Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Darling-Kim |
|
vb Постоянный участник |
|
MMM Постоянный участник |
(Darling-Kim @ 09.12.2018 18:51) Пытаюсь выделить ДНК в домашних условиях. В некоторых источниках советуют делать буфер из моющего средства, соли и соды, в других советуют моющее средство, бензин и хлороформ. В чём разница, каков принцип действия, какой вариант лучше? Откуда ДНК то выделяем? (Часом не из яичной скорлупы?) Для чего нам надо ДНК? Что вы потом собираетесь с ней делать? |
Darling-Kim |
(MMM @ 10.12.2018 12:42) Откуда ДНК то выделяем? (Часом не из яичной скорлупы?) Для чего нам надо ДНК? Что вы потом собираетесь с ней делать? Не, чешуя рыбы, для дальнейшего анализа например |
MMM Постоянный участник |
Для получение фаговой библиотеки? Для ПЦР уникальной последовательности? Для электрофореза? Для дот гибридизации? |
MMM Постоянный участник |
(Darling-Kim @ 10.12.2018 13:44) Плохой объект: ДНК мало и извлекается плохо. Вот молока это хороший объект. |
Darling-Kim |
(MMM @ 10.12.2018 14:25) Дальнейший анализ - это очень размытое понятие. Для получение фаговой библиотеки? Для ПЦР уникальной последовательности? Для электрофореза? Для дот гибридизации? Для ПЦР, а именно чешуя рыбы потому, что нужно ещё выделить гуанин |
-Ъ- Постоянный участник Москва |
(Darling-Kim @ 10.12.2018 15:44) Это очень интересно! |
MMM Постоянный участник |
(Darling-Kim @ 10.12.2018 15:44) Может как-то гуанин из чешуи (Кстати, а почему? Его разве там много? По идее вообще не хрена его там нет), а ДНК из молоки. ЭДТА у вас есть? Нужно довольно чистый и в граммах. И какой-то измельчитель чешуи. Кофемолка что-ли ударная. Сообщение было отредактировано MMM - 10.12.2018 16:05 |
Darling-Kim |
(MMM @ 10.12.2018 17:03) ЭДТА у вас есть? Нужно довольно чистый и в граммах. Вопрос заключался именно "в домашних условиях", то, что можно найти на кухне, в аптечке, в гараже и т.д. (MMM @ 10.12.2018 17:03) Кстати, а почему? Его разве там много? А какие ещё есть варианты, ну у хамелеона ещё есть например, только где я его достану |
MMM Постоянный участник |
(Darling-Kim @ 10.12.2018 17:16) Вопрос заключался именно "в домашних условиях", то, что можно найти на кухне, в аптечке, в гараже и т.д. Из чешуи так не получицца!!! Вся ДНК гидролизуется одни обломки останутся короткие - 10-70 нуклеотидов. Никакого ПЦР с них не сделаешь. Кстати, а как вы собирались в домашних условиях осаждать, что либо без центрифуги, особенно когда надо разделять органическую и водную фазу и при этом еще не захватить дебрис(ошметки) исходной ткани. Вы конечно можете купить автомоечный шампунь в нем обычно содержаться аналоги или сам ЭДТА, но в нем обычно еще ооочень много щелочи и силиката натрия. Так что в чистом виде его использовать нельзя. Его надо нейтрализовать. Однако силикат при попытках подкислить раствор выпадет аморфным объемным осадком, который тоже надо отделять от подкисленного шампуня прежде чем использовать, кроме того шампунь содержит, как правило, подкрашиватель, от которого тоже желательно избавиться. Сообщение было отредактировано MMM - 10.12.2018 16:46 |
vb Постоянный участник |
(Darling-Kim @ 10.12.2018 14:16) Вопрос заключался именно "в домашних условиях", то, что можно найти на кухне, в аптечке, в гараже и т.д. А какие ещё есть варианты, ну у хамелеона ещё есть например, только где я его достану Да-да, хлороформ - это прям домашние условия. Домашней некуда. Открываю тумбочку на кухне, ой хлороформ-то я в ашане вчерась купить забыл! примут тебя под белы рученьки, а ты не шали!
|
Vorona Постоянный участник Мурманск |
|
semi Постоянный участник Москва |
Наверное, может подойти. Хотя из чешуи вы выделите бактериальную ДНК в сопоставимых, наверное, количествах с рыбной. Если вообще чего-нибудь выделите...
|
thomaslist Участник |
|
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |