Главная страница MolBiol.ru > Растворы > Обучение > Базовые правила Rambler's Top100
ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

Приготовление растворов

Общий сток реактивов — уязвимое место нашей (да и любой другой) группы. Успех работы во многом зависит от того, насколько аккуратно все обращаются с этими реактивами. Небрежность в этом вопросе абсолютно недопустима и нетерпима, так как она бьёт по работе всех.

    Правила работы с общими реактивами

  • То, что высыпано из стоковой банки назад не попадает ни при каких условиях.
  • Из стоковой банки можно отсыпать либо в чистую ёмкость, либо в ёмкость, предназначенную только для того же реактива.
    Если нужно отсыпать реактив кому то, кто не входит в нашу группу, то отсыпать должны вы сами (посуду можно попросить принести того, кому этот реактив нужен).
  • Чем можно лазить внутрь общей банки? Очень сложный вопрос. В некоторых лабораториях декларирован очень простой ответ - ничем. На наш взгляд, это, конечно, самое лучшее решение, но практически не (или очень трудно) осуществимое. Поэтому, мы попробуем дать хоть и более сложный, но реально работающий ответ:
    Хотя реактивов в шкафу (и холодильнике) очень много, в вашей реальной работе их используется вполне умеренное количество (десятка полтора, не больше). Вполне можно (и нужно) спросить о допустимой с данным реактивом чистоте работы у ваших старших коллег (и записать ответ - по крайней мере, поначалу). Спрашивать приходится вовсе не потому, что они умные, а вы - глупый, а потому, что они имеют представление о том, для каких ещё работ используется данная банка, а значит и о том, какая аккуратность работы будет разумной.
    Что применяется для того, чтобы лазить в банки?
  • * чистый (а часто и простерилизованный) металлический или пластиковый шпатель;
    * чистая стеклянная или пластиковая пипетка;
    * в некоторых банках можно оставлять пластиковые шпатели, которые затем можно держать чистым пинцетом;
    * подправлять при высыпании (у самой горловины) можно (и удобно) новым синим типом, одетым на ручку/карандаш (но не на автоматическую пипетку!).

  • Общие стоковые растворы:
  • SDS 10%;
    SSC 20x;
    TAE 50x;
    TBE 10x;

    Денатурирующий раствор;
    Нейтрализующий раствор.

  • Так же как и с сухими реактивами - всё, что отливается из стоковых банок никогда не заливается обратно. В стоковые банки нельзя "лазить" градуированными или автоматическими пипетками. Из них можно только отливать (но не касаясь краем) в ваши собственные "стоковые" банки/пробирки.


  • Приготовление растворов

  • Очень аккуратно работайте с реактивами и стоковыми растворами. Та работа, которую вы выполняете в данный момент не последняя в вашей жизни и в жизни ваших коллег. Поверьте – следующие проекты будут важнее.
  • Никогда не трогайте без спроса чужие реактивы (как и вообще - чужие вещи), а по возможности, вообще не пользуйтесь чужими реактивами.
  • Если приходится использовать чужой (общественный) реактив или раствор, немедленно возвращайте сток владельцу отсыпав (отлив) небольшую аликвоту.
  • Никому не позволяйте трогать собственные реактивы. Отливайте и отсыпайте сами, лень в этом вопросе может обойтись очень дорого.
  • Готовьте буферные растворы лишь с небольшим избытком. Растворы гораздо менее стабильны, чем составляющие их компоненты. Вы рискуете получить через месяц раствор, который нельзя использовать. Особенно опасно готовить большие объемы буферов для новых методик. Возможно, что вы будете в конце концов использовать какую-нибудь модификацию метода, для которой приготовленный запас буфера вообще не подходит.
  • Удобнее планировать работу так, чтобы готовить сразу несколько наименований реактивов. При этом удобнее готовить растворы в порядке возрастания сложности:
  • * растворы, не требующие доведения pH;
    * растворы, требующие доведения pH;
    * "опасные" растворы (все остальные готовые растворы убрать и только потом готовить среды, SDS и т.п.).


    Взвешивание

  • В лаборатории есть два типа весов (оба типа позволяют произвольно устанавливать "0" отсчёта):
    1. с точностью 0.0001g и пределом измерения до 60g. Они используются для взвешивания:
    2. * небольших количеств веществ (обычно до 100mg, но иногда, когда требуется необычно высокая точность, и больше);
      * уравновешивания бакетов для ультрацентрифуги Optima.

    3. с точностью 0.01g и пределом измерения до 2kg. Наиболее часто используемые, используются для всех остальных взвешиваний, в том числе для уравновешивания центрифужных пробирок. Расположенная сверху полоса "%" показывает какую часть от максимально допустимого составляет вес на чашке.
  • Взвешивание "x"g реактива:
    1. установить на весы "пустую" ёмкость;
    2. установить "0";
    3. насыпать реактива до "x"g.
  • Реактив "слежался":
  • * закрыть банку, как следует потрясти;
    * раздробить, используя шпатель (вымытый и прокалённый);
    * раздробить, используя стерильную пипетку;

  • У банки горловина широкая, а пересыпать нужно в банку с узкой: можно вместо шпателя использовать новый синий тип, одетый на авторучку/карандаш (но не на автоматическую пипетку).
  • Легко "летучие" реактивы (такие как бактериальные среды, SDS) взвешиваются только под тягой.
  • Очень аккуратно (под тягой, с предосторожностями, чтобы не загрязнить "окружающую среду") взвешиваются:
  • а) RNase;
    б) DNase;
    в) Proteinases;
    г) Бактериальные среды;
    д) SDS и другие летучие детергенты.

  • Если при взвешивании реактив попал на весы:
  • Ни в коем случае НЕ СДУВАТЬ!!! - это способ превратить маленькие неприятности в большие. Нужно аккуратно снять чашку (и, если надо, верхний кожух весов); кожух вымыть и насухо протереть; весы протереть влажной тряпкой/салфеткой, насухо вытереть; всё собрать.


    Расчёт растворов

    Существует множество способов измерения концентрации и количества веществ. Тем, кто работает в молекулярной биологии необходимо свободно обращаться по крайней мере с двумя типами единиц: "молями" и "процентами" (тем, кто в коммерции - достаточно "процентов").


    Моль

    Моль - единица измерения количества вещества. 1 моль - такое количество вещества в котором содержится 6.022х1023 (число Авогадро) молекул этого вещества. Моль - единица безразмерная (что-то типа "штук", "дюжин", "сотен").

    Однако, когда пишут "M" обычно имеют в виду не количество, а концентрацию: моль/литр. Эта единица измерения имеет размерность [1/L].

    Когда имеют в виду действительно количество почему-то пишут "mol" (безразмерная величина). Вполне можно написать, что M=mol/L.

    Реально пользоваться этой единицей измерения можно лишь зная "молекулярный вес вещества" - вес 1 моля (6.03х1023молекул). Обозначается этот вес "Mr", "Mw", и измеряется в граммах.

    Молекулярный вес можно найти:

    1. непосредственно на банке с реактивом (не лучший способ);
    2. в справочнике типа "Merck index" (пожалуй, наиболее грамотный способ);
    3. в каталогах таких фирм как Sigma, Merck, Fluka, ICN, Aldrich (наиболее распространённый способ);
    4. рассчитать по молекулярной формуле (изредка приходиться поступать и таким образом).

    Пример расчёта раствора:

    Mg2+ 2M, (хранить при NT):

      Конц.Сток200ml
    MgCl2x6H2O1M203.3g/M40.66g
    MgSO4x7H2O1M246.48g/M49.30g
    H2O mQ144.6g

    p=1.173g/ml.
    m(MgCl2x6H2O)=1[mol/L]x203.3[g/mol]x0.2[L]=40.66[g]
    m(MgSO4x7H2O)=1[mol/L]x246.48[g/mol]x0.2[L]=49.30[g]
    H2O - ?*
    __________________________________________
    * Вычислить, сколько потребуется добавить воды так же просто (в одно действие) не получится. При первом приготовлении придётся использовать градуированную посуду. Вначале растворить соли в заведомо меньшем, чем нужно, количестве воды и лишь затем довести объём до 200ml. Однако, если вы не поленитесь измерить, сколько всего воды потребовалось ({вес колбы с готовым раствором} – {вес колбы с солями до добавления воды}), то в следующий раз вы сможете сразу добавить воды столько, сколько нужно. У нас принято выражать полученный результат в виде плотности раствора p[g/ml]. В вышеприведённом примере:

    p[g/ml]=(40.66[g]+49.30[g]+144.6[g])/200[ml]=1.173[g/ml]

    Если плотность раствора известна, то нужное количество воды определяется:

    m(H2O)[g]=Vраствора[ml]*p[g/ml] - mвсех остальных компонентов[g]

    Остаётся добавить, что плотность можно определить и непосредственно - взвесив известный объём раствора. Но при этом нужно иметь в виду, что точность измерения объёмов обычно очень невелика и для таких фокусов лучше использовать "мерную колбу" (штука с тонким и длинным горлом и всего одной отметкой на нём); хуже – мерный цилиндр; и уж совсем плохо - стакан.


    Процентное содержание

    Процентное содержание - отношение количества данного вещества к количеству всего раствора, выраженное в процентах. В зависимости от того, что понимается под количеством, процентное содержание будет "массовым" (w/w - weight/weight), "объёмным" (v/v - volume/volume) или "смешанным" (например w/v - weight/volume). Первые две единицы измерения безразмерные, и поэтому проблем обычно не вызывают; третья - размерная величина. Весьма печально, но часто не указывается явно какой именно процент имеется в виду (тогда остаётся только догадываться, чаще всего (хотя и не обязательно) подразумевается [g/ml]).

    Пример расчёта раствора:
    Раствор Денхарда 50х:

      Конц.100ml
    Ficoll1%1.0g
    Polyvinilpyrolidone1%1.0g
    BSA1%1.0g

    m(Ficoll)= 100[ml]x1[%g/ml]/100[%]=1[g]

    Мы не указали "вид" процентов специально, чтобы проиллюстрировать, как "догадываются". Ficoll, Polyvinilpyrolidone, BSA - твёрдые вещества, так что вряд ли здесь имелся в виду объёмный процент; в то же время конечный раствор - жидкость, так что скорее всего имеется в виду [w/v].




Смотри также:
/ссылки на сетевые ресурсы/


    Какую информацию можно найти на банке с реактивом

    1. Название и молекулярная формула;
    2. Каталожный номер и название фирмы;
    3. Номер партии (lot number);
    4. Дата, до которой продукт годен к употреблению;
    5. Условия хранения.

    Первые три позиции вы обнаружите практически всегда, последние две - лишь у части реактивов.

    Наиболее полезная информация содержится в (1) и (2). Если Вы отсыпаете аликвоту какого либо реактива нужно переписывать данные из этих двух пунктов. Зачем нужно переписывать (1) понятно каждому. Данные (2) (каталожный номер и название фирмы) позволяют найти описание реактива в каталоге фирмы, а именно там содержится информация о качестве и свойствах реактива. Эта информация является очень важной; достаточно сказать, что различные реактивы с одинаковыми названиями/формулой часто имеют цены, различающиеся в 5-10 раз.


    Способы дополнительной очистки растворов

    Фильтрация

    (а если используется 0.22 µm фильтр, то заодно и стерилизация).

    В зависимости от объёма используются различные фильтры:

    до 1mlSpin filter units (фильтрация в центрифуге)
    1-100mlШприц - одноразовый фильтр (объём шприца выбирается в зависимости от объёма раствора).
    20-50ml50ml фильтровальная ячейка.
    50-200ml150ml фильтровальная ячейка (можно в несколько приёмов).
    150-500ml250ml фильтровальная ячейка (можно в несколько приёмов).
    >1lПеристальтический насос - фильтр с заменяемой мембраной.
  • Не стоит пытаться профильтровать через субмикронный фильтр заметно грязный раствор - фильтр забьется. В таких случаях необходимо либо проводить предварительную фильтрацию через фильтр из стекловолокна (GFA, GFB, GF/C, GF/D и GF/F) или ватман 3MM, либо устанавливать префильтр:
  • * для работы со шприцом - отдельная ячейка очень похожая на обычный фильтр,
    * для фильтрующих ячеек - кружочки GFC или 3MM положенные на мембрану.

  • Для особо чувствительных применений перед фильтрацией имеет смысл промыть мембрану mQ (просто профильтровать через ячейку немного воды и сбросить её).
  • Пара слов о допустимости фильтрования. Нужно иметь в виду два ограничения:
    1. Материал мембраны и самой фильтрующей ячейки не должен взаимодействовать/растворяться в фильтруемом растворе (обычно это ограничение не является проблемой, если раствор не содержит органических растворителей или сильных кислот/щелочей). Разобраться с устойчивостью обычно удаётся с помощью каталога фирмы-производителя фильтра.
    2. Компоненты вашего раствора не должны адсорбироваться на мембране (особенно любят это делать белки и нуклеиновые кислоты). Особое внимание в двух часто встречающихся случаях: при использовании GFC-фильтра и при выборе фильтра для очистки образца перед гель-фильтрационной колонкой.
  • Стерилизующей фильтровальной ячейкой можно пользоваться несколько раз, если стерилизуется
  • * один и тот же раствор;
    * растворы различаются лишь pH;
    * "вторым", стерилизуется раствор, содержащий все компоненты, из которых состоит предыдущий.

    В промежутке можно сполоснуть ячейку, профильтровав небольшое количество mQ.

  • Хранение.
  • Нужно иметь в виду, что если вы заинтересованы именно в "стерилизации", то долго хранить использованный фильтр, видимо, нельзя (можно в течение нескольких часов профильтровать несколько растворов, но потом - выбросить). Однако, если нужна "очистка", то можно (и нужно):

    1. сполоснуть приёмную часть mQ/дистиллятом;
    2. профильтровать ~100ml mQ/дистиллята;
    3. выбросить профильтрованную жидкость, предварительно ополоснув ей банку;
    4. повторить пп. 2, 3;
    5. стряхнуть, просушить, хранить собранным при NT.

    Очистка углём

    Видимо она уходит в прошлое вместе с советскими реактивами. Способ очистки:

    1. насыпать ~чайную ложку угля на литр раствора;
    2. смешивать на магнитной мешалке 2h-ON;
    3. фильтровать через ватман 3ММ;
    4. фильтровать через субмикронный фильтр.

    Главное ограничение - нужно быть уверенным, что уголь не адсорбирует нужные вам компоненты раствора.


    Деионизация

    Только для неионных растворов. Обычно (если уж потребовалась деионизация) получающийся раствор нестабилен, поэтому деионизируйте понемногу и непосредственно перед применением, храните то, что получилось в соответствующих условиях (небольшие аликвоты; охлаждение +4oС, -20oС или -70oС; "темнота" и тому подобное).


    Автоклавирование

    Стерилизация фильтрованием описана выше. Другой обычный способ стерилизации - автоклавирование. Ограничение - все компоненты раствора должны выдерживать нагрев.

    Правила:

    • Банка должна быть заполнена не более чем на 3/4 (видимо, при автоклавировании раствор иногда закипает и нужно, чтобы он при этом не выплёскивался).
    • Банка должна быть закрыта НЕПЛОТНО (иначе может взорваться).
    • Должна быть приклеена автоклавная ленточка.
    • Сразу после автоклавирования агара его нужно смешать, иначе он застынет как неоднородная субстанция: внизу существенно более концентрированная, чем вверху.
    • Стерилизация пластика. После автоклавирования нужно сразу же достать банки/коробки с типами/эппендорфами (пока они ещё горячие) и поместить их открытыми под ламинар для просушки (можно/лучше под UV).
    • Важно отдавать себе отчёт в том, что автоклав - это реальный прибор, внутри которого есть своя грязь, а пар изнутри автоклава наверняка проникает в неплотно закрытую банку. Нужно соотносить это загрязнение с выгодой от автоклавирования прежде чем решить, стоит автоклавировать раствор или нет.
      Мы стерилизуем лишь тот пластик, который используется для стерильной работы с бактериями (для культур клеток используется покупной стерильный или стерилизация в "специализированном - культуральном" автоклаве). Мы считаем, что для всех остальных работ дополнительная грязь, которая оказывается на пластике после высушивания делает автоклавирование даже вредным.

    Очистка спирта

    Можно обойтись без очистки если использовать "фирменный" этанол. Обычный необходимо чистить (для всех применений, исключая стерилизацию поверхностей и фиксацию гелей).

    1. на 1L спирта добавить ~0.2g KMnO4, смешивать на магнитной мешалке ON (в специально отведённой для этого посуде, так как она сильно загрязняется марганцовкой);
    2. фильтровать через 3ММ;
    3. чистить углём (можно гранулированным, из противогазных баллонов);
    4. фильтровать через 3ММ;
    5. фильтровать через субмикронный фильтр (на перистальтическом насосе);
    6. перегнать;
    7. хранить в плотно закрытой и замотанной парафильмом посуде (чтобы спирт не адсорбировал воду из воздуха).


    Лабораторный пластик

    Сорта пластика, используемого в лаборатории

  • Полипропилен (обычное сокращение в литературе: PP).
    Из него изготовлены типы, практически всегда - 0.2-2.0ml микроцентрифужные пробирки, обычно 15ml и 50ml центрифужные пробирки. Он выдерживает практически все вещества, которые встречаются в лабораторной практике.
  • Полистирен.
    Бактериальные чашки Петри, культуральный пластик, пластиковые пипетки. Довольно часто 15ml и 50ml центрифужные пробирки. Он не выдерживает фенол, хлороформ, DMSO, DMFA.
  • Полиэтилен.
    Редко, но встречаются типы и микроцентрифужные пробирки. Пробирки рвутся при центрифугировании в настольной микроцентрифуге, лучше ими вообще не пользоваться.
  • Ультрацентрифужные пробирки. Гораздо более подробную информацию можно найти в каталоге Beckman.
    • Ultra-Clare тонкостенные и быстрозапаивающиеся пробирки. Только холодная стерилизация, нельзя использовать спирт. Плохо переносят щелочные растворы (>pH 8). Плохо переносят DMSO и большинство органических растворителей (в т.ч. все спирты).
    • Полиаломерные тонкостенные и быстрозапаивающиеся пробирки, толстостенные пробирки и банки. Можно автоклавировать при 121оС. Выдерживают большинство кислот, многие основания, многие спирты, DMSO и некоторые органические растворители.
    • Поликарбонатные толстостенные пробирки и банки. Можно (хотя лучше этого не делать) автоклавировать при 121оС. Холодная стерилизация, но не спиртом. Плохо переносят щелочные растворы (>pH 8). Выдерживают некоторые слабые кислоты. Плохо переносят щёлочи, спирты и большинство органических растворителей.
    • Cellilose propionate пробирки. Холодная стерилизация, но не спиртом. Плохо переносят большинство кислот, щёлочей, спирты и большинство органических растворителей.
    • Полипропиленовые пробирки и банки. Можно автоклавировать при 121оС. Выдерживают большинство кислот, щелочей и спиртов. Плохо переносят большинство органических растворителей.
    • Пробирки из нержавеющей стали. Можно автоклавировать (но после - высушить). Выдерживают большинство органических растворителей. Плохо переносят большинство кислот и щелочей.
    • Полиэтиленовые пробирки. Можно автоклавировать при 121оС. Плохо переносят органические растворители, спокойно - сильные кислоты и щёлочи.
    • Corex/Pyrex пробирки и банки. Можно автоклавировать при 121оС. Выдерживают большинство кислот и щелочей.


  • Типы

    Мы имеем три типа жёлтых (<200 µl) типов:

    с "толстым" кончиком;
    с "заострённым" кончиком;
    с фильтром.

    Первый тип - самый дешёвый, по возможности, лучше использовать его.

    Второй - более удобный и точный (при работе с небольшими (<5 µl) объёмами). Эти типы используются:

    а) при отборе объёмов <2 µl (в том числе практически вся работа с ферментами),
    б) для работы с дорогостоящими растворами (RNA, нуклеотиды, олигонуклеотиды, пептиды). В этом случае более высокое качество гарантирует, что раствор не останется на внешней и внутренней поверхностях типа.

    Третий тип - только для очень тонких работ (очень чувствительные к загрязнениям PCR-реакции, сложные ферментативные реакции). Начинающим их использование не грозит.

    Синие типы - двух типов, с фильтром и без. Применение - аналогично жёлтым.


    H2O

    В лаборатории имеется вода трёх сортов:

    * водопроводная для заваривания чая; мытья рук, лабораторной посуды, форезных камер.
    * дистиллированная для ополаскивания лабораторной посуды, форезных камер, приготовления бактериальных сред.
    * mQ для приготовление всех остальных растворов и буферов.



MolBiol.ru: http://molbiol.ru
e-mail: redactor@molbiol.ru
просмотров: 61378

    Дополнения, комментарии, вопросы

    Гость /21.07.2006 08:06/
    как приготовить 0,1н р-р хлорной кислоты плотность1,54 , массовая доля хлорной кислоты 60%



    A Chemist /21.07.2006 08:57/
    Это невозможно. Существование 0,1 н. раствора хлорной кислоты с массовой долей хлорной кислоты 60% противоречит законам природы.



    guest: ммм /21.07.2006 12:07/
    я ж говорю A Chemist зануда. smile.gif Ну, гость не компьютер, надо понимать, тс по умолчанию, что он собирается из концентрированной готовить разбавленную.

    А гостю скажу, что полезно иметь в лаборатори такие книжки, как краткий справочник химика под редакцией Рабиновича, справочник по аналитической химии под ред Лурье и справочник биохимика Доусона. Дык там написано, что 60% хлорная кислота имеет молярность 9.2, как считать дальше я думаю вы сами поймете. Кстати, если вы воспользуетесь мол. весом хлорной кислоты, то цифру 9.2 несложно получить путем не хитрых вычислений из данных, которые вам уже известны.



    Гость /28.09.2006 18:27/
    Умные люди!По какой формуле вычисляется ёмкость катионита или анионита,в случае деионизации!
    Если известна дименсия ёмкости, а именно:
    mg-ekвивалент/g........?



    guest: ммм /29.09.2006 14:07/
    это зависит от состава воды, те количества ионов в воде: 1 мгэкв сульфата в смоле соответствует поглощению 1 мгэкв натрия из воды, примерно так,
    на кальций нужно два сульфата, на фосфат примерно 2-3 тетраалкиламина в смоле.



    gynny /25.11.2006 17:44/
    как приготовить из концентрированной HCI 0,2М раствор?



    A Chemist /27.11.2006 18:53/
    Разбавлением.
    Концентрированная - это 33-35%, около 11 М (см. приложенный файл). Если надо точно - титруйте или измеряйте плотность.



    Файл/ы:

    HCl_0001.djvu
    Размер:: 16.34к
    кол-во скачиваний: 19




    gynny /28.11.2006 19:06/
    ограмное спасибо,за соляную кислоту!!!!Вы не подозревая того помогли развитию советской науки!!!!



    A Chemist /29.11.2006 12:32/
    Вы не подозревая того помогли развитию советской науки

    Уффф!
    Ну всё, теперь можно и на пенсию с чистой совестью и чувством исполненного долга.



    Гость /17.01.2007 20:10/
    Люди, скажите, как готовить трис НCl буфер рН 8,0? Есть ли трис Cl буфер?



    optima /23.01.2007 11:10/
    а в чем проблема? делаете навеску триса и доводите потихоньку под контролем рН-метра соляной кислотой до нужного рН.
    что такое трис Сl - не знаю.



    optima /23.01.2007 11:17/
    трис конечно растворить в воде перед доведением рНа



    vadikus /21.02.2007 09:15/
    Я в химии дилетант. Не подскажете, как приготовить, к примеру 100 литров 5% раствора мочевины? Если бы мочевина была жидкостью, вопроса бы не возникло. Мне нужен порядок расчета. Огромное спасибо.



    curious67 /21.02.2007 10:37/
    точно так же как, как и 1 литр, просто будет в 100 раз больше. Хоть каким дилетатном Вы являетесь, но курс химии проходили в школе. А в вузе?



    guest: ммм /21.02.2007 13:00/
    ---100 литров 5% раствора мочевины?
    Проценты бывают разные бывают вес/объем бывают вес/вес. Вам какие? В зависимости от этого меняется алгоритм получения и расчета раствора.



    A Chemist /21.02.2007 13:26/
    Если речь идет о классических процентах (это граммы вещества в 100 ГРАММАХ раствора), то порядок расчета такой:
    1. Определить (например, по справочнику) плотность целевого раствора и рассчитать массу того конечного объема, к которому Вы стремитесь (М).
    2. Рассчитать количество растворяемого вещества в г (в Вашем случае это 0,05хМ).
    3. Рассчитать количество растворителя в г (0,95хМ).

    А по-простому, если точность конечного объема не важна - просто на каждые 5 г мочевины берете 95 г воды. Это и даст Вам 5%-ный раствор.

    А почему Вы полагаете, что будь мочевина жидкостью, Вам было бы легче? Точно так же надо было бы взять 5 г на 95 г воды (или по плотности рассчитать объем этих 5 г и их отмерить).



    vadikus /21.02.2007 19:14/
    Большое спасибо! Как все просто. Я не знал, что нужно обратиться к справочнику за плотностью целевого раствора, думал, что можно как-то вывести плотность целевого раствора из плотности растворимого вещества и растворителя.



    guest: ммм /21.02.2007 21:02/
    Ребяты вы чой-то заработались. Вам пилотность раствора ненада зувсем.

    Если хотите весовые проценты. То к 5г(кг,унций,гран, карат и тд) мочевины добвляете 95г(кг,унций,гран, карат и тд) воды( спирта, ацетона, формамида и тд) растворителя. И вы можете разложиться на атомы, но сумарный вес раствора будет 100г(кг,унций,гран, карат и тд). А вот его объем и пилотность остается загадочной цифрой, которую и не во всяком справочнике найдешь, но вас это не должно трогать ибо весовые проценты будут соблюдены.

    Ежели вам нужны вес/объемные проценты. Вы берете мерную посуду объемом 100мл и взвешиваете 5г мочевины, засыпаете в ету посудину и доводите(растворителем) объем до метки 100мл(канешна мочевин при подведений объем должен быть уже полностью растворен) и опять пилотность сего раствра загодочна, но опять это вас не трогает.

    А вот если вы покурите травки и вам взбредет в голову шальная мызл перевести весовые проценты в обьемные или обратно, то вот тут то вам без плотностей раствора не обойтись.



    vadikus /21.02.2007 23:06/
    И вывел таки формулы, решив систему уравнений, с помощью которых можно определить, что, например 100л 5%-го раствора мочевины (удельный вес - 1,32г/см3)можно получить растворив 5,06кг мочевины в 96,17л воды. tongue.gif



    Картинки:
    Прикреплённое изображение

    curious67 /21.02.2007 23:14/
    е-п-р-с-т!



    curious67 /21.02.2007 23:17/
    покажите мне методу, в которой разница между 5 г и 5.06 г будет существенной для успеха-неуспеха! И тогда я Вам скажу, что это плохая методика, которая не может быть достоверно воспроизведена НИ-КОГ-ДА!. Ну и к чему тогда все умствования, 5г- и вперед



    curious67 /21.02.2007 23:23/
    А вот если вы покурите травки и вам взбредет в голову шальная мызл перевести весовые проценты в обьемные или обратно, то вот тут то вам без плотностей раствора не обойтись.

    да на этом форуме подчас, не покуривши, вообще нельзя ...как бы это помягче. Короче, нельзя , и все



    vadikus /22.02.2007 05:19/
    Согласен, разница несущественная, но иногда решать подобные задачки интереснее, чем семечки из конопли выколупывать.



    curious67 /22.02.2007 12:20/
    спасибо и Вам. Пожалуй, сохраню формУлы. Но Вы там, уж не увлекайтесь, канабис, понимашь...



    Гость /27.02.2007 14:48/
    Дорогой Chemist, верни файл по расчету HCl.Thank you in advance!



    vadikus /12.03.2007 17:38/
    Уважаемые специалисты, не подскажет ли кто, каким растворителем лучше всего отмачивать картридж струйного принтера? Спасибо за внимание!



    woodpecker /13.03.2007 08:56/
    Вам лучше зайти на комп.форум. Там эта тема обсуждалась 1000 раз. Напр. на www.ixbt.com



    chucha /16.03.2007 09:30/
    Как ПРАВильно готовить растовр щелочи



    -TV- /16.03.2007 09:47/
    Всех приветствую! Как приготовить раствор белков пшеничной муки для их фракционирования? Возможно ли использовать какой-то один растворитель, чтобы выделить все фракции? Спасибо за ответ.



    Гость /24.05.2007 17:34/
    как приготовить раствор SSC 20x



    Гость /25.02.2008 13:07/
    как приготовить из концентрированной HCI 0,2М раствор?



    guest: ммм /27.02.2008 17:46/
    --как приготовить из концентрированной HCI 0,2М раствор?

    Идете сюда

    http://molbiol.ru/solution/03_02.html#a24 ( http://molbiol.ru/solution/03_02.html#a24 )

    там есть концентрация конц НCl в молях. Дальше вопросов быть не должно.



    guest: ммм /27.02.2008 17:59/
    --как приготовить раствор SSC 20x

    http://molbiol.ru/solution/03_06.html#a3 ( http://molbiol.ru/solution/03_06.html#a3 )

    Люди старались готовили для вас инфу на сайте, а вам даже лень поискать, СТЫДНО.



    xaus /21.01.2009 18:03/
    Подскажите пожалуйста, как приготовить раствор 8,5М(57%) р-р хлорной кислоты из НСLO4 (порошок)



    guest: ммм /21.01.2009 21:55/
    --р-р хлорной кислоты из НСLO4 (порошок)

    Вы, это, прекратите, пугать тут усех, хлорная кислота жидкая и кипит при 25 градусах, не дай вам Бог увидеть это воочию.

    вас обманули это верняк не хлорная кислота. она вообще в товарном виде только в 60% водном растворе.



    guest: Наталья /25.02.2009 16:07/
    Народ, а кто-нибудь слышал о холодных спиртах? Что имеется в виду?



    scorpik64 /22.10.2009 01:57/
    (Гость @ 25.02.2008 14:07)
    Ссылка на исходное сообщение  как приготовить из концентрированной HCI 0,2М раствор?


    я конечно может что то путаю, но по-моему рассчитать исходное колличество концентрированных кислот для приготовления разбавленных растворов можно по следующей формуле:

    V1=(M*V2*C1*100)/(p1*W1). где

    V1-необходимое количество концентрированной кислоты, л;
    M-масса эквивалентнная используемой кислоты;
    V2-необходимое количество раствора на выходе, л;
    C1-конечная концентрация раствора, N;
    p1-плотность исходной концентрированной кислоты, г/л;
    w1-концентрация исходной концентрированной кислоты, %.

    Потом в мерной колбе соответствующей V2 до метки.

    просто с формулой принципиальный воропос. жду вашего мнения...



    Dch /23.10.2009 00:16/
    (guest: Наталья @ 25.02.2009 16:07)
    Ссылка на исходное сообщение  Народ, а кто-нибудь слышал о холодных спиртах? Что имеется в виду?

    ??? Спирт, охлаждённый ниже комнатной температуры, надо полагать. Приготавливается помещением спирта в холодильник, на лёд, либо в морозилку, на -20, -70... Либо в сухой лёд... Либо в жидкий азот... Либо в жидкий гелий... Всё, холоднее на практике получить трудно.

    Белки плазмы крови собрались фракционировать или что?



    Orlandina /07.11.2009 19:34/
    Ребята, подскажите как приготовить 0,2M ацетатный буфер pH 5,6. teapot.gif

    Палками бить можно и даже нужно.... Но еще нужнее помощь.

    Спасибо заранее.



    protein /07.11.2009 20:54/
    http://www.nlr.ru/fdcc/activ/docs/9801_82.html#3 ( http://www.nlr.ru/fdcc/activ/docs/9801_82.html#3 )
    sootvetstvenno, acetata natrija bolshe dalete dla pH 5.6



    guest: ммм /07.11.2009 22:40/
    -как приготовить 0,2M ацетатный буфер pH 5,6.

    1.Берете 200мМ уксусной к-ты разводите скажем до полулитра доводите рН в ней на рН метре 5-10М гидроокисью натрия до нужной величины при осторожном перемешивании, затем доводите объем до 1л.
    Или
    2. Берете 200мМ раствор уксусной(200мМ в 1л) кислоты и 200мМ раствор ацетата натрия и на рН-метре доводите в любом объеме кислоты рН раствором ацетата.

    --acetata natrija bolshe dalete dla pH 5.6

    Ха-Ха ! насколько больше?



    Orlandina /08.11.2009 17:51/
    Хм... Я конешно не химик.. Но если к 200mM заствору уксусной кислоты прибавить 200mM раствор ацетата натрия будет ли ацетатный буфер 200mM? Ацетат же есть в обоих соединениях...

    Хотя я сейчас подумала... Наверное будет, если их смешать до получения объема 1 л (н-р 300мл+700мл или 500мл+500мл). А если добавить воды или еще чего-нибудь, то уже не будет. Надеюсь это верно..
    Уфф.

    P.S. спасибо за помощь!



    guest: ммм /08.11.2009 22:02/
    --Надеюсь это верно..
    Уфф.

    Верно. Про воду доливать вы сами придумали никто про это не писал.








       
Дата последней модификации: 30/07/13

ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

molbiol.ru  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама

molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов   Rambler