Rambler's Top100
Лёгкая версия форума* Виртуальная клавиатура  English  
Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы
Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Междисциплинарный биологический онлайн-журналZbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ


Темы за 24 часа  [ Вход* | Регистрация* ]  
   



Форум: 
 

Щёлкните, чтобы внести в Избранные Темы* Выделение ДНК -- Выделение ДНК из растительных объектов --
ИнтерЛабСервис - передовые технологии молекулярной диагностики
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.


 
Добавить сообщение в темуСоздать новую темуСоздать голосование
Участник оффлайн! Анастейша




 прочитанное сообщение 22.09.2017 09:35     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #1 множественное цитирование

Здравствуйте! начала работать в отделе генетики, мы занимаемся пцр-диагностикой!некоторые моменты мне непоняты! подскажите пожалуйста!при начальной этапе при выделении ДНК мы инкубируем пробы на термостате при 65С,почему именно эта температура?и в конце выделения просушиваем пробирки на термостате 50С?на одном из этапов для очистки днк мы используем охлажденный изопропанол,зачем?если мы взяли просто из холодильника,а не из морозилки,что пошло бы хуже?
Участник оффлайн! ksm
Постоянный участник



 прочитанное сообщение 22.09.2017 12:04     Сообщение для модератора         Личное письмо  Отправить e-mail  Web-адрес
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #2 множественное цитирование

Здравствуйте. При 65С (можно и выше делать, но не кипятить) ДНК-связывающие белки отваливаются от ДНК. В принципе можно греть при любой температуре, лишь бы ДНК не денатурировалось. Осадок ДНК можно леофилизировать, сушить вакуумом, либо хорошенько аспирировать спирт и не сушить вовсе, тогда она растворяется лучше (если остатки спирта не вредят). Говорят, что сушка на высокой температуре может снижать способность ДНК в дальнейшем растворяться...
Спирт охлаждают, чтобы быстрее шло высаждение. Т.к. при смешивании с водой идет разогрев смеси. Читал, что при высоком содержании ДНК температура не важна. А при низком - высаждение проводят в морозильнике от часа до суток.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): Анастейша
Участник оффлайн! -Ъ-
Постоянный участник
Москва



 прочитанное сообщение 25.09.2017 12:02     Сообщение для модератора         Личное письмо
Цитировать Поместить сообщение в колонку новостей  URL #3 множественное цитирование

(ksm @ 22.09.2017 13:04)
Ссылка на исходное сообщение  Здравствуйте. При 65С (можно и выше делать, но не кипятить) ДНК-связывающие белки отваливаются от ДНК. В принципе можно греть при любой температуре, лишь бы ДНК не денатурировалось. Осадок ДНК можно леофилизировать, сушить вакуумом, либо хорошенько аспирировать спирт и не сушить вовсе, тогда она растворяется лучше (если остатки спирта не вредят). Говорят, что сушка на высокой температуре может снижать способность ДНК в дальнейшем растворяться...
Спирт охлаждают, чтобы быстрее шло высаждение. Т.к. при смешивании с водой идет разогрев смеси. Читал, что при высоком содержании  ДНК температура не важна. А при низком -  высаждение проводят в морозильнике от часа до суток.

Терпеливо влил, так сказать, удовлетворил дэвушку. smile.gif

Кипячение не всегда помогает избавиться от ДНК-связывающих белков. Протеиназа К или хаотропные агенты.

Всего благодарностей: 1Поблагодарили (1): ksm

*




Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.
Имя:

 преобразовывать смайлики · показать смайлики
Назначение кнопок:

   Поблагодарить автора сообщения — поблагодарить автора
   Удалить сообщение — удалить
   Редактировать сообщение — редактировать
   Поместить сообщение в колонку новостей — поместить в колонку новостей
   Цитировать — цитировать сообщение
   не входит в цитирование/входит в цитирование — цитировать несколько
   Отметить СПАМ-сообщение — обозначить спам
   Сообщение для модератора — связь с модератором
   Участник онлайн!/Участник оффлайн! — автор онлайн/оффлайн
   Фотография — фотография автора

   - остальные обозначения -
 
   *
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема »
Быстрый ответДобавить сообщение в темуСоздать новую тему

Rambler   molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов              

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
Ваш форум  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама  ·  Дата и время: 17.10.17 21:48
Bridged By IpbWiki: Integration Of Invision Power Board and MediaWiki © GlobalSoft