Главная страница MolBiol.ru > Методы > Разное > Процент включения Rambler's Top100
ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

Определение процента включения

Преципитацию 10% ТХУ можно использовать для определения процента включения практически для любого вида мечения (для олигонуклеотидов от 10b).

    Преципитация 10% ТХУ

    Устройство для промывки GFC-фильтриков
  1. перенести совсем небольшое количество материала реакции на маленький (~3х3mm2) GFC-фильтрик (только обмакнуть желтый типчик и перенести на фильтр то, что задержалось на стенках типа);
  2. просчитать на ручном счетчике (лучше подобрать такое положение счетчика, чтобы стрелка отклонялась на полную шкалу);
  3. поместить фильтрик на вакуумную промывалку и промыть ~0.5ml 10%ТХУ;
  4. просчитать на ручном счетчике (положение счетчика как в п.2).


  5. Непроверенная информация Хроматография (для большого числа образцов)

  6. нанести 0.5-1.0µl образца на Whatman 3MM бумагу, подсушить;
  7. 20' хроматография в
  8. 3.5M (NH4)2SO4
    75mM NaPO4(pH 6.8)
    2% n-propanol;

  9. свободные нуклеотиды оказываются в верхней части бумаги. Олигонуклеотиды (>5b) и длинная DNA остаются в местах нанесения.


MolBiol.ru: http://molbiol.ru
e-mail: redactor@molbiol.ru
просмотров: 9921


    Комментарии

    По пунктам

    п. 3.

  • 10% ТХУ преципитирует длинные молекулы DNA на стеклянном фильтре, но оставляет в растворе dNTP.
  • Непроверенная информация Вместо 10% ТХУ можно использовать (1M HCl, 0.1M Sodium pyrophosphate).
  • п. 6.

  • Другой тип хроматографии: на Hybond-N+, хромотография в (1.5N NaCl, 0.4N NaOH).

    Дополнения, комментарии, вопросы





       


Смотри также:
/ссылки на сетевые ресурсы/


Дата последней модификации: 30/07/13

ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

molbiol.ru  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама

molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов   Rambler