Многокомпонентные растворы
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

страницы (2): < 1 2

ИФНС
IP-штамп: frlnAsDr.5x7A
гость

10.10.2008 14:27

URL #51

Ребята, откликнитесь! Подскажите хороший лизирующий буфер БЕЗ сохранения целостности клеток! RIPA не тянет!!!!!! Если есть что-то скиньте на FIS82@rambler.ru Заранее благодарна

Ольга_i-v-a
IP-штамп: frRAbmeRhS4Qw
гость

08.04.2009 20:09

URL #52

Помогите пож-та... нужен фосфатный буфер с pH 7,5 и ионной силой 0,05!!! как его получить?? Заранее спасибо!

Yuri K
IP-штамп: frbSxBL61s/9I
гость

08.04.2009 23:24

URL #53

(Ольга_i-v-a @ 08.04.2009 21:09)

Помогите пож-та... нужен фосфатный буфер с pH 7,5 и ионной силой 0,05!!! как его получить?? Заранее спасибо!

Tough call ;-)

pH 7.5 roughly equals the 2nd pKa of the phosphoric acid (7.2). So at pH 7.5 you will have approx. equal concentrations of HPO4(2-) and H2PO4(-). Let us call this concentration X. You will also have potassium concentration that equals 2X+X=3X total. Thus, your ionic strenght equals 3X+X+X^2. Solving the equation

X^2+4X=0.05

we find that X=~0.125. So to make 1 L of buffer you have to take 0.125 mole of KH2PO4 and 0.125 mole of of K2HPO4 and adjust the pH to 7.5 with acid or alkali.

Guest
IP-штамп: frKEKi7a2OV4A
гость

07.10.2010 10:06

URL #54

Скажите пожалуйста, а при приготовлении ТАЕ 50х можно и спользовать ЭДТА 0,5 М рН 8.0 вместо ЭДТА в виде соли? Спасибо заранее!

-Ъ-
Постоянный участник
Москва

07.10.2010 10:37

URL #55

В ЭФ буферах ЭДТА только в виде свободной кислоты.

Сообщение было отредактировано -Ъ- - 07.10.2010 10:40

Guest
IP-штамп: frKEKi7a2OV4A
гость

07.10.2010 16:34

URL #56

Спасибо за ответ. Можно ещё вопросик?
То есть присутствие ионов натрия категорически запрещается? Это каким-то негативным образом сказывается на форезе?
Просто я буфер готовила с добавлением двунатриевой соли ЭДТА и ничего вроде, а тут на форуме в прописях увидела, что ЭДТА надо добавлять не из стока и задумалась правильно ли я его готовлю...

Yuri K
IP-штамп: frLI8F3pAObfM
гость

07.10.2010 17:08

URL #57

(-Ъ- @ 07.10.2010 10:37)

В ЭФ буферах ЭДТА только в виде свободной кислоты.

Впервые слышу, коллега. Там натрия настолько мало, что едва ли он на чем-то скажется. Народ обычно берет готовый ЭДТА раствор из сигмовской банки 0.5 М динатриевая соль, и не берет в голову.

-Ъ-
Постоянный участник
Москва

07.10.2010 18:37

URL #58

Такой общий ответ.

Криминала, конечно, никакого если используется р-р ЭДТА 0,5 М с рН 8.0.,, но лучше исключить (минимизировать) ионы сильных кислот и оснований из ЭФ буфера.
К тому же оказалось очень удобно смешивать сухие компоненты буферов (особенно в случае ТБЕ) и при этом я заменил динатриевую соль на свободную кислоту и тем самым снизил рН и ионную силу (проводимость) буфера.

Guest
IP-штамп: frKEKi7a2OV4A
гость

08.10.2010 09:44

URL #59

Спасибо за ответ!

Solar7

27.10.2010 16:51

URL #60

Доброго дня участникам и корифеям! У меня вопрос как раз в тему - нужен органический буфер с низкой проводимостью. Сейчас проверяю натрия салицитат, но хотелось бы избавиться от ионов натрия... чем бы Вы предложили "запаровать" салициловую кислоту, чтобы сделать буфер рН 8.5-9.0, не слишком дорогое и дефицитное? Как вариант, трис? Спасибо!

-Ъ-
Постоянный участник
Москва

27.10.2010 17:20

URL #61

(Solar7 @ 27.10.2010 17:51)

Если Трис не противопоказан, готовите Трис ОН 2М (!!!), это близкий к насыщенному раствор, также готовите максимально концентрированный раствор салициловой кислоты (для удобства тоже 2 М). Смешивая разные объемы эквимолярных растворов готовите 1М раствор Трис-салициловой кислоты нужного рН.
Я так готовлю 1М Трис-глициновый, то бишь Трицин, буфер с рН 8,5.

Daemonarchestratygos
Постоянный участник

27.10.2010 21:49

URL #62

Ах, буфера...

-Ъ-
Постоянный участник
Москва

27.10.2010 23:28

URL #63

(Daemonarchestratygos @ 27.10.2010 22:49)

Ах, буфера...

Манияк...

k204781

19.11.2010 00:08

URL #64

Подскажите, пожалуйста, как правильно приготовить 0,1 М натрий-фосфатный буфер (рН=8,0, V=500 мл). Столько прописей нашлось, что в голове полная каша! Буфер необходим для биотинилирования белка. И еще вопрос, натрий-фосфатный буфер и PBS одно и тоже?

-Ъ-
Постоянный участник
Москва

19.11.2010 10:54

URL #65

(k204781 @ 19.11.2010 01:08)

1. А давайте ваши прописи, лучше одну, обсудим...
2. PBS - это физраствор в фосфатном буфере.
Протокол приготовления:
Р-рить 8 г NaCI, 0,2 г КС1, 1,44 г Na2PO4 и
0,24 г KH2PO4 в 800-900 мл воды, довести
рН до 7,4 НС1. Довести до 1л водой.
Надо ли пересчитывать для 0,5 л?

aszx1237

28.11.2010 14:50

URL #66

Подскажите, пожалуйста, где можно найти в интернете методики по приготовлению буферов, в частности уксусно-аланинового, глицин-NaOH, фосфат-фосфатного.

Заранее благодарен.

aszx1237

28.11.2010 14:51

URL #67

Или может есть пособие какое-нибудь по буферам

guest: ммм
IP-штамп: frQlBxj4iQSg.
гость

28.11.2010 21:46

URL #68

--Или может есть пособие какое-нибудь по буферам
Справочник биохимика доусона почитайте главу про буферные растворы там вначале теория дается, а потом практика. Для начала вам хватит. А так возьмите хороший учебник по аналитической химии там много про буферные системы написано.

mora733

05.04.2012 01:35

URL #69

Извините за такой дилетантский вопрос:

Можно ли заменить фосфатный буфер Соренсена(0,1 М) с рН 7,2 обычным PBS c таким же рН.Нужен для С-бэндинга хромосом.

guest: ммм
IP-штамп: frQlBxj4iQSg.
гость

05.04.2012 07:13

URL #70

Если вы напишите состав обоих буферов рядом в столбик, то сами получите ответ.

По идее можно

Поблагодарили (1): mora733

Вячеслав Б

23.05.2013 14:44

URL #71

Коллеги, ЕЩЕ раз подниму вопрос!
В прописи ТБЕ буфера действительно ошибка, не может там быть 43,84 г!

И, написано, ЭДТА рН 8, а коллега-Ъ- говорит, что натрий ни к чему.

Кто прав? А то я как идиот делал из ЭДТА фри асид соль, добавляя NaOH.

guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость

23.05.2013 16:29

URL #72

1) Вероятно авторы имели ввиду вес не сухого Трилона Б, а необходимый вес 0.5М раствора ЭДТА рН-8.0.

2)можете делать из кислоты, но тогда триса больше сыпать придется или боркиса меньше. Но на самом деле 2-5мМ натрия это такие малозначительные крохи, что можно и не забивать себе голову. А 0.5М ЭДТА рН-8 вещь вообще полезная в хозяйстве.

inessaviv

25.06.2013 19:44

URL #73

Люди,подскажите пожалуйста,где купить трис!В инете не нашла мелкие фасовки,только по 500гр и цена в евро.
Как определить 10ммоль трис-буфера,как высчитывать?Благодарю заранее.Биохимик начинающий,поэтому туговато

inessaviv@gmail.com

R.J. Dio
Постоянный участник

25.06.2013 21:27

URL #74

1) Хеликон
2) молярность по Трису, в чем проблема? Биохимик -то начинающий, а студент-то конченый? Вас не учили? Аналитики не было? Тогда зачем Вам трис, разводите марганцовку в воде, красиво и познавательно

Сообщение было отредактировано R.J. Dio - 25.06.2013 21:28

guest: ммм
IP-штамп: frwHRv5zEzGDY
гость

26.06.2013 15:57

URL #75

--Люди,подскажите пожалуйста,где купить трис!
http://www.vekton.ru/e_sale/?gd=685
Только ч. покупать не рекомендую(хотя для экстрагирующих буферов и он подойдет)
Покупайте осч или имп. последний уточните откуда и какой марки.

--Как определить 10ммоль трис-буфера,как высчитывать?
Пересчитывать надо на молярность триса-основания(мол вес 121)

ASabina

17.09.2013 09:39

URL #76

подскажите пожалуйста! надо приготовиться ПБС рН=7,2, но при этом к нему необходимо добавить 2,25% глицина. возможно ли это сделать и как (на каком этапе). при добавлении глицина рН очень резко падает до 5,9 и повысить ее никак не почается (5Н НаОХ)

-Ъ-
Постоянный участник
Москва

17.09.2013 10:15

URL #77

(ASabina @ 17.09.2013 10:39)

НСI исключите из протокола.
А что за ругательская абр-тура, (5Н НаОХ)?

Сообщение было отредактировано -Ъ- - 17.09.2013 10:27

R.J. Dio
Постоянный участник

17.09.2013 10:37

URL #78

а какой финальный рН должен быть. может, 5.2 как раз что надо?

LMP
Постоянный участник

18.09.2013 11:34

URL #79

(-Ъ- @ 17.09.2013 08:15)

НСI исключите из протокола.
А что за ругательская абр-тура, (5Н НаОХ)?

подозреваю, что это пяти- нормальная щелочь))

kirush

01.10.2013 06:10

URL #80

Нужно приготовить боратный раствор 200мМ борат натрия, 60мМ НаЦл, 1 мМ ЭДТА
как для этого растворить буру?

guest: ммм
IP-штамп: frQlBxj4iQSg.
гость

01.10.2013 09:15

URL #81

Так 200мм борат или тетра борат. В оде растворять, в воде

kirush

01.10.2013 11:17

URL #82

Тетраборат (бура) в воде плавает в виде взвеси и не растворяется. Попробывал в кипятке растворить при охлаждении выпали кристаллы

R.J.Dio
Постоянный участник

01.10.2013 12:47

URL #83

это не страшно, дайте отстояться и пользуйтесь. Все равно потом все на стенках выпадет, на скорость не влияет

Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.

Имя:

Отправка сообщений использует JavaScript операции. В вашем броузере не
установлено/отключено выполнение JavaScript программ. Используйте Netscape Navigator
или Internet Explorer (не ранее 3 версии); убедитесь, что выполнение JavaScript
программ разрешено в настройках вашего броузера.