Главная страница MolBiol.ru > Методы > Макро-методы > Использование Hydra Rambler's Top100
ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

Работа с Hydra

 

    По поводу работы с Hydra

  • После каждого использования шприцы нужно промыть и заполнить водой.
  • Поршень притёрт очень плотно - закупоренный шприц может лопнуть.
  • Иглы не должны контактировать с дном плашек.
  • Предназначена только для растворов (не для суспензий: кровь и т.п.)
  • Электроника чувствительна к колебаниям в сети: лучше не подключать вместе с мощными или циклически действующими приборами.
  • Перед использованием программы требуется "прощелкать" программу до конца (дисплей показывает D или А).


  • Промывка по ходу работы

    После 10-15 плашек пузырек в верхней части шприца становится нестабильным: разрывается и выбрасывается шприцем. Замена этого пузырька на воду приводит к:

    а) разбавлению образца;
    б) медленной отмывке.

    Избавиться не так просто:

  1. промыть (на 290µl) раствором 0.2-0.5% SDS (1-2 раза по 3 Wash);
  2. 1 раз (3 Wash) сполоснуть водой (290µl);
  3. промыть малым объемом (50µl) 50% EtOH (только для того, чтобы заменить застрявшую в иглах жидкость на спиртовой раствор);
  4. EMPTY (промакнуть иглы);
  5. WASH (50µl) без ванны, чтобы вытряхнуть остатки жидкости, ещё раз промакнуть иглы;
  6. AIR GAP 50µl; затем заполнить оставшийся объем шприцов водой в режиме AIR GAP подняв ванночку руками;
  7. оставить в таком положении на 5-10';
  8. EMPTY;
  9. Промыть H2O.


  10. Перенесение PCR продуктов в щелочь

    Progr. 10 11
    Mode DIS ASP
    DH 3030 2820
    FV 290 15
    FH 4800 3030
    EH 4800 4800
    WV 50 20
    WASH 2 3
    WH 4800 3030


    Предварительно

  11. подписать PS плашки; разморозить ABT-плашки (может быть придется ЦФ);
  12. вначале заполнять плашки 1N NaOH;
  13. затем - перенос PCR продуктов.


  14. Перенос NaOH

  15. progr. 10;
  16. ванна с 1N NaOH /Fill/;
  17. установить PS плашку;
  18. DISP; менять позицию, заполнить 4 плашки;
  19. ванна NaOH - Empty, Fill.
  20. Заполнять щелочью плашки "по немногу", индивидуально завернуть, перенести в холодную комнату, выложить в один слой. Главная проблема с предварительно заполненными плашками – подсыхание, особенно по углам.


    Перенос PCR-продуктов

  21. progr.11;
  22. установить ABT-плашку;
  23. переставить позицию;
  24. ASPIRATE;
  25. снять ABT-плашку, заменить на PS-плашку;
  26. WASH;
  27. снять PS, установить ванну с H2O;
  28. progr. 10, прощелкать;
  29. WASH;
  30. заменить ванну на свежую (повторить 4 раза пп. 25, 26);
  31. progr. 11, прощелкать.


MolBiol.ru: http://molbiol.ru
e-mail: redactor@molbiol.ru
просмотров: 8968

    Дополнения, комментарии, вопросы





       


Смотри также:
/ссылки на сетевые ресурсы/


Дата последней модификации: 30/07/13

ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

molbiol.ru  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама

molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов   Rambler