Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Functional Analysis mirna
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 30.06.2007 02:04     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Всем привет.

Помогите советом, кто занимается Functional Analysis mirna
У меня маловато опыта.

как лучше down-reg mirna - экспрессировать anti-mir или просто трансфецировать ингибитором?

Детекция изменения уровня экспрессии mir - RT-PCR.
Детекция изменения уровня эндогенного таргета:
транскрипт - RT-PCR,
белок - Вестерн блот.
Косвенно, предсказанный сайт посадки mirna - Luciferase miRNA Expression Reporter Vector.

спасибо. shuffle.gif

Сообщение было отредактировано solian - 02.07.2007 16:40
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 01.07.2007 10:47     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

(solian @ 30.06.2007 02:04)
Ссылка на исходное сообщение  Всем привет.

Помогите советом кто занимается Фунцтионал Аналысис мирна

как лучше дощн-рег мир - экспрессировать анти-мир или просто трансфецировать ингибитором?

спасибо. shuffle.gif

confused.gif confused.gif confused.gif сначала уроде нужно померить кабы експрессию
а потом кабы решатъ smile.gif
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 01.07.2007 10:51     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

(solian @ 30.06.2007 02:04)
Ссылка на исходное сообщение  Всем привет.

Помогите советом кто занимается Functional Analysis mirna

как лучше down-reg mir - экспрессировать anti-mir или просто трансфецировать ингибитором?

спасибо. shuffle.gif

1: RNA Biol. 2005 Jul 20;2(3) [Epub ahead of print]Click here to read Links
Rational Probe Optimization and Enhanced Detection Strategy for MicroRNAs Using Microarrays.
Goff LA, Yang M, Bowers J, Getts RC, Padgett RW, Hart RP.

W.M. Keck Center for Collaborative Neuroscience, Rutgers University, Piscataway, New Jersey, USA.

MicroRNAs (miRNAs) are post-transcriptional regulators participating in biological processes ranging from differentiation to carcinogenesis. We developed a rational probe design algorithm and a sensitive labelling scheme for optimizing miRNA microarrays. Our microarray contains probes for all validated miRNAs from five species, with the potential for drawing on species conservation to identify novel miRNAs with homologous probes. These methods are useful for high-throughput analysis of micro RNAs from various sources, and allow analysis with limiting quantities of RNA. The system design can also be extended for use on Luminex beads or on 96-well plates in an ELISA-style assay. We optimized hybridization temperatures using sequence variations on 20 of the probes and determined that all probes distinguish wild-type from 2 nt mutations, and most probes distinguish a 1 nt mutation, producing good selectivity between closely-related small RNA sequences. Results of tissue comparisons on our microarrays reveal patterns of hybridization that agree with results from Northern blots and other methods.

PMID: 17114923 [PubMed - as supplied by publisher]

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): solian
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 02.07.2007 16:23     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #4 множественное цитирование

(Guest @ 01.07.2007 13:47)
Ссылка на исходное сообщение  confused.gif  confused.gif  confused.gif сначала уроде нужно померить кабы експрессию
а потом кабы решатъ smile.gif


сначала уроде померили кабы експрессию (array(LC), rt-pcr(TaqMan (Appl))

а потом решили ;-)
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 02.07.2007 17:24     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #5 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 16:23)
Ссылка на исходное сообщение  сначала уроде  померили  кабы експрессию (арраы(ЛЦ), рт-пцр(ТаяМан (Аппл))

а потом решили ;-)

Интересно как ТакМан сработал на микроРНК ? Не поделитесь опытом smile.gif
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 02.07.2007 18:08     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #6 множественное цитирование

(Guest @ 02.07.2007 20:24)
Ссылка на исходное сообщение  Интересно как ТакМан сработал на микроРНК ? Не поделитесь опытом smile.gif


Ребята Вы чего umnik.gif

MicroRNA Assays

Choose from hundreds of real-time PCR-based microRNA assays, listed by the species they interrogate. Controls function across all species.

https://products.appliedbiosystems.com/ab/e...e2&catID=600701

можно конечно параллельное секвенирование
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 02.07.2007 18:26     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #7 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 18:08)
Ссылка на исходное сообщение  Ребята Вы чего  umnik.gif

МицроРНА Ассаыс

Чоосе фром хундредс оф реал-тиме ПЦР-басед мицроРНА ассаыс, листед бы тхе специес тхей интеррогате. Цонтролс фунцтион ацросс алл специес.

хттпс://продуцтс.апплиедбиосыстемс.цом/абе...е2&цатИД=600701

можно конечно параллельное секвенирование

Дк ничего - вот ЕНТО ИМЕННО от АБИ что-то чихает frown.gif
Конкретно - что у вас получается с ЕНТИМИ КИТАМИ ?
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 02.07.2007 18:34     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #8 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 18:08)
Ссылка на исходное сообщение  Ребята Вы чего  umnik.gif

МицроРНА Ассаыс

Чоосе фром хундредс оф реал-тиме ПЦР-басед мицроРНА ассаыс, листед бы тхе специес тхей интеррогате. Цонтролс фунцтион ацросс алл специес.

хттпс://продуцтс.апплиедбиосыстемс.цом/абе...е2&цатИД=600701

можно конечно параллельное секвенирование

после инвитрогена - проверка такманами = "фигфам " -жилище индейца frown.gif
http://www.invitrogen.com/content.cfm?pageid=11249
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 02.07.2007 18:49     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #9 множественное цитирование

(solian @ 30.06.2007 02:04)
Ссылка на исходное сообщение  Всем привет.

Помогите советом, кто занимается Functional Analysis mirna
У меня маловато опыта.

как лучше down-reg mirna - экспрессировать anti-mir или просто трансфецировать ингибитором?

Детекция изменения уровня экспрессии mir - RT-PCR.
Детекция изменения уровня эндогенного таргета:
транскрипт - RT-PCR,
белок - Вестерн блот.
Косвенно, предсказанный сайт посадки mirna - Luciferase miRNA Expression Reporter Vector.

спасибо. shuffle.gif

1: Methods Mol Biol. 2006;342:267-76.Click here to read Links
Identification of messenger RNAs and microRNAs associated with fragile X mental retardation protein.
Duan R, Jin P.

Department of Human Genetics, Emory University School of Medicine, Atlanta, Georgia, USA.

Fragile X syndrome, a common form of inherited mental retardation, is caused by the loss of the Fragile X mental retardation protein (FMRP). FMRP, which may regulate translation in neurons, not only associates with specific messenger RNAs (mRNAs) and with microRNAs (miRNAs), but also associates with the components of the miRNA pathway, including the Dicer and Argonaute proteins. It has been proposed that FMRP regulates the translation of its mRNA targets through miRNAs. In this chapter, we describe the protocol to identify the mRNAs and miRNAs associated with FMRP in vivo. The same method could also be applied to other RNA-binding proteins interacting with specific mRNAs or miRNAs.

PMID: 16957381 [PubMed - indexed for MEDLINE]

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): solian
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 02.07.2007 19:17     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #10 множественное цитирование

(Guest @ 02.07.2007 21:34)
Ссылка на исходное сообщение  после инвитрогена - проверка такманами = "фигфам " -жилище индейца frown.gif
http://www.invitrogen.com/content.cfm?pageid=11249


Вы знаете, та же история

похоже доверять array-ям даже на 60-80% нельзя mad.gif ,

хотя rt-pcr точнее - все равно - "вилами по воде"

вот хочеться функционально подтвердить
в ambione заказали наборы,
еще бы протокол рабочий найти shuffle.gif .
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 02.07.2007 19:20     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #11 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 19:17)
Ссылка на исходное сообщение  Вы знаете, та же история

похоже доверять арраы-ям  даже на 60-80% нельзя  mad.gif ,

хотя рт-пцр точнее - все равно -  "вилами по воде"

вот хочеться функционально подтвердить
в амбионе заказали наборы,
еще бы протокол рабочий найти  shuffle.gif .

confused.gif confused.gif confused.gif ну енто НОРМАЛьНЫЙ реалтайм может
и точнее smile.gif Посмотрите , что АБИ НАИЗОБРЕТАЛИ для микроРНК frown.gif
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 02.07.2007 19:22     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #12 множественное цитирование

(Guest @ 02.07.2007 19:20)
Ссылка на исходное сообщение  confused.gif  confused.gif  confused.gif  ну енто НОРМАЛьНЫЙ реалтайм может
и точнее smile.gif Посмотрите , что АБИ НАИЗОБРЕТАЛИ для микроРНК frown.gif

http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender...95&blobtype=pdf
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 02.07.2007 19:27     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #13 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 19:17)
Ссылка на исходное сообщение  Вы знаете, та же история

похоже доверять арраы-ям  даже на 60-80% нельзя  mad.gif ,

хотя рт-пцр точнее - все равно -  "вилами по воде"

вот хочеться функционально подтвердить
в амбионе заказали наборы,
еще бы протокол рабочий найти  shuffle.gif .

амбион енто кажется АБИ уже - в наборах и протоколы smile.gif
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 02.07.2007 19:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #14 множественное цитирование

(Guest @ 02.07.2007 22:27)
Ссылка на исходное сообщение  амбион енто кажется АБИ уже - в наборах и протоколы smile.gif


и я так думал
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 02.07.2007 20:00     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #15 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 22:48)
Ссылка на исходное сообщение  и я так думал


протокола к ингибиторам (Ambion) небыло

впариваемый АБИ siPORT™ NeoFX™ Transfection Agent брать не стали

есть Lipofectamine +, думаю им и обойдемсъ shuffle.gif
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 02.07.2007 20:07     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #16 множественное цитирование

(Guest @ 02.07.2007 21:49)
Ссылка на исходное сообщение  1: Methods Mol Biol. 2006;342:267-76.Click here to read Links
    Identification of messenger RNAs and microRNAs associated with fragile X mental retardation protein.
    Duan R, Jin P.

    Department of Human Genetics, Emory University School of Medicine, Atlanta, Georgia, USA.

    Fragile X syndrome, a common form of inherited mental retardation, is caused by the loss of the Fragile X mental retardation protein (FMRP). FMRP, which may regulate translation in neurons, not only associates with specific messenger RNAs (mRNAs) and with microRNAs (miRNAs), but also associates with the components of the miRNA pathway, including the Dicer and Argonaute proteins. It has been proposed that FMRP regulates the translation of its mRNA targets through miRNAs. In this chapter, we describe the protocol to identify the mRNAs and miRNAs associated with FMRP in vivo. The same method could also be applied to other RNA-binding proteins interacting with specific mRNAs or miRNAs.

PMID: 16957381 [PubMed - indexed for MEDLINE]






сайт humanapress - нет доступа (((
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 02.07.2007 20:34     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #17 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 20:07)
Ссылка на исходное сообщение  сайт хуманапресс - нет доступа (((

ващето енто книги кается у Хумана Пресс - берется денъги и заказывается
том N .......
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 02.07.2007 20:39     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #18 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 20:07)
Ссылка на исходное сообщение  сайт хуманапресс - нет доступа (((

Значит весь ентот ВолумН .... посвящен микроРНК - смотри Гугл Humana Press

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): solian
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 02.07.2007 21:55     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #19 множественное цитирование

(Guest @ 02.07.2007 23:39)
Ссылка на исходное сообщение  Значит весь ентот ВолумН .... посвящен микроРНК - смотри Гугл Humana Press


MicroRNA Protocols я скачивал с молбиола,

посмотрю,

спасибо, мона там что есть

Сообщение было отредактировано solian - 02.07.2007 21:55
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 02.07.2007 22:34     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #20 множественное цитирование

(Guest @ 02.07.2007 23:39)
Ссылка на исходное сообщение  Значит весь ентот ВолумН .... посвящен микроРНК - смотри Гугл Humana Press


Извините за глупый вопрос:

(если у вас исследование случай-контроль)

Вы сравнивали данные (by такман) - average dCt (=average Ct target - average Ct endo) t-тестом, anova? И какой эндоконтроль Вы использовали (let-7a)?

Спасибо. Денис.

Сообщение было отредактировано solian - 02.07.2007 22:48
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 03.07.2007 08:23     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #21 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 21:55)
Ссылка на исходное сообщение  MicroRNA Protocols я скачивал с молбиола,

посмотрю,

спасибо, мона там что есть

http://www.amazon.com/MicroRNA-Protocols-M...y/dp/1588295818
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 03.07.2007 09:12     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #22 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 22:34)
Ссылка на исходное сообщение  Извините за глупый вопрос:

(если у вас исследование случай-контроль)

Вы  сравнивали данные (by такман) - average dCt (=average Ct target - average Ct endo) t-тестом, anova? И какой  эндоконтроль Вы использовали (let-7a)?

Спасибо. Денис.

http://www.ambion.com/catalog/CatNum.php?30xxx
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 03.07.2007 09:50     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #23 множественное цитирование

(solian @ 02.07.2007 22:34)
Ссылка на исходное сообщение  Извините за глупый вопрос:

(если у вас исследование случай-контроль)

Вы  сравнивали данные (бы такман) - авераге дЦт (=авераге Цт таргет - авераге Цт ендо) т-тестом, анова? И какой  эндоконтроль Вы использовали (лет-7а)?

Спасибо. Денис.

Вообще-то естъ сомнения - а не лучше по "рабочекрестъянски" с СИБРиком frown.gif
http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender...15&blobtype=pdf
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 03.07.2007 17:00     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #24 множественное цитирование

(Guest @ 03.07.2007 11:23)


$119.00 дороговато
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 03.07.2007 17:09     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #25 множественное цитирование

(Guest @ 03.07.2007 12:50)
Ссылка на исходное сообщение  Вообще-то  естъ  сомнения - а не лучше по "рабочекрестъянски" с СИБРиком frown.gif
http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender...15&blobtype=pdf


Я более склоняюсь к TaqManу, хотя и дороговато

Но на форезе спецефичность проверять стоит в любом случае.
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 03.07.2007 17:24     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #26 множественное цитирование

(solian @ 03.07.2007 17:09)
Ссылка на исходное сообщение  Я более склоняюсь к ТаяМану, хотя и дороговато

Но на форезе спецефичность проверять стоит в любом случае.

пока не думал - попробую решить проблему "нормалайзеров"
у инвитрогена "глобалъная нормализация" аррея frown.gif ее в реал-тайм силъно не перекинеш frown.gif
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 03.07.2007 17:45     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #27 множественное цитирование

(Guest @ 03.07.2007 20:24)
Ссылка на исходное сообщение  пока не думал - попробую решить проблему "нормалайзеров"
у инвитрогена "глобалъная нормализация" аррея  frown.gif ее в реал-тайм силъно не перекинеш frown.gif


кстати MicroRNA Protocols можно скачать здесь:

http://rs25.rapidshare.com/files/2392741/3...A_Protocols.rar
пароль на архив: lekar
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 03.07.2007 17:55     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #28 множественное цитирование

(solian @ 03.07.2007 17:45)
Ссылка на исходное сообщение  кстати MicroRNA Protocols можно скачать здесь:

http://rs25.rapidshare.com/files/2392741/3...A_Protocols.rar
пароль на архив: lekar

beer.gif beer.gif beer.gif
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 03.07.2007 17:58     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #29 множественное цитирование

(Guest @ 03.07.2007 20:24)
Ссылка на исходное сообщение  пока не думал - попробую решить проблему "нормалайзеров"
у инвитрогена "глобалъная нормализация" аррея  frown.gif ее в реал-тайм силъно не перекинеш frown.gif


мне тут с эксикона прислали:

http://www.exiqon.com/SEEEMS/10040.asp

Bead-based in solution microRNA expression profiling with the FlexmiR™ microRNA products

мы у них заказываем профайлинг, спросил можно ли прислать малую фракцию рнк, ответили, что у них проблемы с точным определением количества, лучше вроде из известного количества тотал выделять, не нравиться мне все это, в lc это решается без проблем.

тут еще в АБИ закрутили:
Low Density Arrays (384-Well Micro Fluidic Cards)
https://products.appliedbiosystems.com/ab/e...e2&catID=601272

Хотя у меня шеф уверен что, точнее всего паралельное сиквенирование (solexa, 454 ..)

Я думаю можно наормализавать RT-PCR по среднему уровню экспрессии, log 2 или log 10 преобразование - наглядно, )))
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 03.07.2007 18:50     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #30 множественное цитирование

(solian @ 03.07.2007 17:58)
Ссылка на исходное сообщение  мне тут с эксикона прислали:

хттп://щщщ.ехияон.цом/СЕЕЕМС/10040.асп

Беад-басед ин солутион мицроРНА ехпрессион профилинг щитх тхе ФлехмиР™ мицроРНА продуцтс

мы у них заказываем профайлинг, спросил можно ли прислать малую фракцию рнк, ответили, что у них проблемы с точным определением количества, лучше вроде из известного количества тотал выделять, не нравиться мне все это, в лц это решается без проблем.

тут еще в АБИ закрутили:
Лощ Денситы Арраыс (384-Щелл Мицро Флуидиц Цардс)
хттпс://продуцтс.апплиедбиосыстемс.цом/абе...е2&цатИД=601272

Хотя у меня шеф уверен что, точнее всего паралельное сиквенирование (солеха, 454 ..)

Я думаю можно наормализавать РТ-ПЦР по среднему уровню экспрессии, лог 2 или лог 10 преобразование - наглядно, )))



smile.gif Реклама - двигатель торговли smile.gif АБИ тоды БЕЗПЛАТНО кабы АБИ 7900 должныдаритьsmile.gif
А я заказал 48-луночный СтепУван к Миниоптикону - мне много микроРНК не надо -
тока свои - а на аррее их похожо мало наекспрессировалось smile.gif

"454" лучше для ченибудь более полезного smile.gif
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 03.07.2007 20:39     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #31 множественное цитирование

(Guest @ 03.07.2007 21:50)
Ссылка на исходное сообщение  smile.gif Реклама - двигатель торговли smile.gif АБИ тоды БЕЗПЛАТНО кабы АБИ 7900 должныдаритьsmile.gif
А я заказал 48-луночный СтепУван к Миниоптикону - мне много микроРНК не надо -
тока свои - а на аррее их похожо  мало наекспрессировалось smile.gif

"454" лучше для ченибудь более полезного smile.gif


если интересно -
в эксиконе 340 баков - один образец, если два на аррей загружать
у них 15% скидка пока действует.
Участник оффлайн! ghost-ya
Участник



 прочитанное сообщение 03.07.2007 22:43     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #32 множественное цитирование

Чтобы померить количество микроРНК в клетке компания Applied Biosystems предложила использовать праймер для обратной транскрипции в виде шпильки, 3' конец которой комплементарен последовательности микроРНК (шпилька нужна для увеличения длины ДНК, образующейся после ОТ); далее с образовавшейся ДНК проводят qPCR, используя forward праймер, 5' часть которого не комплементарна ДНК, а 3' - комплементарна (чтобы учеличить размер ПЦР продукта); reverse праймер комплементарен последовательности петли шпильки, зонд TaqMan отжигается на стыке последовательности, формирующей шпильку, и последовательности 3'-конца микроРНК, далее стандартная qPCR.
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 03.07.2007 23:40     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #33 множественное цитирование

(ghost_ya @ 04.07.2007 01:43)
Ссылка на исходное сообщение  Чтобы померить количество микроРНК в клетке компания Applied Biosystems предложила использовать праймер для обратной транскрипции в виде шпильки, 3' конец которой комплементарен последовательности микроРНК (шпилька нужна для увеличения  длины ДНК, образующейся после ОТ); далее с образовавшейся ДНК проводят qPCR, используя forward праймер, 5' часть которого не комплементарна ДНК, а 3' - комплементарна (чтобы учеличить размер ПЦР продукта); reverse праймер комплементарен последовательности петли шпильки,  зонд TaqMan отжигается на стыке последовательности, формирующей шпильку, и последовательности 3'-конца микроРНК, далее стандартная qPCR.


Это Вы к чему?
Участник оффлайн! ghost-ya
Участник



 прочитанное сообщение 04.07.2007 06:48     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #34 множественное цитирование

(solian @ 04.07.2007 00:40)
Ссылка на исходное сообщение  Это Вы к чему?

Детекция изменения уровня экспрессии mir
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 09:17     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #35 множественное цитирование

(ghost_ya @ 04.07.2007 06:48)
Ссылка на исходное сообщение  Детекция изменения уровня экспрессии мир

confused.gif confused.gif вы кабы топик почитайте выше за 2 число smile.gif
мп: fr45uHVgO7WZ2
гость



прочитанное сообщение 02.07.2007 19:22 Сообщение для модератора
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей URL #12 множественное цитирование
(Guest @ 02.07.2007 19:20)
Ссылка на исходное сообщение confused.gif confused.gif confused.gif ну енто НОРМАЛьНЫЙ реалтайм может
и точнее smile.gif Посмотрите , что АБИ НАИЗОБРЕТАЛИ для микроРНК frown.gif

http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender...95&blobtype=pdf
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



прочитанное сообщение 02.07.2007 19:27 Сообщение для модератора
Цитировать
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 09:21     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #36 множественное цитирование

(ghost_ya @ 03.07.2007 22:43)
Ссылка на исходное сообщение  Чтобы померить количество микроРНК в клетке компания Апплиед Биосыстемс предложила использовать праймер для обратной транскрипции в виде шпильки, 3ь конец которой комплементарен последовательности микроРНК (шпилька нужна для увеличения  длины ДНК, образующейся после ОТ); далее с образовавшейся ДНК проводят яПЦР, используя форщард праймер, 5ь часть которого не комплементарна ДНК, а 3ь - комплементарна (чтобы учеличить размер ПЦР продукта); реверсе праймер комплементарен последовательности петли шпильки,  зонд ТаяМан отжигается на стыке последовательности, формирующей шпильку, и последовательности 3ь-конца микроРНК, далее стандартная яПЦР.

Ващето "шпилечные праймеры" до АБИ кабы изобрели в России smile.gif
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlere...bmedid=11058144
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 09:54     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #37 множественное цитирование

(ghost_ya @ 03.07.2007 22:43)
Ссылка на исходное сообщение  Чтобы померить количество микроРНК в клетке компания Апплиед Биосыстемс предложила использовать праймер для обратной транскрипции в виде шпильки, 3ь конец которой комплементарен последовательности микроРНК (шпилька нужна для увеличения  длины ДНК, образующейся после ОТ); далее с образовавшейся ДНК проводят яПЦР, используя форщард праймер, 5ь часть которого не комплементарна ДНК, а 3ь - комплементарна (чтобы учеличить размер ПЦР продукта); реверсе праймер комплементарен последовательности петли шпильки,  зонд ТаяМан отжигается на стыке последовательности, формирующей шпильку, и последовательности 3ь-конца микроРНК, далее стандартная яПЦР.

smile.gif болъно ихов АБИ-праймер на енто смахивает smile.gif
http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender...48&blobtype=pdf
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 10:04     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #38 множественное цитирование

(ghost_ya @ 03.07.2007 22:43)
Ссылка на исходное сообщение  Чтобы померить количество микроРНК в клетке компания Апплиед Биосыстемс предложила использовать праймер для обратной транскрипции в виде шпильки, 3ь конец которой комплементарен последовательности микроРНК (шпилька нужна для увеличения  длины ДНК, образующейся после ОТ); далее с образовавшейся ДНК проводят яПЦР, используя форщард праймер, 5ь часть которого не комплементарна ДНК, а 3ь - комплементарна (чтобы учеличить размер ПЦР продукта); реверсе праймер комплементарен последовательности петли шпильки,  зонд ТаяМан отжигается на стыке последовательности, формирующей шпильку, и последовательности 3ь-конца микроРНК, далее стандартная яПЦР.

АБИ нагло стыбзили чужую идею и СТЫДЛИВО НЕ ПРОЦИТИРОВАЛИ smile.gif
при НИЗКОЙ температуре обратной транскрипции - праймер в виде ШПИЛьКИ
при ПЦР - открыт см "Кабоев ОК и др ":лол: lol.gif lol.gif
Ъ
IP-штамп: frNwv0U1khjS.
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 10:57     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #39 множественное цитирование

(Guest @ 04.07.2007 10:04)
Ссылка на исходное сообщение  АБИ нагло стыбзили чужую идею и СТЫДЛИВО НЕ ПРОЦИТИРОВАЛИ smile.gif
при НИЗКОЙ температуре обратной транскрипции - праймер в виде ШПИЛьКИ
при ПЦР - открыт  см "Кабоев ОК  и др ":лол:  lol.gif  lol.gif

Ну все, пошло-поехало. smile.gif Привет. Остановись. Ты лучше посмотри на это ссылку, может пригодится для твоих мирн.
http://www.pentabase.com/Technologies/INAs...68/Default.aspx
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 13:51     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #40 множественное цитирование

(Ъ @ 04.07.2007 10:57)
Ссылка на исходное сообщение  Ну все, пошло-поехало. smile.gif Привет. Остановись. Ты лучше посмотри на это ссылку, может пригодится для твоих мирн.
хттп://щщщ.пентабасе.цом/Течнологиес/ИНАс...68/Дефаулт.аспх

Привет - химики достали smile.gif ПНА,ЛНА, ИНА - скоро углерод на кремний заменют
типа "Кремниевая ДНК" smile.gif
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 13:54     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #41 множественное цитирование

(Ъ @ 04.07.2007 10:57)
Ссылка на исходное сообщение  Ну все, пошло-поехало. smile.gif Привет. Остановись. Ты лучше посмотри на это ссылку, может пригодится для твоих мирн.
хттп://щщщ.пентабасе.цом/Течнологиес/ИНАс...68/Дефаулт.аспх

Лужков ЗАПРЕТИЛ исполъзовать "Генномодифицированную СТРУКТУРУ ДНК " lol.gif lol.gif lol.gif
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 13:59     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #42 множественное цитирование

(Ъ @ 04.07.2007 10:57)
Ссылка на исходное сообщение  Ну все, пошло-поехало. smile.gif Привет. Остановись. Ты лучше посмотри на это ссылку, может пригодится для твоих мирн.
хттп://щщщ.пентабасе.цом/Течнологиес/ИНАс...68/Дефаулт.аспх

"МикроРНК" у меня "левая работа" smile.gif могу и нафиг послать)
Участник оффлайн! solian
Участник
Уфа/Россия



 прочитанное сообщение 04.07.2007 17:09     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #43 множественное цитирование

(Guest @ 04.07.2007 16:59)
Ссылка на исходное сообщение  "МикроРНК" у меня "левая работа" smile.gif могу и нафиг послать)


с ней, если чего накопать, мона прямо в натуру публиковать

модная тема
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 19:33     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #44 множественное цитирование

(solian @ 04.07.2007 17:09)
Ссылка на исходное сообщение  с ней, если чего накопать, мона прямо в натуру публиковать

модная тема

smile.gif ну мине уроде енто не надо - в натуру smile.gif денег не прибавится smile.gif
а методу интересную и дешевую поставить - енто для ДУШИ smile.gif
http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender...60&blobtype=pdf
Ъ
IP-штамп: frNwv0U1khjS.
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 19:40     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #45 множественное цитирование

(Guest @ 04.07.2007 19:33)
Ссылка на исходное сообщение  smile.gif  ну мине уроде енто не надо - в натуру smile.gif денег не прибавится smile.gif
а методу интересную и дешевую поставить - енто для ДУШИ smile.gif
http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender...60&blobtype=pdf

Наш человек! beer.gif beer.gif beer.gif . Нет, из "большого секса" выйте нельзя. Стоит попробовать раз и все - хана lol.gif lol.gif
Guest
IP-штамп: fr45uHVgO7WZ2
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 19:54     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #46 множественное цитирование

(Ъ @ 04.07.2007 19:40)
Ссылка на исходное сообщение  Наш человек! beer.gif  beer.gif  beer.gif . Нет, из "большого секса" выйте нельзя. Стоит попробовать раз и все - хана lol.gif  lol.gif

ты статейку прочитай smile.gif Я енту микроРНК на ЕвуБраун реалтайм уж перикину -
Ну НЕ ЛУБЛУ я ТакМанов lol.gif
Ъ
IP-штамп: frNwv0U1khjS.
гость



 прочитанное сообщение 04.07.2007 20:04     Сообщение для модератора       
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #47 множественное цитирование

(Guest @ 04.07.2007 19:54)
Ссылка на исходное сообщение  ты статейку прочитай smile.gif Я енту микроРНК на ЕвуБраун реалтайм уж перикину -
Ну НЕ ЛУБЛУ я ТакМанов  lol.gif

Благодарю за статью yes.gif Читаю. smile.gif Пока, до завтра.

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 19.03.24 12:13
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft