Главная страница MolBiol.ru > Орг. вопросы > Для студентов > Автоматическая пипетка Rambler's Top100
ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

Работа с автоматической пипеткой

Автоматическая пипетка – основной инструмент при работе в лаборатории (кстати, и цена у пипетки совсем не маленькая). Её нужно беречь, лелеять и холить.

    Введение.

  • Априори, объем, выставленный на пипетке, равен объему жидкости в типе, только в том случае, если эта жидкость - вода при комнатной температуре. "Особое внимание" (контролировать объем в типе визуально) требуется обращать при отборе:
    1. вязких жидкостей типа глицерина (практически всегда в таких случаях лучше пользоваться весами);
    2. жидкостей с низким поверхностным натяжением, особенно при повторных заборах (детергенты, растворы белков);
    3. холодных и горячих растворов, так как воздух в типе меняет температуру, и, следовательно, объём (растворы ферментов на -20oС, горячие буфера для гибридизации, верхний агар).
  • Автоматические пипетки используют либо совсем неградуированные, либо слабо градуированные типы. С заметной частотой случается, что отбирается неправильный объём (некачественный тип, тип неплотно одет, тип не сразу коснулся жидкости, тип закупорился каким-нибудь сгустком). Поэтому нужно контролировать работу пипетки "на глаз". Речь не идёт о том, чтобы различать 950µl и 990µl, но разницу в 25-30% нужно уметь заметить (не говоря уже о том, что случается, что начинающие путают 200µl и 20µl пипетки).
  • Типчик в пробирке
  • Типчик имеет не только внутренний объем, но и поверхность:
    1. не надо глубоко погружать тип в отбираемую жидкость (особенно в случае вязких жидкостей);
    2. следует обращать внимание, чтобы тип не касался ничего лишнего своей внешней поверхностью.
  • Априори, материал пипетки выдерживает только пары воды. В остальных случаях устойчивость не гарантируется. Особое внимание следует обращать на летучие жидкости. Лучше вообще не использовать автоматическую пипетку при работе с органическими растворителями и кислотами.

    Правила работы.

  1. перед отбором сбросить жидкость на дно эппендорфа (ЦФ). Боковыми стенками типа не касаться боковых стенок пробирки*;
  2. отжать пипетку до первого упора;
  3. жидкость отбирать прямо с поверхности, тип глубоко не опускать;
  4. выдавливать жидкость, отжав пипетку до второго упора (по возможности на стенку пробирки или на поверхность жидкости – лучше не капать и не погружать тип глубоко).

    Для того, чтобы жидкость не попала внутрь автоматической пипетки

    1. отжимать поршень вверх обязательно плавно;
    2. не класть на стол пипетку с надетым типчиком **;
    3. не сбрасывать типчик, в котором есть жидкость.

    ____________________
    * сразу по двум причинам: (i) часто тип укрепляют на пипетке руками, так что внешняя поверхность у него грязная; (ii) на внешнюю поверхность может налипнуть жидкость со стенок пробирки.
    ** тоже по двум причинам: (i) типчик может загрязниться/кого-нибудь испачкать (особое внимание при "чистой" работе (стерильные среды, RNA, PCR) или работе с "опасными" растворами (бактериальные суспензии, радиоактивность, бромистый этидий); если в типе осталась жидкость, то она может затечь внутрь пипетки (если осталось больше 50µl в желтом типе или больше 200µl в синем). НО!!! Растворы с низким поверхностным натяжением (растворы белков, детергентов, фенол, хлороформ, спирт) способны затечь в горизонтально лежащую пипетку даже если их в типчике очень мало.

    Чистка пипетки.

    Если в пипетку всё же попала жидкость, её нужно разобрать и почистить. В первый раз нужно попросить опытного сотрудника, чтобы он показал как это делается (и внимательно смотреть самому, чтобы научиться). Точность пипеток проверяется на электронных весах. В качестве жидкости используется mQ (или дистиллят).

  1. разобрать пипетку*;
  2. промыть её (но не наборный механизм) раствором детергента**;
  3. сполоснуть mQ;
  4. протереть фильтровалкой;
  5. подсушить в термостате 37-42oС, ~1-2h;
  6. смазать хорошей вакуумной смазкой;
  7. вновь собрать.
  8. ____________________
    * очень внимательно отнеситесь к маленькому уплотнительному колечку и подложке для него (чтобы они не потерялись);
    ** если внутри грязь пристала плотно, то для чистки можно использовать толстую нитку с привязанным к ней кусочком марли.

    Дополнение от человека знающего (но неизвестноо).

    Порядок работы с пипеткой сильно определяется тем, какая она, в смысле какой фирмы. Если Вы работаете с пипеткой, на которой объем выставляется вращением ручки, то посматривайте, чтобы выставленный объем не сбился. При дозировании больших серий, старайтесь добится максимальной воспроизводимости движений, лучше сначала потреннироваться на весах, так вы сразу увидите свой разброс. Не выкручивайте на пипетке объем выше ее номинала. При работе с вязкими жидкостями или сорбентами, тип лучше подрезать, чтобы отверстие стало больше.

    Помните, что более дорогая пипетка не всегда более крепкая.



MolBiol.ru: http://molbiol.ru
e-mail: redactor@molbiol.ru
просмотров: 18143

    Дополнения, комментарии, вопросы

    Гость /11.01.2006 01:58/
    Для работы с культурами клеток появились неплохие пипетки фирмы CAPP. Они автоклавируются (не кипятятся, а автоклавируются)!



    Гость /12.01.2007 14:30/
    Если не брать максимально возможный объем, то удобно работать с "мертвым" объемом: на два упора набрать жидкость, на один выпустить (очень удобно, когда надо набрать один и тот же объем много раз. Например, когда заполняем микропланшет конъюгатом или любым другим раствором).



    Доктор Лаб /19.03.2007 15:12/
    Вообще более классическим способом является прямое дозирование:
    Набор на один упор, спуск на два. Так, экономится реактивы и в некоторых ситуациях получается более точное дозирование.

    Обратное дозирование (набор на два, спуск на один) рекомендовано при работе с более вязкими, чем вода, жидкостями.

    Сервисная служба Доктор Лаб
    www.doctorlab.ru
    г. Москва, ул. Петровско-Разумовскйи пр., д.29, стр. 2
    Телефон +7 (495) 614 95 50, 612 03 59, 748 16 13
    Факс +7 (495) 613 55 77



    Дядя ФАКСер /19.03.2007 16:17/
    (Гость @ 12.01.2007 11:30)
    Ссылка на исходное сообщение  Если не брать максимально возможный объем, то удобно работать с "мертвым" объемом: на два упора набрать жидкость, на один выпустить (очень удобно, когда надо набрать один и тот же объем много раз. Например, когда заполняем микропланшет конъюгатом или любым другим раствором).

    Для заполнения микропланшета удобнее использовать степпер.



    Инфекция /21.03.2007 13:24/
    Обратное дозирование удобно еще для всего, что пенится smile.gif (на пиве правда не проверяла).



    orun /26.03.2007 10:56/
    интересно а бывают восьмиканальные степперы?



    крыса /29.03.2007 09:09/
    бывает оч позитивная вещь =)



    Guest /29.03.2007 11:23/
    (orun @ 26.03.2007 09:56)
    Ссылка на исходное сообщение  интересно а бывают восьмиканальные степперы?

    степ функция вроде у многих електронных пипеток confused.gif confused.gif confused.gif



    Guest /29.03.2007 11:27/
    но Дядя ФАКСер прав - лучше с многоканалками не заморачиватся frown.gif
    особенно на маленъких объмах - 5 мкл и меньше frown.gif



    Guest /29.03.2007 11:30/
    степпер с плунжерным наконечником намного точнее любых
    "воздушных" пипеток



    Guest /29.03.2007 11:38/
    во всяком случае не видел "РИСКОВЫХ РЕБЯТ" которые бы собирали миксы например
    для Реал Тайм ПЦР многоканальной пипеткой smile.gif



    Дядя ФАКСер /29.03.2007 12:43/
    (orun @ 26.03.2007 07:56)
    Ссылка на исходное сообщение  интересно а бывают восьмиканальные степперы?

    И не только бывают - но и продаются smile.gif
    Причем в 2-х видах: и как исходно многоканальные, и как насадки к одноканальным.
    Посмотри в каталогах у Eppendorf, например.



    Инфекция /29.03.2007 12:48/
    ПЦР не занимаюсь... Для ИФА хва многоканальных. И обратного дозирования wink.gif



    Guest /29.03.2007 13:03/
    (Инфекция @ 29.03.2007 11:48)
    Ссылка на исходное сообщение  ПЦР не занимаюсь... Для ИФА хва многоканальных. И обратного дозирования wink.gif

    в стародавние времена когда 96-луночные циклеры кушали 50-100 мкл смеси smile.gif
    ну многоканалка - тудасюда - а сычас коды объем смеси 5-10 мкл СТАНДАРТ
    -фиговатенько как-то с многоканалками frown.gif



    Инфекция /29.03.2007 13:48/
    Вы о чем то не о том... 50-100мкл - мой минимум... Из мелкой тары не пью и не работаю



    Guest /29.03.2007 14:09/
    (Инфекция @ 29.03.2007 12:48)
    Ссылка на исходное сообщение  Вы о чем то не о том... 50-100мкл - мой минимум... Из мелкой тары не пью и не работаю

    Везет некоторым smile.gif 50-100 миков а тут иногда и в 2-3 микролитрах реакции гоняеш



    Инфекция /29.03.2007 14:22/
    ага. я и не жалуюсь smile.gif 2-3 мкл - застрелиЦЦца. в другом месте для других целей и 0,5 отбирала регулярно. не понравилось wink.gif



    Guest /29.03.2007 14:27/
    (Инфекция @ 29.03.2007 13:22)
    Ссылка на исходное сообщение  ага. я и не жалуюсь smile.gif 2-3 мкл - застрелиЦЦца. в другом месте для других целей и 0,5 отбирала регулярно. не понравилось wink.gif

    тут не отбирать нужно smile.gif а складывать 1+1 и смешивать frown.gif



    Guest /29.03.2007 14:36/
    (Guest @ 29.03.2007 13:27)
    Ссылка на исходное сообщение  тут не отбирать нужно smile.gif а складывать 1+1 и смешивать frown.gif

    для таких работ я южу "Короткий Фокус" от Финнпипет smile.gif очень
    удобная штучка smile.gif



    Guest /29.03.2007 14:37/
    (Guest @ 29.03.2007 13:36)
    Ссылка на исходное сообщение  для таких работ я южу "Короткий Фокус" от Финнпипет smile.gif очень
    удобная штучка smile.gif

    http://www.thermo.com/com/cda/product/deta...5,15882,00.html ( http://www.thermo.com/com/cda/product/detail/1,1055,15882,00.html )



    Guest /29.03.2007 14:43/
    (Guest @ 29.03.2007 13:36)
    Ссылка на исходное сообщение  для таких работ я южу "Короткий Фокус" от Финнпипет smile.gif очень
    удобная штучка smile.gif

    http://www.thermo.com/eThermo/CMA/PDFs/Var.../File_24596.pdf ( http://www.thermo.com/eThermo/CMA/PDFs/Various/File_24596.pdf )



    Дядя ФАКСер /29.03.2007 16:24/
    (Инфекция @ 29.03.2007 10:48)
    Ссылка на исходное сообщение  Вы о чем то не о том... 50-100мкл - мой минимум... Из мелкой тары не пью и не работаю

    Хм, а мне антитела , порой, по 1-2 мкл разбрасывать приходится ( но- немного smile.gif)



    Cathie22 /17.04.2012 08:21/
    Добрый день!
    Не сможет ли кто подсказать, как разобрать многоканальную механическую пипетку биохит? У нас 8каналка 50-300мкл, в упор не понимаем, как по их инструкции можно "раскрыть механизм затвора и удалить механизм сбрасывателя"... wall.gif








       


Смотри также:
/ссылки на сетевые ресурсы/


Дата последней модификации: 30/07/13

ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

molbiol.ru  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама

molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов   Rambler