Методы | molbiol.ru

United States Patent and Trademark Office. Просмотр патентов — один из наиболее надёжных способов поиска информации.
Раздел "Reference works" на сайте Wiley InterScience
1. все известные мне серии "Current Protocols";
2. химические и технические энциклопедии;
3. Scientific and Technical Acronyms, Symbols, and Abbreviations - такой коллекции сокращений я больше нигде не видел /кажется — в свободном доступе/.
Доступ платный, но не всё так плохо. Во-первых, в Москве по рукам бродит CD с полной коллекцией Current Protocols за позапрошлый год. Во вторых, можно попросить нужные тексты на Full Text.
Web-версия Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Joseph Sambrook and David W. Russell (Третье издание "Маниатиса", вышедшее в декабре 2001). О доступе было написано в колонке новостей. В онлайн издании — только протоколы, объясняющего текста нет. По рукам бродит копия онлайн сайта и pdf-вариант всей книги. Спрашивайте на форуме.

Сайты, которые сами держат коллекции протоколов:

Nucleic Acids Research methods — часть журнала, выходящая on-line. Состоит из методических статей. Уровень высокий.

Bio.com — большая коллекция протоколов: bioProtocol. Протоколов действительно очень много. Они разбиты по темам (иногда требуется хорошо подумать, прежде чем, сообразишь, в какой теме искать нужный протокол). Все протоколы прошли стандартную редакторскую обработку.
/ссылку прислал Юрий Мошкин/

Molecular Biology Protocols. Возможность поиска, форум. Ведёт Mark Strom.

iProtocol Massachusetts Institute of Technology. Возможность поиска, форум. Поддерживается сотрудниками MIT.

Коллекции ссылок на протоколы:

Protocol Online-Your Lab's Reference Book. Сайт организован и поддерживается Dr. Long-Cheng Li. Хорошо структурированная коллекция ссылок на протоколы (в основном, различных лабораторий). Тематический форум.
ResearchLink — коллекция протоколов. Поддерживается компанией LabVelocity. Требуется регистрация, которая работает бесплатно в течение 30 дней /потом придётся регистрироваться ещё раз с новым адресом/. В основном это ссылки на протоколы мол. биол. компаний.
The Internet Directory of Molecular Biology and Biotechnology - коллекция большая, однако структурирована слабо. Имеется форум.

-- как прислать био-картинку --

Дополнения, комментарии, вопросы

Люди знающие! Здесь недостаёт того, что знаете вы, но не знал или забыл автор. Этой страницей пользуются ваши коллеги. Пожалуйста, поделитесь с ними опытом. Пригодится всё, что поможет в работе.

Guest /09.06.2005 12:58/

Окраска гликопротеинов по Шиффу с помощью алцианового синего.

Гели фиксируют 30 мин в 12.5%-ной ТХУ, ополаскивают дистиллированной водой и помещают на 50 мин в 1%-ный раствор иодной кислоты (HIO3) в 5%-ной уксусной кислоте. Избыток периодата удаляют, промывая гели несколько раз дистиллированной водой. Затем их погружают на 30 мин в 0,5%-ный раствор метабисульфита натрия, опять промывают дистиллированной водой и помещают в водный раствор, содержащий 0,5% алцианового синего и 3% уксусной кислоты. Через 4 ч фон обесцвечивают 7%-ной уксусной кислотой.

xsana /23.09.2005 15:10/

есть вопросик, народ кто имел счастье работать с красителем Хехста (bis-benzimide)? поделитесь опытом, пожалуйста!

guest: m /24.09.2005 13:22/

(xsana @ 23.09.2005 15:10)

есть вопросик, народ кто имел счастье работать с красителем Хехста (bis-benzimide)? поделитесь опытом, пожалуйста!

Мне приходилось работать. А что Вас конкретно интересует?

abitur /20.11.2005 13:22/

Кто лигирует по тупым концам? Как влияет ПЭГ?

Redactor /20.11.2005 14:27/

(abitur @ 20.11.2005 11:22)

Кто лигирует по тупым концам? Как влияет ПЭГ?

Если фрагменты - то очень хорошо; а если надо прицепить адапторы, то адапторов как не было -- только что обожглись.

Guest /22.11.2005 14:24/

Граждане,
Кто-нибудь работает с DNA methylation? Есть задача посмотреть метилирование промоторов нескольких генов. Кто-нибудь может помочь советом, а лучше протоколом :)))? Предполагается использовать бисульфидный метод.
Заранее благодарю за отзывчивость!
В свою очеледь могу поделиться опытом по методу задержки в геле (ретардация).
pivelena

Regina /02.12.2005 16:36/

Коллеги! поделитесь методикой проверки специфичности фосфотирозиновых антител

Sergey S /20.12.2005 15:22/

Уважаемый редактор,
хотел бы выложить в раздел методику по иммунопреципитации хроматина. Как это можно сделать?
Спасибо.

Redactor /20.12.2005 17:49/

(Sergey S @ 20.12.2005 13:22)

Можно прислать методику на redactor@molbiol.ru
Вам спасибо!

_Dimych_ /11.01.2006 02:14/

Французский сайт форезных причиндалов. Содержит этакий учебник по всяким видам форезов (на аглицком), может быть вполне полезен начинающим, а может и не только. К сожалению, весь текст в виде графики выложен. В какой раздел складывать я не знаю.

http://www.apelex.fr/anglais/applications/cadre.htm ( http://www.apelex.fr/anglais/applications/cadre.htm )

_Dimych_ /11.01.2006 20:59/

На этом сайте довольно много полезной индормации по разнообразным коммерческим ферментам, как то мол.веса, коеффициенты екстинции, оптимумы активности, условия определения активности и прочая фигня.

http://www.worthington-biochem.com/index/manual.html ( http://www.worthington-biochem.com/index/manual.html )

kozlovaolya /02.02.2006 11:38/

Уважаемые коллеги!Поделитесь, пожалуйста, методами определения активности фосфолипазы С в нервной ткани. Заранее благодарна Вам.

comp3v /02.02.2006 13:10/

(_Dimych_ @ 11.01.2006 00:14)

Французский сайт форезных причиндалов. Содержит этакий учебник по всяким видам форезов (на аглицком), может быть вполне полезен начинающим, а может и не только. К сожалению, весь текст в виде графики выложен. В какой раздел складывать я не знаю.
http://www.apelex.fr/anglais/applications/cadre.htm ( http://www.apelex.fr/anglais/applications/cadre.htm )

это есть в нормальном (текстовом) виде на http://nationaldiagnostics.com/articles.php/tPath/1 ( http://nationaldiagnostics.com/articles.php/tPath/1 ).

Guest /08.02.2006 14:01/

коллеги!У кого хорошо получаются пероксидазные конъюгаты? Поделетесь опытом

Guest /12.02.2006 14:35/

Уважаемые коллеги!
Посоветуйте, пожалуйста, что делать, если не получается нормальный сиквенс ПЦР-продукта с автоматического сиквенатора? С самим ПЦР-продуктом всё в порядке (контроль чистый, после очистки на колонках Wizard на форезе видна 1 чёткая полоса соответствующей длины, то, что удаётся прочесть(200-300 нт максимум) соответствует предполагаемой последовательности). С праймерами тоже всё должно быть в порядке, т.к. не так давно с них был отсеквенирован другой продукт и всё было в порядке, читалось по 500-700 нт. Я уже переделывала пару раз продукт - но безрезультатно. Единственное, что могу предположить - может быть при очистке не полностью уходит ЭДТА из ТАЕ буфера и полимераза плохо работает. Может ли влиять на сиквенс, скажем, длина продукта? (Почему-то пока я сиквенировала продукты до 1000нт всё было нормально). Если кто-нибудь даст дельный совет, буду очень благодарна!

анжелла /15.02.2006 10:09/

подскажите методику определения Тх1 и Тх2 :цонфусед:

Redactor /15.02.2006 16:04/

Вообще-то такие вопросы, как выше лучше задавать на форуме в отдельных темах

Olena Bilyk /22.02.2006 23:01/

Могу поделиться опытом по иммуногистохимии. Кто желает пишите
Лена

Guest /03.03.2006 21:41/

Парочка вопросов по белковой химии, имеющих, можно сказать, "жизненно важное" для "дисера" значение:
Люди! Встречал ли кто-нибудь методику экстракции белков бактериального s-слоя, не разрушающую саму клетку (клеточную стенку, внешнюю мембрану и т.д.)?
А также методику отделения полисахаридной части гликопротеина от непосредственно белковой?

Всем, кто поможет - заранее большущее спасибо!

bagant /04.03.2006 00:03/

Коллеги, кто нибудь знает методику приготовления из полиакриламида линейного полиакриламда?

Guest /16.03.2006 17:51/

Коллеги! У меня есть одни вопрос. Есть ли у кого-нибудь протокол хромотографии на протеин G сефароза? Очень нужно.

vesanna /22.03.2006 11:13/

Я больше химик, чем биолог, но так получилось, что работаю теперь с физической биохимией, а методы молекулярной биологии применять нельзя - "чужая" работа и "кормит" других :).
Тематика:полипептиды, полисахариды, вещества средней молекулярной массы, токсины.Обращайтесь vesanna@rambler.ru.
Занимаюсь углеродными гемосорбентами, гемосорбцией.
Если что, буду рада информации по работе с крахмалом, желатином (желатинолем).
Имею много лит. сводок по тематикам.
Подскажите какие маркеры с высокой молекулярной массой Вы знаете?

uzbek /24.03.2006 14:41/

Коллеги! Занимался ли кто нибудь конъюгацией пероксидазы хрена с моноклональными антителами человека для твердофазного ИФА. Поделитесь опытом!

Guest /30.03.2006 19:48/

Скажите пожалуйста, какие скорости при упаковке Bio-Rex 70, нанесении и элюции?

Guest /07.04.2006 16:28/

Люди! Кто гонял пааг рнковые гели, подскажите, почему образцы не входят в гель, а остаются полосочкой в самом начале дорожки? гель 5%, время 1-2 часа, образцы-клеточная РНК из E.coli различной концентрации

Guest /18.04.2006 16:25/

Коллеги! Кто знает что нибудь о камерах для электрослияния при получении гибридом. С ПЭГом че то не прет. Помогите!

Guest /09.05.2006 14:42/

Народ, срочно нужна методический протокол твердофазного иммуноферментного анализа фитогормонов растений.

A Chemist /09.05.2006 18:32/

протокол твердофазного иммуноферментного анализа фитогормонов растений

Не хочу Вас огорчать в День Победы, но, боюсь, тако(й)го нет в природе.

Твердофазный ИФА, как правило, это высокоспецифичный метод анализа, потому для каждого конкретного вещества (например, фитогормона) придется разрабатывать индивидуальный набор: получать антитела, иммунный (аффинный) сорбент, конъюгат фермента с Аг или Ат, а потом оптимизировать протокол.
А если купите набор(ы), то протокол приложат бесплатно.

В общем-то, вопрос Вы задали некорректно. Словосочетание "протокол ИФА" звучит как-то несуразно. Бывает протокол кислотно-основного титрования, определния глюкозы в сыворотке крови, есть даже протокол силанизации стекла, а вот то, что Вы просите... Протокол ИФА - это ведь всегда протокол для конкретного набора реагентов. А в общем виде "где возьмешь?", как говорил сами знаете кто.

Guest /10.05.2006 12:29/

Уважаемые коллеги ! Большая просьба к Вам поделится методическими рекомендациями
по поводу разделения хлорофил-белковых комплексов ФС1 и ФС2 в условиях нативного
электрофореза.

Krystofer /16.05.2006 13:28/

Очень нужна методика по выделению ДНК из фиксированых микропрепаратов

Manukhov /28.05.2006 18:24/

Коллеги! Если кто нибудь знает как очистить ДНК спермы лосося в больших колличествах - поделитесь опытом. Заранее благодарен.

akapi /07.06.2006 17:56/

уважаемые коллеги. кто-нибудь занимался иммунизацией крыс? конкретно меня интересуют протоколы получения неспецифического воспаления у крыс, например, подкожно вводят спирт или хлороформ...кто-нибудь владеет знаниями, я только по наслышке. спасибо за внимание:)

Guest /09.06.2006 10:20/

Для гостя от 9 мая. Мы занимаемся ИФА ИУК ЦК и АБК. Давайте адрес, вышлю протоколы (я так понимаю Вы имели в виду просто последовательность действий). Здесь писать слишком долго.

Guest /27.06.2006 06:18/

pojaluista pomogite
kak ya mogu naiti programmu kolichestvennogo opredeleniya DHA

borand /04.07.2006 11:20/

необходима методика перикисного окисления липидов!!!спасибо.

Guest /05.07.2006 12:23/

А какая конкретно методика? Их дохрена сейчас. Что определять надо?

Guest /05.07.2006 12:24/

Кто-нибудь проводил микродиализ? Очень нужен метод!!!

Guest /06.07.2006 12:01/

Про проточную цитометрию: Срочно надо решить какой цитометр лучше FACSCalibur или EPICS XL. Никто из присустувующих не работал на подобном оборудовании. Знающие люди в отпуске. Help me, pls!!!
Что такое система пробоподготовки и автосемплер?
Можно ли обойтись без них? Насколько это осложнит работу?

Дядя ФАКСер /06.07.2006 12:42/

(Guest @ 06.07.2006 10:01)

Ребята, я работал и с тем- и с тем.
Берите Калибур - ибо у него (несмотря на то, что тоже 4 цвета)- не 1 , а 2 лазера - значит можно шире "играться" с комбинациями флуорохромов.
Сисиема пробоподготовки- то бишь samplre preparation workstation - оддельный дивайс для подготовки семплов. Удобен в клинике при работе со стандартными китами.
Автосемплер- "каруселька"- автоматический загрузчик пробирок ( в XL-MCL например).

P.S. Кстати, на Калибуре и сортить можно (есть там такая опция)- но медленно

P.P.S. А для чего вам цитометр нуже? Под какие задачи? Фундаменталка или клиника?

Guest /07.07.2006 10:00/

(Дядя ФАКСер @ 06.07.2006 12:42)

P.P.S. А для чего вам цитометр нуже? Под какие задачи? Фундаменталка или клиника?

Спасибо огромное!
Цитометр нужен сейчас для фундаментальных исследований (Клеточный цикл, апоптоз, CD-типирование и др.), в перспективе возможны клинические анализы (только перспектива эта очень далекая...

)

Guest /14.07.2006 15:25/

Уважаемые коллеги! Будем ОЧЕНЬ признательны, если кто-нибудь подскажет нам, в чем растворить валиномицин так, чтобы соответствующий растворитель не повлиял на функциональное состояние митохондрий.
Заранее благодарим!

Guest /16.07.2006 16:56/

Уважаемые коллеги!
Кто-нибудь определял жизнеспособность микроводорослей методом дифференциального окрашивания? Поделитесь опытом!!!

С уважение и надеждой,
Ирина :))

alex233 /23.07.2006 00:27/

Насчет микродиализа вопрос хороший .Мы тоже хотим попробовать определять нейротрансмитеры в моозгах. Если кто его делал не мог бы в 2 словах описать методику.Заранее спасибо.

Apis /28.07.2006 20:33/

Коллеги, занимался ли кто из вас анализом ДНК пчел или хотя бы любых других видов насекомых, очень нужна информация. Ответьте.

У нас в институте имеется прибор для тонкокапилярного электрофореза фирмы Агилент технолоджист (Германия). Если у кого есть методики
для разгона фрагментов ДНК на этом приборе -сообщите пожалуйста.

Guest /02.08.2006 10:38/

Добрый день. Подскажите, пожалуйста, кто у нас в стране (какой НИИ) занимается вопросом получения белка (спирта) из нетрадиционного материала (опилки, земля и проч.)

Спасибо,
Илья

Guest /16.08.2006 19:05/

Добрый вечер.Кто-нибудь знает что-либо о моделировании повреждения ДНК окислителями?ПОМОГИТЕ!

matveen /31.08.2006 06:40/

УВАЖАЕМЫЕ КОЛЛЕГИ!помогите пожалуйста, материал о nick-трансляции.Где можно найти? О факторах, которые влияют, возможных ошибках и т.д.Заранее спасибо.

Guest /04.09.2006 18:26/

Народ!! помогите советом!!! а может кто и опытом :-)), пожалуйста!!! как можно определить наличие углевода в комплексе белок-углевод (в данном случае - гиалуроновой кислоты), может есть какая-то специфическая реакция, может окраской ПААГ. буду благодарна за любой совет

lkorochkin /06.09.2006 10:42/

Народ, у кого есть методика по получению культур клеток Drosophila melanogaster поделитесь!

Faiz /06.09.2006 15:02/

Дорогие коллеги! Нужна консультация по наладке метода определения степени метилированности (суммарной) ДНК человека. Заранее благодарен.

Faiz /06.09.2006 15:04/

Дорогие коллеги! Нужна консультация по наладке метода определения степени метилированности суммарной ДНК человека. Заранее благодарен.

Olori /07.09.2006 21:25/

Подскажите, пожалуйста, где посмотреть методику регенерации сефадекса. Заранее спасибо!

Guest /20.09.2006 12:32/

Господа, подскажите пожалуйста. В какие условия и как надо поместить мутант белка с 2-мя заменами на Cys, которые торетически находятся на достаточно близком расстоянии для образования S-S связи, что бы они эту самую связь образовали. Было бы супер если у кого-нибудь есть протокол подобных исследований. Заранее благодарен.

polosatiy /20.09.2006 12:38/

Guest /04.10.2006 10:50/

Что такое "vicroarray analis"

Guest /04.10.2006 11:09/

Простите, конечно, должно быть, что такое Microarray analisis?

Guest /10.10.2006 11:08/

Где можно найти протоколы по выращиванию макрофагов? Начала работать с линией J 774 A.1. Возможно ли клетки обрабатывать не только трипсином, но и неэнзиматическим раствором для диссоциации клеток?
Поделитесь, пожалуйста, своим опытом.

bagant /12.10.2006 12:24/

Уважаемые коллеги, будьте добры, поделитесь методами лиофильной сушки праймеров.

maclaud /16.10.2006 13:22/

коллеги, почему ничего не пишете о IS-PCR. нужны тонкости, помогите пожалуйста!спасибо

Gleb N /20.10.2006 09:29/

Уважаемые коллеги!!!!!!!!! Прошу помочь с методикой приготовления препаратов митотических хромосом Drosopila (из нервных ганглиев личинок)!Нигде не могу найти! Спасибо!

Guest /23.10.2006 21:35/

Други! Помогите с материалом по пожневной или поукосной гречихе. Спасибо. Фарыч!

Guest /30.10.2006 11:29/

Коллеги! Если кто-нибудь из вас делал иммунногистохимическое окрашивание на c-fos, поделитесь, пожалуйста, опытом. В частности, меня интересует, в каких соотношениях смешиваются компоненты из ABC kit. Заранее благодарю.

chepe /31.10.2006 11:42/

Подскажите, пож., методику окрашивания сиалил производных для количественного определения их в растворе. Спасибо!!!

Guest /16.11.2006 12:37/

HELP!
Для сиквенса 16s ставила ПЦР с праймерами f27-r1392 и f530-r1525. Получала толстый фрагмент, но под ним шла паразитная полоска с низкой концентрацией в каждом случае. Элюировала толстую полосу из геля и ставила ре-ПЦР с теми же праймерами и еще с внутренними: с матрицы f27-r1392 ставила с праймерами 40-1392, 357-1392, с матрицы f530-r1525 с праймерами 530-1492. Во всех случаях та же самая история - идет дополнительная полоса. Вряд ли это внутреннее праймирование, но я боюсь, что при сиквенсе будет ерунда. Насколько плачевна моя ситуация? Может, я гоню волну?
Заранее благодарна.

Guest /17.11.2006 16:45/

Народ!!!!! Помогите, пожалуйста!!!!!! Кто-нибудь работал с мРНК вирусных белков ВПГ и ЦМВ??? Поскажите, пожалуйста методику определения. И где можно достать необходимые реактивы!!!!!!!

EfimovRoman /12.12.2006 11:17/

Уважаемые коллеги!
Подскажите пожалуйста, где можно обучиться методам аллозимного и микросателлитного анализа. В случае обучения рассматриваются различные варианты сотрудничества или другие варианты.
Заранее благодарен

Guest /26.12.2006 15:35/

Уважаемые коллеги! Помогите, пожалуйста!!! Пытаемся оценить количество лимфоцитов периферической крови, экспрессирующих Chk2 на проточном цитофлуориметре.Используем первичные антитела к Chk2 и вторичные антитела, меченные FITC (фирмы Becton Dickinson), клетки красим PI. Под микроскопом клетки светятся, киназа тоже. При цитометрии четко заметная популяция FITC-положительных клеток (Chk2)регистрируется только на одной из гистограмм (Count(осьY), FITC (ось Х))- около 17%. Подскажите,пожалуйста, как грамотно составить протоколы измерения и настроить параметры SS, FS,FL1, FL3.

:) /02.01.2007 17:52/

(Гость @ 04.10.2006 10:09)

Простите, конечно, должно быть, что такое Мицроарраы аналисис?

А почему бы не Microarray Analysis ?

http://www.nslij-genetics.org/microarray/ ( http://www.nslij-genetics.org/microarray/ )

Guest /17.01.2007 03:37/

vot site, neplohoy, s raznymi basic methods in various fields of Mol/Cell Biol, i, kazhetsya, nadurnyak:
http://www.molecularstation.com/protocol-links/ ( http://www.molecularstation.com/protocol-links/ )

Guest /17.01.2007 04:05/

i vot yeshe odin classnyi site:
www.google.com
chego napishesh, na vse otvet dast....

Guest /29.01.2007 20:16/

подскажите пожалуйста нингидриновую методику количественного определения альфа-аминного азота.

tohir-v /01.02.2007 18:03/

полдскажите пожалуйста метод выделения микро РНК из растений.

Guest /06.02.2007 13:36/

Гость /16.11.2006 11:37/
HELP!
Для сиквенса 16s ставила ПЦР с праймерами f27-r1392 и f530-r1525. Получала толстый фрагмент, но под ним шла паразитная полоска с низкой концентрацией в каждом случае. Элюировала толстую полосу из геля и ставила ре-ПЦР с теми же праймерами и еще с внутренними: с матрицы f27-r1392 ставила с праймерами 40-1392, 357-1392, с матрицы f530-r1525 с праймерами 530-1492. Во всех случаях та же самая история - идет дополнительная полоса. Вряд ли это внутреннее праймирование, но я боюсь, что при сиквенсе будет ерунда. Насколько плачевна моя ситуация? Может, я гоню волну?
Заранее благодарна.
___________________________________
Попробуйте оптимизировать концентрации праймеров в реакционной смеси.

Guest /06.02.2007 17:26/

Уважаемые коллеги, помогите советом. При определении ПОЛ в мембранах эритроцитов обязательно проводить гемолиз или можно обойтись без него и работать с изотоническим раствором целых эритроцитов. Дело в том, что в одних методиках требуется брать осадок эритроцитов после гемолиза, в других - гемолизат, а в третьих вообще не надо проводить гемолиз. Заранее благодарны.

Guest /12.02.2007 17:11/

Коллеги, нужно подробное описание метода детекции мутаций у дрозофил Мёллер-5 на английском языке. Посодействуйте плиз. Аспирантик у нас из Индии. По русски не сечет, а задача ему, болезному поставлена. Жаль, бедолагу ))

fresl /19.02.2007 08:54/

Подскажите пожалуйста каким способом лучше всего хранить человеческую днк?

PRRSS /19.02.2007 11:06/

Люди,добрые, поможите.
При использовании комерческого набора твердофазного ИФА для определения Ат с адсорбированным в лунках рекомбинантным белком (Е.coli)возможно ли частичное ингибирование реакции при наличии в сыворотке специфических Ат???

guest: ммм /19.02.2007 12:22/

---возможно ли частичное ингибирование реакции при наличии в сыворотке специфических Ат.

Возможно, только наличие или присутствие антител здесь не так важно, просто когда они присутствуют вы можете это ингибирование заметить, если у вас есть независимый метод определения антител. А причина наличие в сыворотке веществ препятствующих связыванию антител с антигеном.

--При использовании комерческого набора твердофазного ИФА для определения Ат с адсорбированным в лунках рекомбинантным белком.

Кстати ИФА конкурентный прямой(не прямой) или простой на связывание (ессно не прямой)

Guest /20.02.2007 14:21/

коллеги, пришлите метод спектрофотометрический определения каталазной активности и условия определения

Guest /07.03.2007 11:39/

А что такое NT (применительно к температуре)? Впервые встречаю такое обозначение!

Guest /16.03.2007 10:38/

Народ помогите кто может, подскажите как определить белок если pH больше 11, а в среде полиэлектролиты (Полистиролсульфонат и полиаллиламин) ????

guest: ммм /18.03.2007 12:37/

---Народ помогите кто может, подскажите как определить белок если pH больше 11, а в среде полиэлектролиты (Полистиролсульфонат и полиаллиламин) ????

Как, как? Во первых может помочь Лоури.
Во вторых избавится надо от этого гафтна, к тому же совершенно непонятно, как это у вас полиамин на полисульфонат не залипает в растворе

Elena- /18.03.2007 21:06/

(lkorochkin @ 06.09.2006 01:42)

Народ, у кого есть методика по получению культур клеток Drosophila melanogaster поделитесь!

У меня есть методика получения культур клеток фибробластов зародыша ципленка. Если попробовать с ее помощю получить культуру клеток из личинок или куколок?

Guest /19.03.2007 18:37/

Сорчно! -(заказываем реактивы быстро-быстро!) нужны флюорометрические методикм определения серо тонина, норадреналина и дофамина. Погдскажите хотя бы ссылки литературные или в нете, где посмотреть.

Cathie22 /20.03.2007 10:02/

(Гость @ 07.03.2007 11:39)

А что такое NT (применительно к температуре)? Впервые встречаю такое обозначение!

Вроде это комнатная температура=normal temperature. Хотя скорее должно быть RT=room temperature

Guest /20.03.2007 14:25/

Большое спасибо, но к сожелению от "гафтна" я избавиться не могуа,а вот полиамин на полисульфонат "залипает" но так и задумано, есть еще метода??? и не страшен ли для Лоури pH 12???

guest: ммм /20.03.2007 18:12/

--определить белок если pH больше 11
---не страшен ли для Лоури pH 12
Следующий вопрос будет про рН 13, Да!?
Вы пропись Лоури читали? Там первый раствор это двухвалентная медь в 0.1М NaOH
рН подозреваю между 12 и 13.

---но к сожелению от "гафтна" я избавиться не могуа,
Какой-то вы "Брюс не всемогущий".
--а вот полиамин на полисульфонат "залипает", но так и задумано.

Дык изче и извращенец, что за ужосные цели у таких экспериментов.

Это же надо, вы наверное наблюдаете копулятивные процессы между полиэлектролитами.

А вообще все это мне напоминает добавление коагулянтов к органическим отходам.

Guest /21.03.2007 11:37/

Почти, Почти, Почти угадал, мы занимаемся инкапсулированием белков в полиэлектролитные микрокапсулы (метод поочередной адсорбции), но такие недюженные знания в коагуляции органических отходов весьма похвальны!!!! Не менее интересны и предложения о копулятивных процессов между полиэлектролитами!!! А вот Лоури в конечном растворе не дает и pH 11.
P.S. Спасибо, я так понял (между рассказами о моих извращенчиских наклонностях) pH 12 для Лоури копейки.

guest: ммм /21.03.2007 14:40/

-- А вот Лоури в конечном растворе не дает и pH 11.

Дык! то в конечном. А в начальном сильная щелочь и она там штатно так что ессли в вашем исходном растворе будет рН 12 то это "копейки"

Вод "гумос" это ваш с Фолиным может осадки нехилые давать так, что рекомендую SDS побольше напихать в пробу, на всякий случай.

Guest /22.03.2007 00:50/

15_01 - это протокол уже неделю не открывается, а мне надо РНКу из вируса выделить:( М.б. кто-нить знает как это лучше всего зделать?

Guest /25.03.2007 15:25/

Нароод. Подскажите где найти методы по работе со стволовыми клетками. В частности регенерации тканей.

Guest /26.03.2007 06:33/

Люди добрые, подскажите, пожалуйста, где найти концентрацию кислорода в нМолях в водных растворах при различных температурах.

Guest /28.03.2007 18:25/

Люди добрые, помогите советом:

пытаюсь получить полную ORF of cDNA (из ЕСТ библиотеки), which is bloody LONG (~5-10 kb)... естесно, есть 3-конец, но 5 не дается: RACE не работает (игрался с температурами ПЦР, нестед праймеры, концентрацией Mg)

Если знаете, можно ли как-нибудь RACE работать заставить, или гиблое дело? Если так, то чего делать? Я думаю, скрининг ЕСТ библиотеки имеющимся фрагментом, в надежде чего поближе к 5-концу получить. Еще идеи?

Спасибо заранее,
Антон

guest: Anton /28.03.2007 18:29/

dpl /30.03.2007 20:10/

помогите пожалуйста!!
Если у кого-то есть методика окрашивания стволовых клеток на щелочную фосфотазу, напишите пожалуйста.

guest: Гость /12.04.2007 20:32/

Люди добрые, помогите, пожалуйста:
кто-нибудь выделял 2-ОГДК в больших количествах? Методику подсказать можете?
Спасибо заранее,
Надя

Guest /12.04.2007 22:52/

Коллеги! Посоветуйте.... никак не могу выделить ДНК из стрекоз из коллекции засушенных, 100-летней и более двности. увеличивал продолжительность лизиса, ничего не выходит..

Guest /16.04.2007 00:11/

Подскажите, пожалуйста, метод ПЦР на колониях дрожжей. Пробовала кипятить в 0,25%SDS+0.05M NaOH и добавлять прямо в смесь ПЦР. Результаты неоднозначные, интенсивность сигнала меняется при повторах. Прямо не знаю, что делать. Спасибо.

С ув. Елена.

Jakov /23.04.2007 07:35/

уважаемые коллеги! подскажите пожалуйста методику обработки РНК ДНКазой!
пример протокола. спасибо.

guest: ммм /23.04.2007 12:59/

-методику обработки РНК ДНКазой!
пример протокола. спасибо.

Вы ишдиваетесь?!

10-20 единиц Кунитца ДНКазы на мг ДНК и Магний 1-2мМ, 2ч на комнате. Все.
Секрет в том, что ДНКаза долджна быть RNAse free, а такую выпускает только Рош, остальные, по их лицензии.

Guest /25.04.2007 10:32/

Глубокоуважаемые коллеги!
Планируем определять содержание внеклеточной ДНК (в тесте с DAPI) в плазме крови грызунов, испытывающих различные воздействия. Подскажите, пожалуйста, каким флуориметром будет удобнее пользоваться (чтобы было дешево и сердито). Пока у нас нет никакого, но есть возможность приобрести. Или стоит приобрести только лампу и фильтры и при необходимости переставлять их на "соседский" прибор?

Guest /27.04.2007 14:14/

уважаемые коллеги и др. кто занимется выделением тотального растительного белка (суммарного,вобщем разных и т.д.)помогите с методикой, последняя надежда на вас люди добрые.....

Guest /17.05.2007 12:43/

Подскажите пожалуйста метод выделения Рнк из растений (для ПЦР)

Guest /21.05.2007 15:40/

подскажите методику выделения суммарного белка из пшеницы (проростков) заранее спасибо

Guest /03.06.2007 12:36/

Народ,не будет ли кто так сказочно любезен подсказать методику выделения мтДНК из дрозофилы.
Заранее many thanks!

ада /27.06.2007 03:21/

привет.
никто не подсукажет как выделять днк из фитофторы?

Guest /03.07.2007 12:33/

Здравствуйте! Не подскажите методы выделения и определения дендритных клеток?

Vilvarin /04.07.2007 01:17/

Здравствуйте уважаемые коллеги! Помогите студентке, то есть мне! Занимаюсь ислледованием клеток крови больных СКВ(системной красной волчанкой) и очень нужна методика выделения гранулярных клеток крови, а именно - нейтрофилов и эозинофилов(авторы не помешают)! Буду весьма признательна!

guest: Гость /11.07.2007 10:53/

Уважаеммые коллеги! Может ли кто-то подсказать методику исследования апоптоза с использованием бромэтидия. Причём разгонка делается не на агарозе! На чём-то жутко дешёвом ( чего нельзя сказать об агарозе!) Слух принёс человек, который абсолютно не шарит в молекулярке. Я же теряюсь в догадках - сама больше по белкам. Если не жалко, можете писать на мыло fyodorova2000@mail.ru.

Guest /18.07.2007 10:35/

Уважаемые коллеги!!! Начимающий биолог, провожу работу в области электрофоретических свойств токсинов, белков, на основе капиллярного электрофореза системы Adgilent 3D CE. Пожалуйста поделитесь информацией. Буду очень признателен и благодарен.
P.S. - Если кто откликнется пожалуйста сообщите адрес куда обратиться. Еще раз спасибо за внимание!

Guest /27.07.2007 17:33/

4 M guanidine thiocyanate, 0.2 M sodium acetate pH 5.0, 25 mM EDTA, 2.5% (w/v) PVP-40 1 М potassium acetate помогите приготовить лизирующий буфер при экстракции РНК загвоздка с ацетатом Na

Guest /12.08.2007 09:01/

Здравствуйте! Я студентка, занимаюсь иммунитетом растений, а конкретнее действием на него дельтаэндотоксина Bacillus thuringiensis. Нужно провести анализ плодов огурца на наличие нитратов. Помогите, пожалуйста, с методикой.
e-mail: aleksa-simonova@mail.ru

Guest /03.09.2007 10:07/

Подскажите пожалуйста! Мне нужно порезать ДНК, как ее можно озвучить, сколько по времени, при каких условиях?

Guest /03.09.2007 10:42/

Если Вам важно "не угробить" белки, то можно озвучить ДНК импульсами по 10-15 сек. на ледяной бане, с перерывами на охлаждение. А какой объем вам нужно "озвучить"? Если это эппендорфф, то суммарное время 60-70 сек. озвучки дадут фрагментацию ДНК около 500-700 пар. Но это очень примерно, т.к. длина фрагментов зависит от конкретных условий (объем раствора, мощность озвучки, концентрация ДНК, форма электрода и даже форма сосуда, в котором "озвучиваете").

Guest /03.09.2007 16:22/

Спасибо,мне именно это и нужно!

Guest /07.09.2007 08:57/

Здравствуйте уважаемые коллеги! Посоветуйте что делать если линейные мыши не дают толком асцит (1-2 мл от силы), да к тому же энтерит страшный. Может пристан токсичный?

Ilina Nadezhda /17.09.2007 09:44/

Уважаемые коллеги! Может у кого-нибудь есть условия проведения FISH в суспензии клеток, чтобы при этом не разрушалась их оболочка.

guest: ммм /17.09.2007 12:06/

Это как? Условия денатурации двухцепопочной ДНК не располагают к сохранению клеточной оболочки.

Ilina Nadezhda /18.09.2007 10:53/

Есть статьи, где умельцы проводят амплификацию ДНК в клетках, потом проводят гибридизацию in situ. Но протоколов нет! Может быть кто-то делал подобное у нас?

guest: ммм /18.09.2007 11:58/

Ну есть, но это не я. В Петергофе у Гагинской почти на поток поставлено. Только оболочки все равно ек.

LLEC /19.09.2007 13:17/

Помогите найти протоколы как красить культуру клеток при помощи пероксидазы и фосфотазы?

SDmitriyV /19.09.2007 16:12/

Всем доброго время суток!
Коллеги, поделитесь плиз методикой по выделению цитоплазматической и митохондриальной фракций белковых лизатов из культуры клеток (состав лиз-х буферов и т.д.) для Western Blot анализа.
Конкретноая задача: Посмотреть в динамике выход цитохрома С из митохондрий в цитоплазму.

Заранее благодарю!

Guest /23.09.2007 19:35/

Люди!!!!!!Спасите!!!!я студентка ММА им Сеченова...нам кое как объяснили титрирование.....в четверг уже контрольный модуль.....у мня есть все эти 13 вариантов....но решается у всей моей группы....тока по 2-3 задания(((((я уже не знаю куда обращаться(((

LLEC /15.10.2007 13:07/

кто нибудь что нибудь о миграции клеток,использование 6ти канальных часберов,хемотаксис

Guest /17.10.2007 00:42/

Коллеги! Поделитесь,пожалуйста, методами экстракции митохондриальных белков из клеток и тканей для Western Blot анализа. Заранее благодарна. e-mail: alina_1000@mail.ru

Guest /23.10.2007 13:53/

Коллеги поделитесь знаниями? или скиньте ссылку!Генотипирование лошадей и КРС???
zorya_85@mail.ru Заранее спасибо!

bioandy /02.11.2007 14:18/

Уважаемые коллеги! Если есть возможность поделитесь пожалуйста методическими публикациями или скиньте ссылку:
Методы трансформации у растений микробомбардированием частицами золота с иммобилизированой ДНК. achaplya@yahoo.com
Зарание благодарен!

Gulmira /15.11.2007 18:56/

Уважаемые коллеги! Подскажите почему у меня ДНК получается короткой, нужна длинная. Буду благодарна.

guest: ммм /15.11.2007 20:09/

-Уважаемые коллеги! Подскажите почему у меня ДНК получается короткой,

потому что вы ее ломаете.
-- нужна длинная. Буду благодарна.
Больше нескольких сотен килобаз получить трудно обычными методами.

Gulmira /22.11.2007 16:49/

Уважаемые коллеги! Поделитесь методикой получения длинной геномной ДНК бактерий. Заранее благодарю.

Guest /22.11.2007 19:06/

Привет всем! У меня тут по работе задача, посмотреть является ли STAT3 транскрипционным фактором нашего гена. Вопрос, существует ли клонированный STAT3 в активированной форме (как это есть для NFkB)? Заранее спасибо

guest: ммм /22.11.2007 19:43/

-- меня тут по работе задача, посмотреть является ли STAT3 транскрипционным фактором нашего гена.

А промотор то от гена у вас есть, попробуйте сделать гипершифт с антителами на STAT3 на последоватьельности вашего промотора. Только антитела должны быть такими чтоб не мешали ДНК связыванию фактора.

Guest /23.11.2007 11:22/

Не, в том то и дело, что промотора мы толком и не знаем. Я посмотрела, вроде как промоторная зона, с которой может связываться STAT3, располагается очень далеко от нашего гена (порядка 40килобаз) и возможно контролирует не только наш ген, но и весь кластер (в нем еще 5 генов). Мне для того-то чистый STAT3 и нужен, чтобы понять, кто от него активируется и где промотор искать

Act /23.11.2007 13:05/

ya student 4 kursa i tema diplomki: poluchenie kratkofragmentnix DNK phosphoamidnim sintezom nukleinovix kislot. podskajite kuda bol`she vsego obrachat` vnimanie, tak kak ya zanimayus sintezom tol`ko 3 nedeli i mne bi xotelos` ne teryat` vremya po prostu. kstati ya ximik.

Guest /23.11.2007 13:40/

ответ ммм: я еще раз посмотрела литературу и посчитала. Вы привы, гипершифт нам подходит( я правда его никогда не делала). Реально ли сделать гипершифт на 12000бп? Потому как я нашла метод на очень короткие участки (100-500бп). Мой план отписиарить весь большой кусок, затем порезать его (например NOT1)и только потом дать транскр.фактор и антитела.

guest: ммм /26.11.2007 21:25/

--Реально ли сделать гипершифт на 12000бп?

Нет конечно, да и бессмысленно. Это же чуть ли не в 100 раз длиннее чем промоторные области.

---Потому как я нашла метод на очень короткие участки (100-500бп). Мой план отписиарить весь большой кусок, затем порезать его (например NOT1)и только потом дать транскр.фактор и антитела.

А вы будете писить 12kb?

В вашем случае возможно имеет смысл использовать хроматин имунопреципитацию.
http://molbiol.ru/protocol/17_19.html ( http://molbiol.ru/protocol/17_19.html )

Вот только как проанализировать результат. Если у вас есть сиквенс этих 12kb, то можно просто с шагом 1000 или 2000b подобрать праймеры вдоль всего фрагмента и попробовать с каждым из отрезков. А вот если сиквенса нет то придется подбирать какие-то вырожденные праймеры под промоторные области. Ну и возможны контаминации при использовании вырожденных праймеров.

guest: ммм /26.11.2007 21:29/

ну и в принципе ChIP ПЦР фрагменте.

Guest /06.12.2007 07:35/

протокол ИФА требуется,плз. если есть можете на этот е-mail: dnar@ngs.ru скинуть

guest: ммм /06.12.2007 10:54/

-протокол ИФА требуется,плз. если есть можете на этот е-mail: dnar@ngs.ru скинуть
какого ИФА сколько антигенов стоолько и протоколов не говоря уже о вариациях в разных фирмах производителях. В разних ферментных метках и тд и тп.

lagumok /09.01.2008 09:38/

Привет всем! не подскажете особенности приготовления поликриламидного геля. какой буфер использовать. просто всегда работала с агорозным. Заранее спасибо

guest: ммм /09.01.2008 15:44/

--Привет всем! не подскажете особенности приготовления поликриламидного геля. какой буфер использовать. просто всегда работала с агорозным. Заранее спасибо.

Какого геля! Для укладки волос? Для разделения ДНК? Для разделения РНК? Для разделения белков?

Вы сайт читать умеете?:
http://molbiol.ru/protocol/11_04.html#s3 ( http://molbiol.ru/protocol/11_04.html#s3 )
http://molbiol.ru/protocol/13_02.html ( http://molbiol.ru/protocol/13_02.html )
http://molbiol.ru/protocol/17_01.html ( http://molbiol.ru/protocol/17_01.html )
http://molbiol.ru/protocol/17_10.html ( http://molbiol.ru/protocol/17_10.html )

Kryshen Kirill /11.01.2008 13:23/

Уважаемые коллеги! Кто-нибудь оценивал фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов. Поделитесь опытом пожалуйста.

Guest /13.02.2008 15:32/

Дорогие коллеги!
Регистрирую генноинженерную субстанцию. Требуют в "определении содержания примесей ДНК штамма-продуцента" расписать методику молекулярной гибридизации подробнейшим образом. Подскажите методику получения денатурированной ДНК из спермы лосося и кстати какой она фирмы. Может есть где-то стандартные протоколы?
Леонова Наталья

Guest /15.02.2008 11:21/

Здравствуйте, коллеги!
Подскажите, пожалуйста, при какой найменьшей концентрации спирта этилового начинается денатурация белка или где эту информацию можно найти. Заранее благодарю

guest: ммм /15.02.2008 16:57/

---Подскажите методику получения денатурированной ДНК из спермы лосося и кстати какой она фирмы. Может есть где-то стандартные протоколы.

--Подскажите методику получения денатурированной ДНК из спермы лосося

Водный раствор(или в ТЕ-буфере) ДНК держать на кипящей водяной бане 5-10'.

--кстати какой она фирмы.

Любой!

--Может есть где-то стандартные протоколы.
В смысле фарм статьи. Тогда ищите в международной фармации.

Если просто методику, то в Маниатисе

http://molbiol.ru/forums/index.php?showtopic=97211 ( http://molbiol.ru/forums/index.php?showtopic=97211 )

guest: ммм /15.02.2008 17:01/

--Здравствуйте, коллеги!
Подскажите, пожалуйста, при какой найменьшей концентрации спирта этилового начинается денатурация белка или где эту информацию можно найти. Заранее благодарю

Все зависит от того что это за белок один он, или в компании других и от температуры раствора.

--или где эту информацию можно найти.

В оригинальных статьях.(База PubMed) По биофизике денатурации или в старых биохимических статьях. По идее с такой информацией должно быть не густо. Но что-то обязательно найдеся.

Тфтьяна /17.02.2008 18:56/

Подскажите пожалуйста методику окраски эндокринных клеток по Гримелиусу и Массона-Гамперга

Guest /19.02.2008 14:27/

guest: Гость /22.02.2008 19:36/

ПОМОГИТЕ!!! PLEASEЕЕЕ!!!! Какой комплекс образует додецилсульфат натрия с белком при электрофорезе???

anna.exe /24.02.2008 04:07/

Коллеги, занимаюсь культурой эндотелиальных клеток. По каким-то причинам клетки при выделении отказываются сползать на коллаген. Подскажите с чем это может быть связано.

Guest /25.02.2008 13:42/

всем привет!кто нибудь знает методы Бредфорда,Сушки и ультрафильтрации хромотографии че-то я тут не нашла

Guest /25.02.2008 19:43/

Уважаемый гость, который че-то здесь не нашел. Что именно вы хотите узнать? Как высушить и проультрафильтровать хроматографию, что ли? Измерение концентрации белка по Брэдфорду - здесь: http://www.molbiol.ru/protocol/17_18.html ( http://www.molbiol.ru/protocol/17_18.html )

PS: В правильно сформулированном вопросе - половина ответа.

PPS: Поиск рулит.

Ig Lebedev /05.03.2008 11:48/

Уважаемые коллеги,
подскажите, пожалуйста, где можно
купить РНК для проточника
RNase A
Type I-AS
кат номер R 5503

Спасибо!

Ербол /27.03.2008 16:49/

Уважаемые коллеги,
подскажите, пожалуйста где достать методику определение константу седиментации вируса

Guest /23.04.2008 22:11/

Дайте, пожалуйста, информацию о храниении и использовании реактивов для ПЦР: что, как и сколько можно размораживать/замораживать и как долго держать в тепле: полимеразу (знаю, что нельзя доставать из морозильника, но если все же приходтся), dNTP, магний, буфер...
Спасибо.

Ъ /24.04.2008 23:05/

(Гость @ 23.04.2008 21:11)

Все зависит от качества исходных компонентов. Чем меньше замор-размор., тем лучше и поэтому нужно максимально АЛИКВОТИРОВАТЬ растворы. А еще лучше вообще не замораживать и держать при 4 град. Я сам обхожусь и без холодильника ...

Grumeza Radu /02.05.2008 01:37/

Checking DNA labeling (dot blots), digoxigenin & biotin

1. Dilute the labeling DNA as follow:
a. 1µl DNA + 19 µk MQ
b. 1µl DNA + 9µl MQ
2. Mark the Hybond N+ membrane with pencil to indicate the position of the DNA probes to be tested. Leave about 1cm between each position. Include a place for 1 X TE as a control
3. Load 1µl of each DNA probe (and 1X TE control) onto membrane
4. Leave to dry for 1h at 80C
5. Place membrane in buffer 1 (0.1 Tris-HCl, 0.15 M NaCl, ph 7.5)
6. Incubate 30 min in buffer 2 (0.5 % blocking reagent in buffer 1), shake gently
7. Drain membrane slightly and distribute 5 ml of the anti-DIG – AP, streptavidin-AP solution over the membrane (1:5000 = 150 mU/ml. 1µl in 5 ml buffer 2)
8. Incubate the membrane at 37C for 30 min
9. Wash the membrane in buffer 1 for 3x5 min
10. Transfer membrane to buffer 3 (0.1 M Tris ph 7.5, 0.1 M NaCl, 0.1 M Mg Cl2) for 2 min
11. Add 22 µl NBT to 5 ml buffer 3 and mix gently
12. Add 16.5 l BCIP to the NBT solution and mix gently
13. Add 5 ml NBT/BCIP detection reagents and leave for 5-10 min. in the dark to fully develop the color
14. Wash the membrane in water and air dry

Dinok /02.05.2008 18:07/

как можно самим приготовить формальдегид?

Крыска /05.05.2008 11:55/

(Dinok @ 02.05.2008 18:07)

как можно самим приготовить формальдегид?

Теоретически можно окислить метанол чем-нить типа оксида железа...
Но не проще ли просто купить

Guest /12.05.2008 13:33/

Люди!!!кто-нибудь выделял липопротеины низкой плотности,дайте намек али ссылку на методику!!пжааааалста!

Guest /12.05.2008 13:44/

{{Elena_ /18.03.2007 20:06/
(lkorochkin @ 06.09.2006 01:42)
У меня есть методика получения культур клеток фибробластов зародыша ципленка.}}}}

Еlena, ты не могла бы прислать эту методику на мой мэйл, пожалуйста, grif-rent@rambler.ru
заранее спасибо.

Guest /03.06.2008 10:10/

подскажите, пожайлуста,состав буфера для проточной цитометрии растительных тканей

taniasm /17.06.2008 16:04/

Скажите, пожалуйста, где достать методику по определению содержания диаминопимелиновой кислоты у актиномицетов. очень надо!

Guest /18.06.2008 11:25/

Glupiy vopros - kolonka 10/30 chto znachit? Spasibo.

Guest /19.06.2008 16:26/

Подскажите, пожалуйста, как собирать и хранить кровь в полевых условиях (в теч. 1-4 недель, заморозка невозможна), для дальнейшего выделения ДНК. Никак не могу найти конкретных методов!

Ъ /19.06.2008 17:52/

(Guest @ 19.06.2008 15:26)

Выбор способа хранения крови в полевых условиях, как ни странно, зависит от предстоящего метода выделения ДНК да и от решаемых задач...

Мне понравилось сушить образцы крови на фильтровальной бумаге (пару часов на воздухе, но не на солцепеке

, и в Зиплок-пакет) и выделять ДНК спокойно в лабе стандартным китом. Бумагу рекомендую предварительно пропитать ЭДТА.

Annika /25.06.2008 17:54/

Доброго времени суток!!
Подскажите, пожалуйста, методу выделения головного нервного ганглия Drosophila melanogaster из куколки (для приготовления препаратов), либо методу приготовления гистологических срезов - если это вообще делают с куколками...
По-идее, нервная система гистолизу не подвергается...

kostroma /02.07.2008 14:02/

Здравствуйте! Подскажите пожалуйста методику приготовления компетентных клеток дрожжей K.lactis для электропорации. Спасибо.

Alelle /08.07.2008 19:45/

Коллеги, подскажите, пожалуйста, методику получения экстрактов РАСТЕНИЙ для опреедления содержания нитритов реактивом Грисса (Sigma). Кто знает, ответьте, будте добры, на alelle@online.ua

Guest /31.07.2008 05:20/

Кто-нибудь определял резус фактор ПЦР-ом, ДНК из хориона?

vetdoctor.80 /21.08.2008 14:13/

Люди помогите с электрофорезо мочи, он у нас не проходит!!!!У нас вет врачей!! Если у кого-нибудь есть данные по этому или книги подскажите где это можно найти!!!! Заренее очень благодарна

Доктор Хаус /21.08.2008 22:18/

(vetdoctor.80 @ 21.08.2008 13:13)

Люди помогите с электрофорезо мочи, он у нас не проходит!!!!

Сробно отрубайте электричество!

Guest /28.08.2008 12:10/

подскажите пожалуйста точную методику очистки асцитной жидкости (или сыворотки)с помощью афинной хроматографии. В наличии есть бром-циан сефароза. Буду благодарен!

guest: ммм /28.08.2008 15:33/

--подскажите пожалуйста точную методику очистки асцитной жидкости (или сыворотки)с помощью афинной хроматографии. В наличии есть бром-циан сефароза. Буду благодарен!

Идите на сайт амершам GE. И скачайте мануалсы на бром-циан сефарозу, и на Hi-Trap белок G. Затем купите этот самый белок G, пришейте его на бром-циан сефарозу(согласно протоколу) и далее используйте протокол для Hi-Trap, но не надо продавливать шприцами, а просто сделать бэч или колонку и промывать(прокапывать). Так вы и получите чистые антитела из асцита, если конечно они того типа, что связываются с белком G. Вместо белка G можно использовать антиген, или антитела против выших моноклонов.

Guest /08.09.2008 09:19/

(Гость @ 03.03.2006 20:41)

ГАГ (гликозаминогликаны) снимаются с белка кора в ПГ (протеогликанах) с помощью бор гидрида.
Если надо могу посмотреть методику.

Apon /23.09.2008 15:04/

Большая просьба подсказать метод определения общего метилирования ДНК!!!

Марина Тихонова /25.09.2008 15:36/

Здравствуйте! Подскажите, пожалуйста, где в интернете можно найти литературу (книги, статьи на русском или английском) по методам изучения клеток. Интересуют общие описания методов. Спасибо.

Арва /09.10.2008 11:58/

здравствуйте! может кто-нибудь поделиться новой методикой определения ингибитора трипсина? Заранее спасибо!

Kosta /20.11.2008 17:37/

А есть где тема про трансфекцию? Протоколы с трансфекциями простые и изестны, но есть много мелких нюансов, которые хотелось бы обсудить.

Yuri K /20.11.2008 19:29/

(Dinok @ 02.05.2008 17:07)

как можно самим приготовить формальдегид?

Paraformaldehyde can be depolymerized to formaldehyde gas by dry heating and to formaldehyde solution by water in the presence of alkali or heat. The very pure formaldehyde solutions obtained in this way are used as a fixative for microscopy and histology.

http://en.wikipedia.org/wiki/Paraformaldehyde ( http://en.wikipedia.org/wiki/Paraformaldehyde )

Yuri K /20.11.2008 19:30/

(Крыска @ 05.05.2008 10:55)

Теоретически можно окислить метанол чем-нить типа оксида железа...
Но не проще ли просто купить

LOL

Guest /22.11.2008 14:56/

Уважаемые коллеги!Может кто-нибудь подскажет,в чем может быть причина того, что при высеве на среду с X-gal и IPTG все штаммы получаются бледно-голубыми и отобрать тот, который может нести вставку практически невозможно. Клонирование проводилось в pUC18.Заранее благодарю!

Guest /25.11.2008 15:58/

Здравствуйте!Не подскажет мне кто-нибудь как определяют длительность стадий клеточного цикла?И вообще может ли это время быть абсолютным(не зависеть от параметров эксперимента)?

Guest /27.11.2008 16:52/

кто нибудь ставил гибридизацию с теломерной ДНК? раскажите условия (Саузерн)

guest: ммм /27.11.2008 20:05/

--кто нибудь ставил гибридизацию с теломерной ДНК? раскажите условия (Саузерн)

Условия стандартные по Маниатису, ничего специального не надо. Если конечно теломер не очень длинный(тогда пульс форез). Ну TRF надо получить( лучше парочкой мелкощепящиих рестриктаз)

иван псоф /27.11.2008 20:41/

Влияет ли конденсат на молярность ?

И стоит ли его "принудительно" стряхивать...
Что-то сомнения замучили..

Guest /03.12.2008 22:20/

у кого-нибудь есть методика полярографии для бактерии?

guest: гость /04.12.2008 12:38/

>Влияет ли конденсат на молярность ?

Однозначно. Если есть конденсат всегда сначала чуток крутануть надо.

Guest /20.12.2008 19:55/

Добрый день!

Прошу подсказать где можно найти информацию о методике получения полностью человеческих моноклональных антител на бактериях/лаб.животных.

Спасибо!

Илья
pirogovkatim@mail.ru

Guest /23.12.2008 21:30/

как определить раствор гликопротеина

Privalov /17.01.2009 17:43/

Здравствуйте!
Буду бесконечно рада любой информации, касающейся определения активности NK клеток и определения содержания внутриклеточных цитокинов методом проточной цитофлуорометрии.
Спасибо!

Guest /22.01.2009 22:04/

Здравствуйте.
Помогите, пожалуйста, найти какую-либо информацию на тему "Выделение генов: синтез комплиментарной ДНК, блот-гибридизация".
Заранее очень благодарна:))

Anjuta /04.02.2009 10:45/

Хотела бы спросить тех кто работал с 3 нитропропионовой кислотой (3NP).
Мне нужно сделать transtympanic injection во внутрь уха мышам, но я не знаю какую концентрацию нужно исползовать, посколько в больших дозах и концентрации 3NP токсичен?

Заранее спасибо

Guest /05.02.2009 20:01/

прикольно тутаааа)))))))))0

guest: Маська /05.02.2009 20:04/

а кто-нибудь знает про вирус герпеса человека 6-го типа?если у кого че завалялось,то ПОЖАЛУЙСТА,пришлите это сюда-korolevka-mur@mail.ru/vyt bynthtcyf?d xfcnyjcnb lbfuyjcnbrf///

konst07 /07.02.2009 04:12/

этот герпес просто шестерка

RJ Dio /07.02.2009 22:42/

(Гость @ 22.11.2008 14:56)

так не бывает, у Вас что-то с реактивами. Все стандартные штаммы типа XL1, DH5 alpha, HB, Sure, JM и прочее вполне годны для бело-голубой селекции. Надо по очереди сменить все реактивы. А может, вы сильно в горячий агар льете X-gal, он у Вас валится? Или исходно того-с? Смените прежде всего его, родимого

Ethidium /10.02.2009 14:58/

Привет всем!
Огромная просьба: подскажите пожалуйста метод оценки пролиферационной активности пула клеток семенников (для ленейных мышей). Заранее спасибо.

Guest /11.02.2009 09:01/

Коллеги здравствуйте! Не подскажете методики синтеза коньюгатов антибиотиков (для иммунизации)

Guest /27.02.2009 12:33/

Доброго времени суток! Был бы очень благодарен, если бы кто-нибудь поделился методикой приготовления конъюгатов моноклональных антител с фикоэритрином. Заранее спасибо!

Guest /27.02.2009 14:03/

Уважаемые коллеги, помогите определиться по следующим вопросам: задача такая - выделение белка из крови( белок низкомолекулярный с мембраной не связанный, индуцибельный т.е. в клетках его мало - репаративный фермент АГТ) из культуры клеток его мы выделяем и протокол имеется - по отработанной методике для детекции на вестерне клеток для выделения белка нужно не менее 10 млн а можно и больше
вопросы у маня такие
- сколько примерно мл крови нужно взять что бы выделить этот белок? достаточно ли 10 мл?
- гепаринизация крови - подскажите или "ткните носом" в протокол сколько гепарина на мл крови
- и осаждение феколом - тут вообще у меня опыта нет - сколько фекола, какие условия - если подкините методику или ссылкку на таковую буду крайне признательна
Заранее спасибо за советы , подсказки и Ваши соображения

Guest /16.03.2009 08:12/

Гостю, который спрашивал про гепарин.
Мы добавляли 40 мкл аптечного на 10 мл крови, а вообще есть вакутайнеры с гепарином - с зеленой крышечкой. Фиколл готовится из двух компонентов - собственно фиколла и урографина или верографина, плотность полученного растворчика д.б.1.077. Наливаете в пробирку фиколл (3 мл), а сверху НАСЛАИВАЕТЕ (чтоб не смешалось) 5-6 мл крови (иногда кровь разводят средой, но по мне так это дело вкуса) и на центрифужку - 1500 оборотов, 20 -30 минут (лучше попробовать сначала меньшее время, чтобы все нужное не попадало). Достаете из центрифуги и видите - над столбиком осевших эритроцитов и гранулоцитов желтоватый слой фиколла, потом белое кольцо клеток и слой плазмы. Осторожно собираете белый слой -это и есть клетки. Отмойте их обязательно не меньше 2 раз, поскольку фиколл токсичен. Удачи!!

Privalov /22.03.2009 22:53/

Доброго времени суток! Уважаемые коллеги, помогите, пожалуйста решить следующую задачу - растворить нитросиний тетразолий (методика изучения ферментативной активности гранулоцитов). Растворяю в ПБС, на 1 мг НСТ беру 1 мл ПБС. Растворяется плохо, даже если нагреть раствор до 60-70 градусов (по методике). Что же делать? Может быть, истек срок годности вещества?

guest: ммм /24.03.2009 19:20/

--Растворяю в ПБС, на 1 мг НСТ беру 1 мл ПБС. Растворяется плохо, даже если нагреть раствор до 60-70 градусов (по методике). Что же делать? Может быть, истек срок годности вещества?

Попробуйте сначала растворить соль в 70% ДМФА, а потом уже в ПБС

Guest /01.04.2009 07:36/

методы получения моноклональных антитель для животных

Guest /01.04.2009 07:36/

методы получения моноклональных антител для животных

Umo4ka /02.04.2009 10:21/

Уважаемые коллеги, подскажите,пожалуйста,как оптимально снять с поверхности зубной эмали биопленку,чтобы оценить потом белковый состав. ТО есть сняться должно по возможности все, что "село" во рту, и полученный раствор должен быть пригоден для фореза. Проблема в том, что площадь исследуемой поверхности - мах.1кв.см,да еще и общий белок надо бы знать до фореза.Вот ивыходит - с гулькин чих на все-про все. Как бы изловчиться? Ищем лизоцим, лактоферрин, муцин, амилазу иеще много чего.
Спасибо!

guest: ммм /02.04.2009 11:13/

Эк вас занесло. Для начало определитесь что есть биопленка, где кончается пленка и начинается эмаль. А потом можно поразмышлять. А так дайте больному рат пополоскать рот содой питьевой, да в этом растворе потом щеткой зубной зубы почистить да все сплюнуть и анализируйте до посинения.

Umo4ka /02.04.2009 12:03/

Определяюсь. Биопленка-это свободный от бактерий слой из белков, гликопротеинов, углеводов и липидов, формирующийся непосредственно на поверхрности эмали в норме ивыполняющий роль смазки, защиты от эрозии, депо ионов и реминерализации. Сверху биопленки формируется бляшка- ну уже зловредная, с бактериями и пр.Но сейчас меня интересуют первые 3 минуты формирования биопленки, поэтому слой будет базальный. Больных, слав Богу нет, зубычистить некому, а кусочек зуба 5х5х1 мм на соответствующем носителе будет помещен зашеку на 3 мин. Вот с этим кусочком мне потом и играться....
А механически не хочетсяиз-зипотерь. Ну разве что резиновым шпателем, как при сборе клеток. Так там сначала трипсин... Попробовать и мне трипсином что-ли?
А если сплюнуть, кстати, то анализировать действительно можнодо посинения. Идеякакраз в том,что в разныхртахразное "садится" на зуб,хотя в слюне всепримерно одинаково. Так что "сплюн" меня как раз не интересует! Вернее интересует, но отдельно от пленки.

guest: ммм /02.04.2009 14:11/

-это свободный от бактерий слой
Не выполнимое требование.
--Больных, слав Богу нет, зубычистить некому, а кусочек зуба 5х5х1 мм на соответствующем носителе будет помещен зашеку на 3 мин. Вот с этим кусочком мне потом и играться....

Гы-гу га.

Ну покипятите "Зуб" в 1%SDS может это вам поможет.

Umo4ka /06.04.2009 16:36/

Спасибо!

vvv2509 /26.10.2009 13:40/

Уважаемые коллеги, подскажите как синтезировать siRNA, может кто-то работал в этом направлении или у кого-то есть протоколы. Буду очень признательна!

Privalov /20.01.2010 00:45/

Уважаемые коллеги, буду крайне признателен, если кто-нибудь отзовется!!
Кто-нибудь работал над определением количества клеток, продуцирующих цитокины с помощью проточно
Вся загвоздка в брефелдине-моненсине, добавляемого для блокировки транспорта цитокинов через мембрану.
Вопрос - как разводить вещества (куплены в Сигме, сухие, инструкции НЕ прилагаются)???

Privalov /20.01.2010 00:49/

Уважаемые коллеги!
Буду крайне признателен, если отзоветесь!!!
Кто-нибудь работал с определением клеток, продуцирующих цитокины на проточном цитометре?
Вся загвоздка в брефелдине-моненсине, блокирующих транспорт цитокинов через мембрану. Есть сухие, куплены в Сигме, инструкции НЕ прилагаются.
Вопрос - КАК их разводить??? В чем??? Какие стоковые растворы???
Поделитесь, пожалуйста, информацией!!!

Apis /20.01.2010 15:45/

Здравствуйте.
Кто-нибудь проводил выделение ДНК из пчел и ее микросателлитный анализ?

guest: ммм /22.01.2010 16:26/

-Здравствуйте.
Кто-нибудь проводил выделение ДНК из пчел и ее микросателлитный анализ?

Думаю кто-нибудь.... Да.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?d...$=activity ( http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?db=pubmed&cmd=DetailsSearch&term=Bee+DNA+microsatellite&log$=activity )

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?d...$=activity ( http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?db=pubmed&cmd=DetailsSearch&term=Bee+AND+%22microsatellite+DNA%22&log$=activity )

--- страница форума с комментариями --

Дата последней модификации: 02/10/06

ZBIO

Синтол · Millipore · Диаэм · Axygen · ДНК-синтез · БиоЛайн · Beckman Coulter · Хеликон · Химмед · Биосан · Merck KGaA · Waters · Elite-Genetix

ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · ILLUMINA SEQUENCING · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ИСТОРИЯ ЗООМУЗЕЯ · ИЗДАТЕЛЬСТВО КМК

Сотовые телефоны и аксессуары к ним на SotMarket.ru · Горобзор Уфы

molbiol.ru · redactor@molbiol.ru · реклама