![]() | |
![]() | |
|
![]() |
ГЛАВНАЯ ·
ПРОЕКТ ·
СПРАВОЧНИК ·
МЕТОДЫ ·
РАСТВОРЫ ·
РАСЧЁТЫ ·
ЛИТЕРАТУРА ·
ЗАДАЧИ ·
ФИРМЫ · ![]()
Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
|
![]() |
![]() |
|||
Определение концентрации белка на 3ММ
![]() качественная оценка в ряде образцов: нанести ряд образцов (по ~1µl); количественное измерение: нанести 2х разведения измеряемого белка (по 1µl);
Дополнительно, смотри замечания к "Окрашивание белковых гелей Coomassie brilliant blue R250." п. 1. п. 2 п. 3, 4. Дополнения, комментарии, вопросы Гость /29.03.2006 11:23/
Здравствуйте. Можно узнать поподробнее, что-такое ЗММ бумага? Заинтересовался методом потому, что до этого определял белок по Брэдфорду - попотеть пришлось. Образцов обычно много, вот и думаю, что может на этот метод перейти. Тем более что слишком точная концентрация мне не нужна. Павел /29.03.2006 11:37/
ватман такой. Гость /29.03.2006 11:52/
Просто ватман, или какой-то специальный, который предназначен именно для этих целей? И если не трудно, можно ли узнать поподробнее про способ нанесения образцов на этот самый ватман. Re /29.03.2006 14:11/
Плотная фильтровальная бумага. Наносить каплей из носика автоматической пипетки. Удобнее - держать на столе на белом фоне иммунологическую плашку с раскапанным раствором по Брэдфорду и капать с колонки аликвот в ячейку. Чем больше белка, тем синее. Соотношение объемов краска/белок подбирается эмпирически. ммм /29.03.2006 15:55/
На самом деле любая фильтровашка, промокашка, салфетка и даже подтирка. Лишь бы воду впытывала номально. ---Удобнее - держать на столе на белом фоне иммунологическую плашку с раскапанным раствором по Брэдфорду и капать с колонки аликвот в ячейку Удобнее, но промокашка незаменима, если в растворе с белком содержатся вещества мешающие определению по Брэдфород, например меркаптоэтанол. Гость /10.04.2006 08:07/
Скажите, а не кто не пробовал определить концентрацию белка в спектрофотометре прогнав там эту самую иммунологическую плашку? Ведь, в принципе, можно же установив длину волны 595, раскапать белковый преперат, покрасить Кумасси и прогнать? Просто, как вспомню как я этот белок определял (20-25 образцов, да несколько повторов). Гость /10.04.2006 08:12/
Кстати, а ведь, наверное, можно подобным образом и концентрацию хлорофилла определять? Но это при условии, что в лаборатории есть АИФ. Кто что по этому поводу думает? Гость /10.04.2006 10:26/
Пардон, народ, за наивные предположения. Во всем разобрался. К сожалению, на нашем АИФе невозможно промерить белок и хлорофилл потому, что измерения при длинах волн 595, 665 и 649 не предусмотрены. Жаль. ммм /10.04.2006 12:12/
Ну вы блин даете все так делают. В плашках. Ну и что. Arc /12.04.2006 12:29/
а еще проще- накапать белок на нитроцеллюлозу и покразить Amido Black, естественно, с калиброванным контролем типа BSA. +/- 1,5 раза концентрацию даст точно- с той же погрешностью, что и Кумасси по Брэдфоорд, ибо принцип окрашивания тот же Гость /30.11.2006 15:54/
Метода Брэдфорд - ацтой! BCA rulez! ASolov /01.12.2006 11:37/
Guest /24.11.2009 13:03/
здравствуйте! подскажите, пожалуйста хочу покрасить мембрану после переноса, проверить как перенеслись белки с геля(12,5% PAAG). есть кумасси раствор,которым крашу гель, технология такая же? отмывать потом мембрану также 10% уксусной? Andrew /24.11.2009 13:31/
Окрашивать нужно пунцовым С, как описано здесь: Вера /24.11.2009 13:54/
(Гость @ 29.03.2006 09:52) ![]() Бумага любая, лишь бы впитывала и не расползалась при отмывке (фильтровалка не очень годится). Носиком в предварительно обозначенные карандашом точки- 2-3 мкл из соответствующей пробирки. Хорошо высушить (обязательно!) Окунуть на несколько секунд в стардартный раствор Кумасси R250 для окрашивания белковых ПААГ. Промывать под сильной струей ХОЛОДНОЙ воды до исчезновения синего фона. Остаются синие пятна соответствующей интенсивности на голубоватом фоне. (После просущивания становится видно хуже, лучше смотреть мокрую после отмывки). watchesbiz /25.12.2021 19:15/
|
Смотри также: /ссылки на сетевые ресурсы/
|
![]() |
![]() |
ГЛАВНАЯ ·
ПРОЕКТ ·
СПРАВОЧНИК ·
МЕТОДЫ ·
РАСТВОРЫ ·
РАСЧЁТЫ ·
ЛИТЕРАТУРА ·
ЗАДАЧИ ·
ФИРМЫ · ![]()
Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
|