Главная страница MolBiol.ru > Растворы > Прописи > Многокомпонентные растворы Rambler's Top100  English version  Deutsche Version  Український варіант
ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

Сложные буфера









    Инструкция по работе с прописями растворов откроется в новом окне при нажатии на эту кнопку:

    TE

    1x; pH7.4; 7.6; 8.0; (õðàíèòü ïðè 4oC).

    Êîíö.Ñòîê1ml5ml10ml50ml400ml
    Tris Cl10mM1M10µl50µl100µl500µl4ml
    EDTA1mM0.5M2µl10µl20µl100µl800µl
    H2O mQ988µl4.94ml9.88ml49.4ml395ml

    10x:

    Êîíö.Ñòîê1ml5ml
    Tris Cl0.1M1M0.1ml0.5ml
    EDTA10mM0.5M20µl0.1ml
    H2OmQ 880µl4.4ml
  • Ñòåðèëèçîâàòü àâòîêëàâèðîâàíèåì.
  • STE

    1x; (õðàíèòü ïðè 4oC).

    Êîíö.Ñòîê1ml5ml10ml50ml
    NaCl0.1M5M20µl100µl200µl1.0ml
    Tris Cl, pH8.010mM1M10µl50µl100µl0.5ml
    EDTA, pH8.01mM0.5M2µl10µl20µl100µl
    H2O mQ0.968ml4.84ml9.68ml48.4ml

    10x:

    Êîíö.Ñòîê1ml5ml
    NaCl1.0M5M0.2ml1.0ml
    Tris Cl0.1M1M0.1ml0.5ml
    EDTA10mM0.5mM20µl0.1ml
    H2OmQ 680µl3.4ml
  • Ñòåðèëèçîâàòü àâòîêëàâèðîâàíèåì.
  • SSC

    20x; pH 7.0; (õðàíèòü ïðè NT).

    Êîíö.Ñòîê0.5L1.5L2L
    NaCl3M58.44g/M87.66g263.0g350.6g
    Na3C6H5O7x 5.5H2O0.3M357.1g/M53.57g160.7g214.3g
    H2O mQ440.3ml1.32L1.76L

    p = 1.103

    TAE

    Трис-ацетатный буфер, 1x pH = 7.6:

    Tris-acetate 40mM
    EDTA 1mM

    хранить основной сток при 4oC, рабочее количество (~100ml) при NT

    Êîíö.Ñòîê100ml150ml200ml250ml
    Tris-base2M121.1g/M24.22g36.33g48.44g60.55g
    EDTA0.05M372.3g/M1.862g2.792g3.723g4.654g
    Укс. к-та~1.56M17.4M ~8.96ml
    ~9.40g
    ~13.44ml
    ~14.10g
    ~17.92ml
    ~18.80g
    ~22.40ml
    ~23.50g
    ~
    ~
    H2O mQ~73.30g~109.95g~146.60g~183.25g~

    p(50x)=1.0878

  • удобно вначале растворить Tris и EDTA и лишь затем добавлять кислоту, следя за pH.
  • TBE

    10x, pH ~8.3;(õðàíèòü ïðè NT в чистой посуде)

    1x10xÑòîê1L
    Tris base89mM0.89M121.14g/M107.8g
    Boric acid89mM0.89M61.83g/M55.03g
    EDTA, pH 8.02mM20mM500mM40ml
    43.84g

    H2O  mQ863.3ml
  • 10x сток вполне устойчиво хранится при NT, если его профильтровать через 0.4µm фильтр.
  • Для PAAG используется как 1х, для агарозных - как 0.5х.
  • Для агарозных гелей имеет смысл применять при работе с маленькими (< 200bp) фрагментами. Считается, что клонирование из ТВЕ гелей сложнее, чем из ТАЕ.
  • FGRB

    50x (formaldehyde gel-running buffer), p=1.104g/ml (õðàíèòü ïðè +4oC):

    Êîíö.Ñòîê0.5L1.0L2.0L
    MOPS (pH7.0)1.0M209.27g/M104.64g209.27g418.54g
    AcONax3H2O0.5M136.08g/M34.02g68.04g136.08g
    EDTAx2H2O50mM372.3g/M9.31g18.62g37.23g
    H2O mQ404.0ml808ml1616ml
    Êîíö.Ñòîê0.5L1.0L2.0L
    MOPS (pH7.0)1.0M209.27g/M104.64g209.27g418.54g
    AcONa anhydrous0.5M82.04g/M20.51g41.02g82.04g
    EDTA x 2H2O50mM372.3g/M9.31g18.62g37.23g
    H2O mQ417.5ml835ml1670ml
  • Довести до pH7.0 10N NaOH (на 500ml буфера ~22ml), фильтровать через 0.22µm фильтр.
  • На свету (в процессе хранения) желтеет, но это не сказывается на его качестве.


Смотри также:
/ссылки на сетевые ресурсы/


    GTGB

    20x /Glycerol tolerant gel buffer/ (õðàíèòü ïðè +4oC):

    Êîíö.Ñòîê1L1.5L2.0L2.5L

    Tris base

    1.78M121.14g/M216g324g432g540g

    Taurine

    0.56M125.15g/M72g108g144g180g

    Na2EDTAx2H2O

    10.7mM372.3 g/M4g6g8g10g

    H2O

     mQ802ml1203ml1604ml2005ml

    p=1.094

  • Taurine: C2H7NO3S; Mw=125.15g/M.
  • TGB

    Tris-Glycine buffer 5x, pH8.3, (хранить основной сток при +4oC, рабочий сток - при NT).

    1xÊîíö.Ñòîê1L1.5L
    Tris-base25mM125mM121.1g/M15.1g22.71g
    Glycine250mM1.25M75.05g/M94g141g
    SDS0.1%0.5%10%50ml75ml
    H2O  mQ   

    Буфер для внесения

    10x, (õðàíèòü ïðè NT).

    Êîíö.Ñòîê1ml5ml10ml25ml
    Ксилен-цианол0.1%òâ.1.0mg5.0mg10mg25.0mg
    Бромф. синий0.1%òâ.1.0mg5.0mg10mg25.0mg
    SDS0.5%10%50µl250µl500µl1.25ml
    EDTA, pH8.00.1M0.5M0.2ml1.0ml2.0ml5.0ml
    Глицерол50%100% 0.5ml
    0.625g
    2.5ml
    3.125g
    5.0ml
    6.25g
    12.5ml
    15.63g

    H2O mQ0.25ml1.25ml2.5ml6.25ml

    PEG-NaCl

    (õðàíèòü ïðè 4oC).

    Êîíö.Ñòîê50ml100ml150ml200ml
    NaCl1.6M58.44g/M4.675g9.35g14.03g18.70g
    PEG-600013%òâ.6.50g13.00g19.50g26.00g

    или:

    Êîíö.Ñòîê50ml100ml150ml200ml
    NaCl1.6M5M 16ml
    18.97g
    32ml
    37.95g
    48ml
    56.92g
    64ml
    75.90g

    PEG-600013%40%16.25ml32.50ml48.75ml65.00ml

    SM

    (õðàíèòü ïðè 4oC).

    Êîíö.Ñòîê10ml50ml100ml150ml
    NaCl0.1M5M200µl1.0ml2.0ml3.0ml
    MgSO4*10mM1M100µl0.5ml1.0ml1.5ml
    Tris Cl, pH7.550mM1M0.5ml2.5ml5.0ml7.5ml
    желатин0.01%2%50µl0.25ml0.5ml0.75ml
    H2O mQ9.15ml45.75ml91.5ml137.25ml

    * - добавлять после автоклавирования;

  • Ñòåðèëèçîâàòü àâòîêëàâèðîâàíèåì.
  • STM

    (õðàíèòü ïðè 4oC):

    Êîíö.Ñòîê50ml
    NaCl10mM5M100µl
    Tris Cl pH8.050mM1M2.5ml
    MgCl210mM1M500µl
    H2O mQ46.9ml

    TM

    (õðàíèòü ïðè 4oC):

    Êîíö.Ñòîê50ml
    Tris Cl pH8.050mM1M2.5ml
    MgCl210mM1M500µl
    H2O mQ47.0ml

    Денатурирующий буфер

    (õðàíèòü ïðè NT).

    Êîíö.Ñòîê100ml150ml300ml500ml750ml
    NaCl1.5M58.44g/M8.766g13.15g26.30g43.83g65.75g
    NaOH0.5M10M 5ml
    6.65g
    7.5ml
    9.97g
    15ml
    19.94g
    25ml
    33.23g
    37.5ml
    49.84g

      40g/M2g3g6g10g15g

    Нейтрализующий буфер

    (õðàíèòü ïðè NT).

    Êîíö.Ñòîê150ml300ml500ml750ml
    Tris Cl, pH7.41M121.1g/M18.15g36.3g60.5g90.75g
    NaCl1.5M58.44g/M13.15g26.30g43.83g65.75g
    HCl~0.81M11.6M/L~10.5ml~21ml~35ml~52.5ml
    EDTA (optional)1mM0.5M0.3ml0.6ml1ml1.5ml

    Проявитель Рентген-2

    (õðàíèòü ïðè NT в темноте).

    500ml800ml1l
    Метол1.1g1.76g2.2g
    Na2SO3 б/в36.0g57.6g72.0g
    Гидрохинон4.4g7.04g8.8g
    Сода б/в24.0g38.4g48.0g
    KBr2.0g3.2g4.0g
    H2O490ml784ml980ml

    растворять в указанном порядке , p=1.115g/ml.

    Фиксаж БКФ-2

    (õðàíèòü ïðè NT).

    500ml800ml1l
    Na2S2O3x 5H2O130g208g260g
    NH4Cl25g40g50g
    Na серноватисто-кислый пиро8.5g13.6g17g
    H2O398ml636.8ml796ml

    растворять в указанном порядке, p=1.123g/ml.

    Сцинцилляционный раствор

    (õðàíèòü ïðè NT в темноте):

    0.5L1L
    PPO2.50g5.00g
    POPOP0.05g0.10g
    Толуол   

    I плазмидный раствор

    (õðàíèòü ïðè +4oC)

    Êîíö.Ñòîê50ml100ml150ml200ml
    Глюкоза50mM2M 1.25ml
    1.41g
    2.5ml
    2.825g
    3.75ml
    4.24g
    5.0ml
    5.56g

    Tris Cl, pH 8.025mM1.0 M1.25ml2.5ml3.75ml5.0ml
    EDTA10mM0.5 M1.0ml2.0ml3.0ml4.0ml
    H2O mQ46.5ml93ml139.5ml186ml

    II плазмидный раствор

    Êîíö.Ñòîê0.5ml1ml2.5ml5.0ml6.5ml8.5ml
    NaOH0.2N1N0.1ml0.2ml0.5ml1.0ml1.3ml1.7ml
    SDS1%10%0.05ml0.1ml0.25ml0.5ml0.65ml0.85ml
    H2O mQ0.350ml0.7ml1.75ml3.5ml4.55ml5.95ml

    Смесь для окрашивания олигонуклеотидных гелей

    (õðàíèòü ïðè NT).

    Êîíö.Ñòîê100ml200ml300ml500ml
    AcONa(5.2)0.5M3M17ml33ml50.0ml83ml
    Met. blue0.04%0.2%20ml40ml60ml100ml
    H2O mQ73ml127ml190ml317ml

    Mg2+2M

    (õðàíèòü ïðè NT).

    Êîíö.Ñòîê200ml
    MgCl2x6H2O1M203.3g/M40.66g
    MgSO4x7H2O1M246.48g/M49.30g
    H2O mQ144.6g

    p=1.173g/ml.

    Деионизация формамида (мочевины, акриламида, глиоксаля).

    1. приготовить AG 501-X8 (из расчета 5g на 100ml (но для глиоксаля 1:1 w/w));
    2. сполоснуть смолу ~1ml/1g, выбросить раствор;
    3. смешивать ~1 час, без света завернув в алюминиевую фольгу;
    4. фильтровать (через фильтровальную бумагу);
    5. õðàíèòü ïðè -20oC в банке тёмного стекла или завернув в фольгу.
  • При деионизации формамида смола меняет цвет с голубого на золотистый вне зависимости от насыщения ионообменника.
  • Гибридизационный буфер HSB (f+)

    high SDS hybridization buffer (хранить основной сток при 4oC, рабочий - NT)

    Êîíö.Ñòîê500ml
    SDS7%òâ.35g
    Formamid50%100%250ml
    283.3g

    SSC5x20x125ml
    145.3g

    Bloc. Reagent2%òâ.10g
    NaP (pH 7.0)50mM1M25ml
    27.6g

    N-Lauroylsarcosine Na0.1%10%5ml
    5.1g

    Salm.Sperm DNA50µg/ml10µg/µl2.5ml
    H2O mQ49ml

    p=1.111

  • вместо 2% Blocking Reagent ("Roche Diagnostics GmBH; бывший Boehringer Mannheim"
    #1 096 176) можно использовать 10x Denhardt или сухое обезжиренное молоко.
  • Blocking Reagent можно растворить, лишь в буфере с высокой ионной силой (в данном случае - в H2O+SSC+NaP).
  • Salmon sperm DNA должна быть раздробленной и денатурированной.
  • Рестрикционные буфера 10x

    А.

    Êîíö.Ñòîê100µl1ml
    Tris Ac (pH7.9 37oC)33mM1M33µl330µl
    MgAc10mM1M10µl100µl
    KAc66mM5M13.2µl132µl
    DTT0.5mM1M0.5µl5µl
    H2O mQ43.3µl433µl

    B.

    Êîíö.Ñòîê100µl1ml
    Tris Cl (pH 8.0 37oC))10mM1M10µl100µl
    MgCl25mM1M5µl50µl
    NaCl100mM5M20µl200µl
    b-Me1mM1M1µl10µl
    H2O mQ64µl640µl

    L.

    Êîíö.Ñòîê100µl1ml
    Tris Cl (pH 7.5 37oC)10mM1M10µl100µl
    MgCl210mM1M10µl100µl
    DTT1mM1M1µl10µl
    H2O mQ79µl790µl

    M.

    Êîíö.Ñòîê100µl1ml
    Tris Cl (pH7.5 37oC)10mM1M10µl100µl
    NaCl50mM5M10µl100µl
    MgCl210mM1M10µl100µl
    DTT1mM1M1µl10µl
    H2O mQ69µl690µl

    H.

    Êîíö.Ñòîê100µl1ml
    Tris Cl (pH7.5 37oC)50mM1M50µl50µl
    MgCl210mM1M10µl100µl
    NaCl100mM5M20µl200µl
    DTT1mM1M1µl10µl
    H20 mQ19µl190µl

    Раствор Денхарда 50x

    (õðàíèòü ïðè -20oC)

    Êîíö.Ñòîê50ml300ml1L
    Ficoll 4001%(w/v)òâ.0.5g3.0g10g
    Polyvinilpyrolidone1%(w/v)òâ.0.5g3.0g10g
    BSA (fr V)1%(w/v)òâ.0.5g3.0g10g
    H2O mQ46.7ml292.2ml974ml

    p=1.004

  • фильтровать;
  • можно готовить как 100х.
  • PBS (рецепт 1)

    pH(1x)=7.4, (õðàíèòü ïðè NT или при 4oC):

    1xÊîíö.Ñòîê100ml500ml
    KH2PO41.7mM17mM136.1g/M0.231g1.157g
    Na2HPO45.2mM52mM142g/M0.738g3.692g
    NaCl150mM1.5M58.44g/M8.77g43.83g
    H2O mQ    
    1xÊîíö.Ñòîê100ml500ml
    KH2PO41.7mM17mM136.1g/M0.231g1.157g
    Na2HPO4x7H2O5.2mM52mM268.1g/M1.394g6.971g
    NaCl150mM1.5M58.44g/M8.77g43.83g
    H2O mQ    

    PBS (рецепт 2) 10x

    pH(1x)=7.3; (õðàíèòü ïðè NT или при 4oC)
    1x10xÑòîê100ml500ml
    KH2PO41.47mM14.7mM136.1g/M0.2g1.0g
    Na2HPO4x7H2O4.29mM42.9mM268.1g/M1.15g5.75g
    NaCl137mM1.37M58.44g/M8.0g40.0g
    KCl2.68mM26.8mM74.56g/M0.2g1.0g
    H2O  mQ   

    PBS (рецепт 3) 10x

    pH(1x)=7.3; (õðàíèòü ïðè NT или при 4oC)
    1x10xÑòîê100ml500ml
    KH2PO42mM20mM136.1g/M0.272g1.36g
    Na2HPO4x7H2O10mM100mM268.1g/M2.68g13.41g
    NaCl137mM1.37M58.44g/M8.0g40.0g
    KCl2.7mM27mM74.56g/M0.20g1.01g
    H2O  mQ   
  • стерилизовать автоклавированием;
  • pH зависит от концентрации, поэтому измерять лишь разбавив до 1х.
  • pH 10x должен быть ~6.8 (если необходимо, можно довести NaOH). Ñòåðèëèçîâàòü àâòîêëàâèðîâàíèåì. После разбавления pH должен стать 7.4.
  • SSPE 20x

    pH 7.4

    Êîíö.Ñòîê1L
    NaCl3M58.44g/M175g
    NaH2PO4xH2O200mM137.99g/M27.6g
    EDTA20mM372.24g/M7.4g
    H2O mQ926ml
  • доводить pH 10N NaOH.
  • RNase A (DNase free)

    1. растворить 10mg/ml в 1-50mM AcONa (pH4.5);
    2. кипятить 15', дать медленно остыть до комнатной температуры;
    3. хранить рабочий (маленький, ~50 µl) сток при +4oC, основное количество - в аликвотах по ~0.5ml на -20oC.

    Буфер для хранения RNAse

    (õðàíèòü ïðè -20oC).

    Êîíö.Ñòîê1ml5ml10ml
    Tris Cl, pH7.610mM1M10µl50µl100µl
    Глицерин50%100% 0.5ml
    0.630g
    2.5ml
    3.152g
    5.0ml
    6.305g

    H2O mQ0.486g2.43g4.86g

    Proteinase K

    Протеиназа К,

    (õðàíèòü ïðè +4oC, долговременное хранение при –20oC):
    20mg/ml раствор в 10mM Tris Cl, 1.0mM CaCl2, 30% glycerol.

    EDTA/гликоген раствор

    20x (õðàíèòü ïðè -20oC):

    Êîíö.Ñòîê1.0ml
    EDTA0.2M0.5M400µl
    glycogen1mg/ml20mg/ml50µl
    H2O mQ550µl

    Буфер для DNase RQ1

    10x (õðàíèòü ïðè -20oC):

    Êîíö.Ñòîê1ml
    Tris Cl (pH8.025oC)0.4M1M400µl
    NaCl0.1M5M20µl
    MgCl260mM1M60µl
    CaCl20.1M1M100µl
    H20 mQ420µl

    Буфер для хранения DNAse

    (õðàíèòü ïðè -20oC).

    Êîíö.Ñòîê1ml1.5ml2.5ml5ml10ml
    Tris Cl, pH 7.020mM1M20µl30µl50µl100µl200µl
    NaCl50mM5M10µl15µl25µl50µl100µl
    DTT1mM1M1µl1.5µl2.5µl5.0µl10µl
    Глицерин50%100% 0.5ml
    0.630g
    0.75ml
    0.9g
    1.25ml
    1.58g
    2.5ml
    3.15g
    5.0ml
    6.31g

    H2O mQ0.485ml0.73ml1.21ml2.42ml4.85ml


MolBiol.ru: http://molbiol.ru
e-mail: redactor@molbiol.ru
просмотров: 65098

    Дополнения, комментарии, вопросы

    bukach /26.05.2005 21:51/
    вы не написали какой объем буфера вам нужен. обозначу его V (в литрах)
    берете навеску Na2HPO4 м=142*0,1*V масса в граммах. растворяете ее в объеме немного меньшем V, затем берете NaOH и на рН-метре доводите рН затем доводите объем до нужного. фсе.
    иногда Na2HPO4 бывает в виде кристаллогидратов (на банке посмотрите)если это так, то вместо 142 в формулу нужно будет подставить мол. массу кристаллогидрата - 142+(колво молекул H20)*18
    а вы уверены что вам нужет именно фосфатный буфер, а не боратный например? фосфат при 9.4 буферить не будет.



    bukach /26.05.2005 21:53/
    блин, не помню какой будет рН раствора Na2HPO4 достаточно щелочной, не помню, больше нужного вам или нет. если нет, то все ок. если да, то возьмите NaH2PO4 (его мол.масса 120) тоже бывает в виде кристаллогидратов.

    все это скинула на мейл



    Oleg Klychnikov /26.05.2005 22:13/
    оффтоп

    фосфатный буфер - это паранойя!
    я думаю, что Редактору надо на стартовой странице
    привесить ссылку на "Метды приготовления Фосфатных БуферОв"



    Oleg Klychnikov /26.05.2005 22:57/
    и не буферА они.... эти - совсем в дргом месте...
    а бУферы
    ну... не могу уже...



    bukach /27.05.2005 04:07/
    ох, Oleg Klychnikov, как жаль что дают цветочек добавить только один раз. за пост о "буферАх" я бы вам сакуру в цвету вырастила!
    а еще ежели к названиям придираться, то и фосфатный буфер ну страсть какой сложный wink.gif замутить чтоль тему в беседе с названием типа "умеете ли вы готовить фосфатный буфер"? lol.gif

    а вообще то с такого хочется weep.gif ... хрень какая то с образованием... надо с этим бороцца...

    за оффтопик - shuffle.gif



    Tom1 /27.05.2005 14:16/
    Букач- "Почетный борез с народным образованием" tongue.gif



    tryptophobe /06.10.2005 21:48/
    Ниже приводится, если кому-то интересно, состав буфера для переноса (иммуноблот), которым мы пользуемся. Приведено количество для двадцатикратного стока и готового однократного буфера.

    Transfer buffer

    FW x20, mM 500 ml 1000 ml

    Bicin 163.17 500 40.79 81.59
    Bis-Tris 209.24 500 52.31 104.62
    EDTA*4H20 452.24 10.2 2.31 4.61
    Chlorobutanol* 177.46 5.4 0.48 0.96

    1x готовый transfer buffer (1 L)

    20x transfer buffer - 50 ml
    Methanol abs. - 100 ml
    Вода - до 1 л

    *1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol hydrate



    Гость /11.01.2006 03:28/
    Если у Вас на сайте есть эти растворы и я их проглядел - простите великодушно. А то пусть будут.

    Среда для заморозки клеток:(100 ml)
    50 ml DMEM (containing 4.5 g/L glucose,
    110 mg/L sodium pyruvate and 2 mM
    L-glutamine)
    40 ml heat-inactivated fetal bovine serum
    10 ml dimethylsulfoxide (DMSO)
    Filter sterilize

    буфер HBS:
    280 mM NaCl
    1.5 mM Na2HPO4
    50 mM HEPES
    Adjust the pH to 7.10 with NaOH

    раствор Trypsin-EDTA:
    0.53 mM EDTA
    0.05% trypsin



    Гость /10.03.2006 11:38/
    Где можно купить "Kit for Molecular weight for gel electrophoresis"?



    Гость /28.04.2006 15:29/
    Для создателей этих таблиц!!!
    Я даже не знаю стоит ли верить тому что здесь написано...
    Например в таблице расчета "Смесь для окрашивания олигонуклеотидных гелей" расписаны количества реагентов на 100 ml но если все слить так как указано получится 110 ml где ошибка? Для кого это сделано...



    hemul /13.06.2006 17:01/
    Такой вот вопрос про буферы, новичковый. Часто встречаю прописи одного и того же буфера с некоторыми отличиями и добавками. Например, PBS.
    1. Он бывает с калиевыми фосфатными солями, а бывает с натриевыми, или с теми и другими.
    2. В него добавляют NaCl, а иногда KCl.
    3. Добавляют ПЭГ, Tween.
    На что все это влияет? На что влияет концентрация буфера (кроме ионной силы)?
    Чем принципиально отличается PBS от Tris буфера?
    Зачем в буфер добавляют азид натрия NaN3?
    Спасибо заранее!



    ммм /13.06.2006 20:23/
    -- Часто встречаю прописи одного и того же буфера с некоторыми отличиями и добавками. Например, PBS.

    А кто вам сказал что это один и тот же буфер. Это слэнг в некотором смысле, обозначающий рраствор примерно изотонический физиологическому и забуференный фосфатными солями с небольшой буферной емкостью.
    ---Добавляют ПЭГ, Tween.
    Просто PBS с ПЭГ ом и Тв не бывает. Обычно пишут, что PBS с добавками того, сего, пятого.

    ---На что все это влияет?

    На такой вопрос - ответ: на все, и не на что.

    ---На что влияет концентрация буфера (кроме ионной силы)?
    От концентрации буфера зависит его емкость.

    ---Чем принципиально отличается PBS от Tris буфера?
    --"А почему вы спрашиваете?" <c>
    Чем принципиально отличается билистиллят от милипоровской воды? smile.gif

    Вот например такой ответ: трис дороже раз в десять. Или трис более сладкий на вкус.

    1) почитайте учебник по буферам или хотя бы вводную статью в справочнике Доусона.
    2) Почитайте учебник по питательным средам для клеточных культур.
    После этого перезадайте свои вопросы.
    3) И еще какой-нибудь мануал по имунохимии.

    Правильно поставленный вопрос содержит половину ответа.(по этому вопросу обратитесь к рассказу Шекли "Ответчик", кажется называется)

    ---Зачем в буфер добавляют азид натрия NaN3?
    Что бы убить того кто этим PBS будет питаться. Консервант это весьма своеобразный для лабораторного употребления тс.



    ol-ka /14.06.2006 13:02/
    День добрый! Такой вот вопросик: для лизирующего буфера важно значение рН? А то имеется пропись раствора и не указано рН.



    ммм /14.06.2006 20:13/
    Вы что лизируете? и какой материал смотреть будете после лизиса? а так в принципе рН важно, но может быть разным в зависимости от задач.



    hemul /17.06.2006 19:35/
    А кто вам сказал что это один и тот же буфер. Это слэнг в некотором смысле, обозначающий рраствор примерно изотонический физиологическому и забуференный фосфатными солями с небольшой буферной емкостью.

    О'K, это не принципиально. Я искала методику по иммуноцитохимии, нашла энное кол-во. Во всех, понятное дело, принцип сходный, а буферы везде разные. Пытаюсь выбрать подходящий мне.

    --Добавляют ПЭГ, Tween.
    Просто PBS с ПЭГ ом и Тв не бывает. Обычно пишут, что PBS с добавками того, сего, пятого.

    Да. пишут. Так вот, зачем добавляют? Чтобы улучшить проникновение чего-либо куда-нибудь? Улучшают свзязывание чего-то с чем-то?


    ---На что влияет концентрация буфера (кроме ионной силы)?
    От концентрации буфера зависит его емкость.

    Спасибо.

    ---Чем принципиально отличается PBS от Tris буфера?
    --"А почему вы спрашиваете?" <c>
    Чем принципиально отличается билистиллят от милипоровской воды? smile.gif

    Вот например такой ответ: трис дороже раз в десять. Или трис более сладкий на вкус.
    За ответ спасибо. Спрашиваю потому, что есть в одних вариантах метода тот, а в других другой. Надо же выбрать, на каком делать smile.gif
    Про дистиллят, я кстати, тоже не знаю. То есть чем получение отличается знаю, а чем результат - нет.

    1) почитайте учебник по буферам или хотя бы вводную статью в справочнике Доусона.
    2) Почитайте учебник по питательным средам для клеточных культур.
    После этого перезадайте свои вопросы.
    3) И еще какой-нибудь мануал по имунохимии.

    Правильно поставленный вопрос содержит половину ответа.(по этому вопросу обратитесь к рассказу Шекли "Ответчик", кажется называется)

    За советы спасибо. От ссылки на "учебник по буферам" совсем бы не отказалась smile.gif
    ---Зачем в буфер добавляют азид натрия NaN3?
    Что бы убить того кто этим PBS будет питаться. Консервант это весьма своеобразный для лабораторного употребления тс.

    Здесь это вряд ли, т.к. буфером надо пользваться "здесь и сейчас", процедура на несколько часов. Может он (азид натрия) влиять на сохранение клеточных структур?



    ммм /19.06.2006 13:08/
    Ух! Мария, вы просто провокатор.

    ---Чтобы улучшить проникновение чего-либо куда-нибудь?
    Используют вазэлын.
    ---Так вот, зачем добавляют?
    Что бы ухудшить неспецифические белок белковые взаимодействия. ПЭГ просто это интересно(я не встречал) возможно немного увеличивает действующую концентрацию АТ.
    И все это можно почитать в книжке по иммунохимии.

    ---Надо же выбрать, на каком делать.
    Вы работаете в эксперементальной области, использование умозрительных заключений здесь очень ограничено, что бы их делать надо иметь большой опыт с разными препаратами и разными антигенами. А вам надо либо попробовать один вариант и если он вас не устроит искать другой, либо попробовать несколько и выбрать лучший.

    ---Здесь это вряд ли, т.к. буфером надо пользваться "здесь и сейчас", процедура на несколько часов.

    "А мужаки то не знали..."<c> Ну и че? На один препарат буфера уходит меньше 0.5мл, а делают его от 50 до 500мл за раз, шож его в помойку выливать.

    ---- Может он (азид натрия) влиять на сохранение клеточных структур?
    Ну! почитайте, как он действует на ферменты и какие и сами решите может или не может. Его действие аналогично действию цианида.

    ---От ссылки на "учебник по буферам" совсем бы не отказалась
    Любой учебник по качественному анализу для химических специальностей спасет вас. Например Алексеев(хотя формально он не для химиков) Гольбрайх практикум по неорганике и тд



    hemul /20.06.2006 15:37/
    ммм, спасибо вам за ответы на мои провокационные вопросы cool.gif



    dm1 /22.08.2006 21:05/
    В рецепте приготовления ТВЕ приведено довольно странное количество EDTA в граммах (43.84g), которое якобы следует взять, чтобы получить 1 литр 10хТВЕ. Хотелось бы узнать, откуда аффтар взял такой молярный вес EDTA (2192 г/моль)??? :)



    Гость /28.11.2006 18:41/
    Podskazhite, pozhluysta, chem dovodit pH v bufere MES? (2-N-morpholino-ethanesulfonic acid. Dolzhen byt 5.0, a poka tolko 3 :(



    guest: ммм /28.11.2006 19:10/
    --Podskazhite, pozhluysta, chem dovodit pH v bufere MES? (2-N-morpholino-ethanesulfonic acid. Dolzhen byt 5.0, a poka tolko 3 frown.gif

    ---щелочью, его щелочью содиевой.



    alex233 /09.12.2006 01:32/
    ДОбрый день.Мне надо для промывки ткани после окрашивания написанно промывать RBS чем можно заменить попроще может можно NaCL 0,9%?



    Guest /22.12.2006 16:45/
    помимо раствора Леммли ,есть у кого рецепты растворов для экстракции белков из мышечной ткани после теплового воздействия (варки, прогрева до 60 градусов или даже стерилизации) для дальнейшего SDS-электрофореза на фастгеле с градиентом 10-15



    Дилетантка /22.12.2006 16:55/
    Подскажите как приготовить раствор: в 10 mM трис-HCl буфере рН 8,0; 1,0 mM ЕДТА с 2,5%SDS и 5% меркаптоэтанола. Буду очень благодарна



    Aniona /12.01.2007 12:13/
    Здравствуйте! Очень нужен состав промывочного буфера для выделения polyA мРНК при помощи магнитных стрептавидиновых бус. Заранее большое спасибо.



    Dimych /14.01.2007 09:49/
    (Дилетантка @ 22.12.2006 13:55)
    Ссылка на исходное сообщение  Подскажите как приготовить раствор:  в 10 mM трис-HCl буфере рН 8,0; 1,0 mM ЕДТА с 2,5%SDS и 5% меркаптоэтанола. Буду очень благодарна

    Смешиванием запасных растворов (исключение - меркаптоэтанол, он -чистое вещество). Берёте калькулятор в ручки (или бумагу и карандашик) и вперёд. Если не знаете, как посчитать - идите в уборщицы или в журналисты, всем будет от того благо великое, и Вам тоже.

    А, простите за любопытство, для чего такое офигительное количество меркаптоэтанола в растворе применяется?



    Guest /14.01.2007 11:53/
    (Dimych @ 14.01.2007 08:49)
    Ссылка на исходное сообщение  А, простите за любопытство, для чего такое офигительное количество меркаптоэтанола в растворе применяется?


    наверное волосы завивать shuffle.gif



    Дилетантка /15.01.2007 12:41/
    Спасибо господа за джентельменский ответ, господь воздаст вам за доброту вашу.



    Guest /16.01.2007 00:09/
    (Дилетантка @ 15.01.2007 11:41)
    Ссылка на исходное сообщение  Спасибо господа за джентельменский ответ, господь воздаст вам за доброту вашу.

    А какой ответ Вы хотели?

    Ладно, так значить:
    Молярный Трис, рН 8 разбавить в 100 раз
    Полумолярный ЕДТА в пятьсот раз
    10% СДС в 4 раза
    Меркаптоетанол.... Ну зависит от того, какие проценты Вам потребны. Впрочем, я не думаю, что при таком количестве есть существенная разница. Скажем, в 20 раз.

    И того на литр раствора (!):

    10 мл Триса
    2 мл ЕДТА
    250 мл СДС
    50 мл (ну если хочется масс-объёмные проценты найдите в справочнике плотность) меркаптоэтанола (Ужоссс!)

    Полегчало? Кушайте на здоровьице.

    Дело в том, барышня, что такие расчёты должны уметь делать школьники старших классов если они не из интерната для альтернативно одарённых. Если для Вас простое разбавление это великое таинство, то продолжать попросту не стоит, молекулярная биология и биохимия явно не Ваша стезя. Сами измучаетесь и окружающих изведёте.



    Dimychch /16.01.2007 00:11/
    Да, воды, если БМЕ брать по объёму, 688 мл :D



    guest: Dimych /16.01.2007 00:12/
    Да, воду обычно берут как минимум дистиллированую...



    Dimychchchch /16.01.2007 00:14/
    На волосах лучше не передерживать. А Вы правда натуральная блондинка?



    bukach /16.01.2007 02:20/
    (Guest @ 16.01.2007 00:09)
    Ссылка на исходное сообщение  А какой ответ Вы хотели?

    Ладно, так значить:
    Молярный Трис, рН 8 разбавить в 100 раз

    Полегчало? Кушайте на здоровьице.



    и шыш после этого рН 8.0 получится. если грубите, то хотя бы ошибок не делайте при этом.


    Дилетантка, вопрос ваш и вправду детсадовский. но если он не отпал, пишите мне в личку.



    Дядя ФАКСер /16.01.2007 02:41/
    Ну а потом - аккуратненько доводить до нужного рН



    bukach /16.01.2007 03:03/
    исходно этого сказано небыло. с чего запросто можно сделать вывод, что грозный гость скурил коэффициенты активности.

    и доводить с мэ и сдс. хи-хи. чтоб один вонял на всю лабу (а на 5%, да на мешалоччке еще и соседи придут в гости с недобрыми намерениями), а от другого электроды отмывать до посинения. так что не запутывайте деушку )

    сначала трис, эдта и вода (чуть меньше, чем нужно), потом рН, потом мэ и сдс. ну и опять вода до нужного объёму.



    Dch /16.01.2007 03:06/
    Букач
    Что хочу, то и делаю. Это не ошибка, это практика. Довольно общая. Про сдвиг рН при разведении я в курсе, равно как и про температурный сдвиг. Необходимость доведения сильно зависит от целей, с какими буфер применяется, и от того, доводили ли его те, кто методику придумал. Очень может быть, что не доводили. Я для хроматографии не довожу. Белки от этого грязнее не становятся и душа ни фига не болит.

    Кроме того, если девочка задаёт такие вопросы, то разницы для конечного результата вообще нет. Из неё даже лаборант не получится.

    А уж если докапываться до "ошИбок", то "шИш" пишется таки через И.



    bukach /16.01.2007 03:51/
    (Dch @ 16.01.2007 03:06)
    Ссылка на исходное сообщение  Букач
    Что хочу, то и делаю.

    если вы взялись объяснять человеку КАК сделать, то делайте это по-человечески. а с таким подходом лучше б вы просто оставили последний абзац своего поста.
    (Dch @ 16.01.2007 03:06)
    Ссылка на исходное сообщение Это не ошибка, это практика. Довольно общая. Про сдвиг рН при разведении я в курсе, равно как и про температурный сдвиг. Необходимость доведения сильно зависит от целей, с какими буфер применяется, и от того, доводили ли его те, кто методику придумал. Очень может быть, что не доводили. Я для хроматографии не довожу. Белки от этого грязнее не становятся и душа ни фига не болит.

    если методику пишут нормальные люди, то они видят разницу между "буфер с рН 8.0, разведённый во столько то раз" или "буфер с рН 8,0". так и пишут.
    в вопросе было второе. потому ошибка.
    (Dch @ 16.01.2007 03:06)
    Ссылка на исходное сообщение Кроме того, если девочка задаёт такие вопросы, то разницы для конечного результата вообще нет. Из неё даже лаборант не получится.
    А уж если докапываться до "ошИбок", то "шИш" пишется таки через И.

    ну нельзя так. не осуждайте. вполне возможно, что не повезло ей с учителями. может, если б ктонить ей толком один раз объяснил, как это делается, то и проблем бы не возникало.

    и закончим на этом.
    всем сорри за оффтоп.



    Дилетантка /16.01.2007 11:12/
    Большое всем спасибо за ваше участие. Наверное вы правы, господа, биохимия не моя стезя. Попробую себя в ядерной физике, может там мое призвание? А блондинкой я была когда то, но работа с эфирами изменила мою внешность.



    Гость /26.03.2007 15:24/
    p = 1.103 у SSC - уж не ошибка(опечатка) ли? Может всё же p = 1.163?



    Гость /03.04.2007 08:34/
    где не могу понять у Вас натрий фосфатный буфер?



    Yarl /27.07.2007 18:49/
    4 M guanidine thiocyanate, 0.2 M sodium acetate pH 5.0, 25 mM EDTA, 2.5% (w/v) PVP-40 potassiym acetate 1M помогите пожалуйста приготовить



    Yarl /27.07.2007 18:51/
    в смысле сколько добавлять ацетата Na ph 5,0



    Guest /27.07.2007 19:21/
    --в смысле сколько добавлять ацетата Na ph 5,0
    200mM на 1л готового раствора.



    Бору /09.08.2007 08:58/
    В американской методике упоминается буфер Trizma base (Sigma) кто нибуть знает с чего он состоит, можно ли приготовить самомому, или хотябы чем заменить можно?



    le lapin /09.08.2007 10:53/
    Trizma base = Tris base (основной Трис, трис-гидроксиметиламинометан). Только это не буфер, а соль, на основе которой делают буферы.



    Бору /09.08.2007 18:55/
    Тогда это вообще бред какойто:

    "The bacterial pellet was suspended in
    100 mkl of TAE buffer (40 mM Tris acetate [pH 8.5]-2 mM
    EDTA) and mixed with 200 mkl of alkaline solution containing
    3 g of SDS, 0.6 g of Trizma base (Sigma Chemical Co., St.
    Louis, Mo.), and 6.4 ml of 2 N NaOH in 100 ml of H20."

    Сначала забуферивают систему рН 8.5, а потом сразу же поднимают его вверх, при чем опять с испольхованием триса (только с другим названием, видимо чтобы избежать тавтологииsmile.gif ).... Нет чтоб написать сразу - приливаем 300 мкл трис-буфера такогото рН, с ДДС и ЕДТА концентраций соответсвующих.

    Еще один перл, оттудаже

    "The supernatant of the mixture after centrifugation at 16,000 x g for 10 min was
    mixed with 200 mkl of H20 and 50 mkl of 3 M sodium acetate
    (pH 5.2)."

    Спрашивается, а вода зачем? Почему не взять изначально ацетат натрия концентрации в 5 раз ниже? А 3 М раствор ацетата натрия что действительно имеет кислую реакцию, соль то вроде щелочная....



    Гость /24.03.2008 18:20/
    Деионизация формамида (мочевины, акриламида, глиоксаля).

    п.5.хранить при -20C в банке тёмного стекла или завернув в фольгу

    божемой, божемой... мочевину при -20? или акриламид???



    Гость /22.05.2008 12:34/
    По-моему в прописи ТВЕ закралась ошибка, если добавлять ЭДТА 43 г, то он будет не 20 мМ, а более чем 100 мМ, если исходить из концетраций и масс в прописи, то молекулярная масса ЭДТА получается равной 1241 :). Или я чего-то не понял, или это лажа.



    Гость /15.06.2008 12:45/
    пребываю в тихом шоке... понятно, что в науке чаще всего живут интроверты,
    но невозможно же до такой степени упиваться собственной специфичностью!!!!
    к нам же начинающие совсем ходить перестанут



    ИФНС /10.10.2008 14:27/
    Ребята, откликнитесь! Подскажите хороший лизирующий буфер БЕЗ сохранения целостности клеток! RIPA не тянет!!!!!! Если есть что-то скиньте на FIS82@rambler.ru Заранее благодарна



    Ольга_i-v-a /08.04.2009 20:09/
    Помогите пож-та... нужен фосфатный буфер с pH 7,5 и ионной силой 0,05!!! как его получить?? Заранее спасибо!



    Yuri K /08.04.2009 23:24/
    (Ольга_i-v-a @ 08.04.2009 21:09)
    Ссылка на исходное сообщение  Помогите пож-та...  нужен фосфатный буфер с pH 7,5 и ионной силой 0,05!!! как его получить?? Заранее спасибо!

    Tough call ;-)

    pH 7.5 roughly equals the 2nd pKa of the phosphoric acid (7.2). So at pH 7.5 you will have approx. equal concentrations of HPO4(2-) and H2PO4(-). Let us call this concentration X. You will also have potassium concentration that equals 2X+X=3X total. Thus, your ionic strenght equals 3X+X+X^2. Solving the equation

    X^2+4X=0.05

    we find that X=~0.125. So to make 1 L of buffer you have to take 0.125 mole of KH2PO4 and 0.125 mole of of K2HPO4 and adjust the pH to 7.5 with acid or alkali.



    Guest /07.10.2010 10:06/
    Скажите пожалуйста, а при приготовлении ТАЕ 50х можно и спользовать ЭДТА 0,5 М рН 8.0 вместо ЭДТА в виде соли? Спасибо заранее!



    -Ъ- /07.10.2010 10:37/
    В ЭФ буферах ЭДТА только в виде свободной кислоты.



    Guest /07.10.2010 16:34/
    Спасибо за ответ. Можно ещё вопросик?
    То есть присутствие ионов натрия категорически запрещается? Это каким-то негативным образом сказывается на форезе?
    Просто я буфер готовила с добавлением двунатриевой соли ЭДТА и ничего вроде, а тут на форуме в прописях увидела, что ЭДТА надо добавлять не из стока и задумалась правильно ли я его готовлю... confused.gif



    Yuri K /07.10.2010 17:08/
    (-Ъ- @ 07.10.2010 10:37)
    Ссылка на исходное сообщение  В ЭФ буферах ЭДТА только в виде свободной кислоты.

    Впервые слышу, коллега. Там натрия настолько мало, что едва ли он на чем-то скажется. Народ обычно берет готовый ЭДТА раствор из сигмовской банки 0.5 М динатриевая соль, и не берет в голову.



    -Ъ- /07.10.2010 18:37/
    Такой общий ответ. smile.gif
    Криминала, конечно, никакого если используется р-р ЭДТА 0,5 М с рН 8.0.,, но лучше исключить (минимизировать) ионы сильных кислот и оснований из ЭФ буфера.
    К тому же оказалось очень удобно смешивать сухие компоненты буферов (особенно в случае ТБЕ) и при этом я заменил динатриевую соль на свободную кислоту и тем самым снизил рН и ионную силу (проводимость) буфера.



    Guest /08.10.2010 09:44/
    Спасибо за ответ! smile.gif



    Solar7 /27.10.2010 16:51/
    Доброго дня участникам и корифеям! У меня вопрос как раз в тему - нужен органический буфер с низкой проводимостью. Сейчас проверяю натрия салицитат, но хотелось бы избавиться от ионов натрия... чем бы Вы предложили "запаровать" салициловую кислоту, чтобы сделать буфер рН 8.5-9.0, не слишком дорогое и дефицитное? Как вариант, трис? Спасибо!



    -Ъ- /27.10.2010 17:20/
    (Solar7 @ 27.10.2010 17:51)
    Ссылка на исходное сообщение  Доброго дня участникам и корифеям! У меня вопрос как раз в тему - нужен органический буфер с низкой проводимостью. Сейчас проверяю натрия салицитат, но хотелось бы избавиться от ионов натрия... чем бы Вы предложили "запаровать" салициловую кислоту, чтобы сделать буфер рН 8.5-9.0, не слишком дорогое и дефицитное? Как вариант, трис? Спасибо!

    Если Трис не противопоказан, готовите Трис ОН 2М (!!!), это близкий к насыщенному раствор, также готовите максимально концентрированный раствор салициловой кислоты (для удобства тоже 2 М). Смешивая разные объемы эквимолярных растворов готовите 1М раствор Трис-салициловой кислоты нужного рН.
    Я так готовлю 1М Трис-глициновый, то бишь Трицин, буфер с рН 8,5.



    Daemonarchestratygos /27.10.2010 21:49/
    Ах, буфера... rolleyes.gif



    -Ъ- /27.10.2010 23:28/
    (Daemonarchestratygos @ 27.10.2010 22:49)
    Ссылка на исходное сообщение  Ах, буфера...  rolleyes.gif

    Манияк... smile.gif wink.gif



    k204781 /19.11.2010 00:08/
    Подскажите, пожалуйста, как правильно приготовить 0,1 М натрий-фосфатный буфер (рН=8,0, V=500 мл). Столько прописей нашлось, что в голове полная каша! Буфер необходим для биотинилирования белка. И еще вопрос, натрий-фосфатный буфер и PBS одно и тоже?



    -Ъ- /19.11.2010 10:54/
    (k204781 @ 19.11.2010 01:08)
    Ссылка на исходное сообщение  Подскажите, пожалуйста, как правильно приготовить 0,1 М натрий-фосфатный буфер (рН=8,0, V=500 мл). Столько прописей нашлось, что в голове полная каша! Буфер необходим для биотинилирования белка. И еще вопрос, натрий-фосфатный буфер и PBS одно и тоже?

    1. А давайте ваши прописи, лучше одну, обсудим...
    2. PBS - это физраствор в фосфатном буфере.
    Протокол приготовления:
    Р-рить 8 г NaCI, 0,2 г КС1, 1,44 г Na2PO4 и
    0,24 г KH2PO4 в 800-900 мл воды, довести
    рН до 7,4 НС1. Довести до 1л водой.
    Надо ли пересчитывать для 0,5 л? wink.gif



    aszx1237 /28.11.2010 14:50/
    Подскажите, пожалуйста, где можно найти в интернете методики по приготовлению буферов, в частности уксусно-аланинового, глицин-NaOH, фосфат-фосфатного.

    Заранее благодарен.



    aszx1237 /28.11.2010 14:51/
    Или может есть пособие какое-нибудь по буферам



    guest: ммм /28.11.2010 21:46/
    --Или может есть пособие какое-нибудь по буферам
    Справочник биохимика доусона почитайте главу про буферные растворы там вначале теория дается, а потом практика. Для начала вам хватит. А так возьмите хороший учебник по аналитической химии там много про буферные системы написано.



    mora733 /05.04.2012 01:35/
    Извините за такой дилетантский вопрос:

    Можно ли заменить фосфатный буфер Соренсена(0,1 М) с рН 7,2 обычным PBS c таким же рН.Нужен для С-бэндинга хромосом.



    guest: ммм /05.04.2012 07:13/
    Если вы напишите состав обоих буферов рядом в столбик, то сами получите ответ.

    По идее можно



    Вячеслав Б /23.05.2013 14:44/
    Коллеги, ЕЩЕ раз подниму вопрос!
    В прописи ТБЕ буфера действительно ошибка, не может там быть 43,84 г!

    И, написано, ЭДТА рН 8, а коллега-Ъ- говорит, что натрий ни к чему.

    Кто прав? А то я как идиот делал из ЭДТА фри асид соль, добавляя NaOH.



    guest: ммм /23.05.2013 16:29/
    1) Вероятно авторы имели ввиду вес не сухого Трилона Б, а необходимый вес 0.5М раствора ЭДТА рН-8.0.

    2)можете делать из кислоты, но тогда триса больше сыпать придется или боркиса меньше. Но на самом деле 2-5мМ натрия это такие малозначительные крохи, что можно и не забивать себе голову. А 0.5М ЭДТА рН-8 вещь вообще полезная в хозяйстве.



    inessaviv /25.06.2013 19:44/
    Люди,подскажите пожалуйста,где купить трис!В инете не нашла мелкие фасовки,только по 500гр и цена в евро.
    Как определить 10ммоль трис-буфера,как высчитывать?Благодарю заранее.Биохимик начинающий,поэтому туговато jump.gif
    inessaviv@gmail.com



    R.J. Dio /25.06.2013 21:27/
    1) Хеликон
    2) молярность по Трису, в чем проблема? Биохимик -то начинающий, а студент-то конченый? Вас не учили? Аналитики не было? Тогда зачем Вам трис, разводите марганцовку в воде, красиво и познавательно



    guest: ммм /26.06.2013 15:57/
    --Люди,подскажите пожалуйста,где купить трис!
    http://www.vekton.ru/e_sale/?gd=685 ( http://www.vekton.ru/e_sale/?gd=685 )
    Только ч. покупать не рекомендую(хотя для экстрагирующих буферов и он подойдет)
    Покупайте осч или имп. последний уточните откуда и какой марки.

    --Как определить 10ммоль трис-буфера,как высчитывать?
    Пересчитывать надо на молярность триса-основания(мол вес 121)



    ASabina /17.09.2013 09:39/
    подскажите пожалуйста! надо приготовиться ПБС рН=7,2, но при этом к нему необходимо добавить 2,25% глицина. возможно ли это сделать и как (на каком этапе). при добавлении глицина рН очень резко падает до 5,9 и повысить ее никак не почается (5Н НаОХ)



    -Ъ- /17.09.2013 10:15/
    (ASabina @ 17.09.2013 10:39)
    Ссылка на исходное сообщение  подскажите пожалуйста! надо приготовиться ПБС рН=7,2, но при этом к нему необходимо добавить 2,25% глицина. возможно ли это сделать и как (на каком этапе). при добавлении глицина рН очень резко падает до 5,9 и повысить ее никак не почается (5Н НаОХ)

    НСI исключите из протокола.
    А что за ругательская абр-тура, (5Н НаОХ)? confused.gif



    R.J. Dio /17.09.2013 10:37/
    а какой финальный рН должен быть. может, 5.2 как раз что надо?



    LMP /18.09.2013 11:34/
    (-Ъ- @ 17.09.2013 08:15)
    Ссылка на исходное сообщение  НСI исключите из протокола.
    А что за ругательская абр-тура, (5Н НаОХ)? confused.gif


    подозреваю, что это пяти- нормальная щелочь))



    kirush /01.10.2013 06:10/
    Нужно приготовить боратный раствор 200мМ борат натрия, 60мМ НаЦл, 1 мМ ЭДТА
    как для этого растворить буру?



    guest: ммм /01.10.2013 09:15/
    Так 200мм борат или тетра борат. В оде растворять, в воде



    kirush /01.10.2013 11:17/
    Тетраборат (бура) в воде плавает в виде взвеси и не растворяется. Попробывал в кипятке растворить при охлаждении выпали кристаллы



    R.J.Dio /01.10.2013 12:47/
    это не страшно, дайте отстояться и пользуйтесь. Все равно потом все на стенках выпадет, на скорость не влияет








       
Дата последней модификации: 30/07/13

ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

molbiol.ru  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама

molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов   Rambler