Полная версия страницы  English  

Проблема - Перитонеальные макрофаги

polya, 07.10.2018 21:06
Здравствуйте! Помогите решить следующую задачу.
Занимаемся исследованием активности перитонеальных макрофагов мышей и периодически возникает проблема - клетки получаются очень маленькие, что-то мешает им распластаться.
Макрофаги получаем след. образом: предварительно умерщвленным мышам в перитонеальную полость вводили р-р Хенкса, после "массажа" полученный лаваж смешивали в чашках Петри с 10% FBS и помещали в термостат на 1 час при тем-ре 37
Объект фагоцитоза - дрожжи пекарские (самые обычные из магазина быстродействующие)
После инкубации отмывали чашки NaCl 0,9% и снова вносили р-р Хенкса с дрожжами, и инкубировали еще 1 час при 37
По завершении второй инкубации чашки отмывались NaCl и фиксировались 4% формалином.
Окраска по Романовском-Гимза (1:10, 15 мин.)
Перебрали несколько вариантов : меняли дрожжи, меняли Хенкс на RPMI, меняли NaClна PBS , меняли фиксатор на спиртовую проводку, короче говоря пробуем стараемся, а клетки ведут себя как хотят)
Надеюсь на вашу помощь и очень жду ответа))
Это — лёгкая версия форума. Чтобы попасть на полную, щелкните здесь.
Invision Power Board © 2001-2024 Invision Power Services, Inc.