Лабораторные ляпы

Материал из Zbio

Перейти к: навигация, поиск

;

Беседа // Coffee_break

Году в 1999 работал я в ранге лаборанта в одном оч. закрытом ГНЦ в Сибири. Доверили мне отцентрифугировать биомассу какой-то еколятины. Банки по литру. Всё взвесил, в ротор поставил, закрыл, включил, ушел на 20 мин. Когда я пришел обратно то в центрифужной стоял непередаваемый аромат сельского туалета с нотками канализации. Дело пахло большими проблемами. Заглянул в центрифугу и понял, что обеспечен работой на день. В камере был приличный слой культуральной жидкости. Всё произошло из-за того, что я не поставил прокладки под крышки банок. Хорошо, что обе не поставил. Поставил бы одну, центрифуга вышла бы на улицу.

/ химик-микробиолог /

Буквально вчера произошел пренаинтересный случай. Ставлю форез. Все как обычно, гель готов, пробы прокипячены, доходит дело до заливки буфера в камеру. Лезу в холодильник, в банке с буфером 125мл супротив 350 положенных. Ну я ясно дело в мыслях крою всех и вся, выливаю остатки в верхнюю камеру, разбавляю 200мл нового буфера и доливаю верхнюю а также заполняю нижнюю камеру. Пускаю ток. Как фронты вползли в гель, "врубаю" машину на 35мА. Жду, фронты бромфенолового откровенно расползаются (что для градиентов вообще-то не типично). Ну думаю фиг тебе, ставлю ток 85- только пузырьки в камере крупные пошли. Поставил 300В (максимум), оказалось, что при этом ток вышел ажн 160мА!!! Тобиж без малого 50Вт тепла рассеивалось на геле! Стало понятно, что что-то не так в датском королевстве, но форез решил прогнать до конца. И тут произошло самое интересное. Убирая со стола банку от буфера я вдруг обнаружил на ней какую-то "не правильную" надпись, оказалось, что это не TGS буфер, а SC буфер (физиологический буферок с магнием, калием и прочей прелестью), да не простой, а 1,7 кратный! Но что самое смешное, основные белки и маркер при этом оказались отлично видны :)

/ plotter /


У меня два случая.

  • Не прошел тест на дебильность - разрезал фирменный пакетик (впервые увиденный) точно по красной линии раскрытия.
  • Поставил колбу с расплавленной агарозой на крышку центрифуги Sigma. След на крышке в РНИПЧИ "Микроб" виден, думаю, доселе.

/ Alex /


В студенчестве был приобщен к великому и могучему радиоктивному сиквенсу. Со старшим товарищем зашел в фотокомнату, где при красном фонаре мне было показано как закладывать рентгеновскую пленку. Т.к. стекла были уже пленки, надо было легким движением обычного лезвия отрезать торчащую сбоку лишнюю пленку.
— Понял? - спросил меня старший товарищ.
— Понял - ответил я.
Через пару дней я вошел в фотокомнату с новым гелем, дабы заложить оный. Все шло как надо до того момента, когда надо делать лишней пленке обрезание. Взял лезвие, начал резать. Туго пошло. Думаю, что счастливчик и взял самое тупое лезвие. Ну, как говориться, штыком и лопатой пробьемся ребята. Минут 10 промучился, но победил я эту пленку. На выходе меня встречает старший товарищ и интересуется по поводу моего долгого отсутствия. Я объясняю, что долго не мог отрезать пленку. Старший товарищ идет проверять мою работу. Через некоторое время он выходит в виде буквы Г, давясь от смеха и држит в руках лист обрезанного картона, который прокладывают в пачке между пленкой.

/ Ренат /


Чистили мы как-то закрома Родины от всяких уж очень старых реактивов. И между делом высыпали банку ОЧЕНЬ старого сефадекса в раковину. Это было что-то. Сантехник дядя Ваня ничего понять не мог - его кишка проходит без проблем, а вода -нет!!!

/ Микробиолог /


А мы элетрика просили починить термостат который бьется током, электрик отказывался на том основании что это в принципе невозможно. В общем когда затащили его в бокс он в сердца сказал смотрите! И взялся одной рукой за батарею другой за термостат. Мы долго потом улыбались ему при встрече.

/ бутанол /


А у нас рабочие этажом выше ремонт делают, так вот они, недолго думая, силовой кабель перерезали, вся кафедра на уши встала: целый день без света, все эксперименты - нафиг, холодильники еле спасли.

/ Anna P. /


Когда я была студенткой у нас был предмет "методика преподавания химии" Относились мы к нему сами понимаете как, но случай со мной был наиглупейший. Стояла задача провести опыты, которые должны проводить школьники на лабораторных и в одном из опытов необходимо было получить сероводород. Я конечно знала, что тягу уже изобрели, но предпочла работать за своим рабочим столом который, между прочим, стоял прямо перед столом преподавателя! Эффект был потрясающий.

/ baymak /


Как то выделял пл. ДНКу. Рутинно, не напрягаясь так. И после высаливания взял и слил супер в раковину. День стоял ясный. Воскресенье. Лето. Ровно минуту расстраивался, а потом забил на это и пошёл домой отдыхать. Надо всё же отдыхать!!

/ sanechex /


Попала мне раз в руки методичка (вузовская), где автор на полном серьезе советовал выматывать ПЛАЗМИДНУЮ ДНК на стеклянную палочку. С крючком.

/ L^2M /


Вот у меня вчера был ляп под названием "человек бассеянный с улицы рассеянной".
Ближе к вечеру пишу хроматограмму на приборе ВЭЖХ с автосемплером, при этом делая параллельно еще не менее трех других дел на разных установках и приборах лаборатории (Юлий Цезарь, блин). Задаю по компу, присобаченному к ВЭЖХ, режим: "склянка №21", нажимаю все соответствующие кнопки и отправляюсь "на новое задание". Прибор пишет сам, я на него не смотрю, только слушаю, как он себя ведет. По звуку - все нормально: семплер крутится, шприц щелкает, насасывая из склянки раствор. Все тип-топ. Через некоторое время иду хроматограмму смотреть на компе (при этом мимо семплера - "с песнЯми", не удостоив его даже взглядом). На компе картинка хроматограммы... Что за черт! Уже все положенное время прошло - и не одного пика! Изолиния. Пишу еще минут пять. Ничего!.. И только тогда догадываюсь взглянуть на семплер. Блин! Склянка стоит в гнезде №22, а "голодный" шприц в недоумении висит над гнездом №21, отчаявшись разыскать в нем заветную склянку с "любимым пойлом".
Я, выходит, целых 25 минут пишу хроматограмму "с пустого места"! В натуре: "...в рукава просунул руки..."!

/ SP /


Короче, по ряду причин начали мы переходить на обеззараживание потенциально инфицированной посуды в растворе перекиси вместо хлорамина. Раньше-то просто пробирки с кровью заливали хлорамином. То же я приказал сделать и с перекисью. Одна лаборантка слабо так сопротивлялась - типа пена же полезет. Я подавил сопротивление и приказал - заливать. А еще туда же добавили и СМС. Через 15 минут я бегал по препараторской и пытался запихнуть эту чертову пену во все раковины, которые были свободны. Эта сволочь никак не желала смываться водой и стояла шапкой в раковине, а в стерилизаторе все прибывала и прибывала. В общем, Мишкина каша.
Сейчас умнее делаем - основную часть материала отдельно сливаем и обеззараживаем в хлорамине, а посуду в перекиси.

/ vb /


А вот у меня был случай. Наэкспрессировал я в E.coli маленьких белочков, почти пептидов. Натурально, последняя стадия очистки - диализ, чтобы от мочевины избавиться. Диализую. Белков нет. Что за черт, думаю. Думал, думал. Где-то на третьи сутки полез почитать, что же это за диализные мешочки я использовал. А они, оказывается, все, что меньше 20 кДа, пропускают!!!

/ tupoi /


Довелось мне почти весь день первого апреля работать на конфокальном микроскопе. Чай, не первый раз, а третий в жизни. И лет пять до этого с разными другими микроскопами работала. В общем, включаю лазеры на полчаса прогреваться, делаю установки в программке, все как положено, без сбоев. А самой сра-а-ашно: вдруг чего испорчу? К тому же инструктаж проходила на другом аппарате, а на этом первый раз, инвертированный к тому же. Ставлю предметное стекло, нахожу фокус на увеличении 5, все нормально, на 10 - тоже нормально, перехож на 40 - картинка расплывается! Может у меня с глазами что? Пробую снова на 5 и 10 - все четко, а на водном обьективе 40 все мутно! Что за наваждение!! Раз пять с одного обьектива на другой перескакивала... Через сорок минут мучений дошло: микроскоп инвертированний!! Обьектив снизу предметного стекла, поетому и масло, и воду капаем снизу, значит и препарат нужно класть ПОКРОВНЫМ СТЕКЛОМ ВНИЗ!!!
Хорошо хоть время не потеряла - за сорок минут лазеры прогрелись. Коллегам рассказала - долго смеялись.

/ Aziza /


Сижу в боксе, раститровываю всякую пакость в 96-луночных планшетах. На каждом планшете несколько групп лунок, в каждой группе – своя схема обработки, время каждой обработки разное, факторы тоже разные, в общем, черт ногу сломает. Автопилот включен.
Тут заходит наша матответственная и начинает задавать какие-то вопросы. Рефлекторно пытаюсь понять, чего от меня хотят. Когда мне это удается – вижу, что хотят какую-то совершенную ерунду, фыркаю "потом, сейчас не мешайте!" – но было уже поздно: автопилот дал сбой. Раскапав взятый в это время в руки планшет, с ужасом вижу, что он перевернут на 180 градусов – соответственно, растворы сменены совсем не в тех группах лунок, что надо. По-быстрому переделать – по техническим причинам невозможно. Педальное ведро… жалко планшета, жаль белков, жаль пол дня своей работы… И что мне стоило сразу фыркнуть, а не вникать во всякую фигню?

/ L-2M /


Давно это было. Примерно 8 лет назад, когда я была ещё зеленой студенткой, не знающей как выглядит полистироловый планшет для ELISA. Я была закреплена за старшекурсниками в лаборатории на нашей родной кафедре. По окончании трудового дня, в ходе которого я ознакомилась с капающей колонкой для афинки, я убирала реактивы в холодильник. И "додумалась!" поставить два планшета с сорбирующимся содержимым, принадлежавших другой группе труженников, на бок, потому что колба видете ли не влазила.
В грехе я на следующий день так и не призналась, потому что от страха парализовало. Людям пришлось ещё потратить день для повторения своей работы.

/ Гость /


Самый большой ляп на работе - это то что я устроил мою жену в "свою" же лабораторию.

/ E. /


У меня был всем ляпам ляп... за месяц до моего убытия в Канаду. Ставлю последнюю in situ гибридизацию. Проявить слайды надо в полном смысле слова - за пару дней до отбытия. Последний Завершающий Опыт... Собраны лучшие слайды и т.д. Напоминаю, что слайды покрывают эмульсией на месяц, а подготовка и сама in situ - это как минимум 4 дня еще. В общем, все делается, торжественно ставится в холодильник. А в нем лежит предпоследняя коробка, которую надо вот-вот проявить. Все подписано мной лично, огромными печатными буквами - дата закладки эпохалки, дата проявки. И вот, делаю я свой Последний Опыт, а на другой день мне надо проявить предпоследний опыт, сделанный за месяц. Перед проявкой коробку со слайдами надо пару часов при комн т-ре подерйжать. Я коробку достаю, пару часов она лежит, я себе проявитель-фиксатор готовлю. Все несу в фотолабораторию. Проявляю я свои слайды и седею на месте - я, будучи убежденной трезвенницей и вообще сторонницей ЗОЖ - уж не знаю - на каком глазу - проявила коробку со слайдами, заложенными накануне. При этом все коробки подписаны правильно. Все даты - все как надо. Как я дуба не дала?

/ zelensky /


Ставлю блот (раз третий за жизнь). Думаю: зачем мембрану сверху на гель класть и пузыри выгонять, если можно вначале ее с фильтровалкой положить, потом гель, потом все остальное? Так и сделал. Законов физики никто не отменял, белки так в губку и ушли, даже не попрощались.

/ tryptophobe /


Маленькая пикантная подробность если бы поменял полюса все было бы норнально... Я лично всегда кладу бумажку мембрану гель и потом еще одну бумажку...

/ Tom1 /


Как-то на заре своей карьеры хорошенько перемешал на вортексе не кислое количество оччччень редкого фермента. Вот уж действительно что было... "...И живые позавидуют мертвым..."

/ _Olatypov_ /


Для флюоресцентного определения триптофана в белке предварительно дисульфидные мостики должно было порезать 2% раствором меркаптоэтанола в щелочи. Маркаптан пришлось для очистки перегнать. И хотя делалось это в изолированной системе и под тягой, работать (а дело было в январе, в Москве) приходилось поздно вечером, когда народ из Корпуса расходился, и с открытым окном. Чтобы приготовить раствор, я пипеточкой насасывал меркаптан из колбочки (что взять со студента-физика) и сливал в стаканчик со щелочью. Час был поздний, экспериментатор утомился - и насосал малость прямо в рот. Ну, промыл сразу пасть раствором соды и теплой водой. Ничего страшного - ольфакторные рецепторы давно уже лежали в глубокой коме. Только немного слизистая губ онемела. А вот когда ехал домой в вагоне метро - вокруг меня образовалась зона отчуждения, какая бродягам и не снилась. Видно было, что народ вполголоса строит гипотезы, но издалека я ничего не расслышал. А жаль! Дома жена меня накормила, положила спать, легла рядом, обняла - и НИЧЕГО НЕ СКАЗАЛА!

/ _Wladas_ /


Как-то, будучи студентом, сделал ляп, который чуть не привел к "гибели человеческих жертв". Нужно было мне в личных корыстных целях бронзу расплавить. Она, в отличие от свинца, на костре не плавится. Пошел на кафедру, где были муфельные печи. Лаборантка - добрая душа - "подписалась" на мои безумные эксперименты.
Достал я из печи тигль с раплавленной бронзой. А щипчики использовал те, что были. Ими народ тиглики с прожжеными пробами всяких растений доставал. Ну знаете, хлипкие такие щипчики. А бронзы грамм 200 было.... Короче, не удержал я тигилек, и он об пол - блямсь!!! С высоты более метра!!! И 200 грамм тысячеградусной бронзы веселыми капельками разлетелись по комнате.... Отличный феерверк получился! Мгновенно переходящий во вспыхнувший линолеум. По счастью лаборантка за моей спиной стояла и до нее брызги не долетели...
Мораль: не вмешивайте личные отношения в производственные нужды!

/ BindingSite /


Выделял вчера ДНКу из микроба на сорбенте с гуанидинтиоцианатом. Достал набор из холодильника, первый р-р, естественно, выкристаллизовался весь. Ну, думаю, надо быстренько погреть, включаю печку на магнитной мешалке (на всю катушку!), ставлю флакончик и убегаю в соседнюю комнату взвесь микробов приготовить. Через некоторое время неспеша возвращаюсь - в комнате вонь дикая, на печке стоит пузырек с оплавившимся дном, рядом с печкой теплая смрадная лужица карамельного цвета, и все вокруг забрызгано (даже комп за соседним столом) каплями и хлопьями пены 1 раствора.

/ afanasev-max /


Заливала эмбрионы в парафин. У нас для парафина стоит "диспенсер", у которого открывается краник, чтобы налить парафин. И то ли был скачок электричества, то ли что-то еще, но парафин лится не хотел, ну я и открутила какой-то винтик в кранике. Все полилось. На следующее утро я обнаружила гору парафина под диспесером. Закрутить винтик обратно я то забыла. Хорошо, что была суббота и никого не было. Зато я весело провела час, разбивая глыбы парафина и отскабливая его от пола, стен, мебели.

/ Viktoria1510 /


Понравилось мне как-то белковые гели цинк-имидазолом красить (кстати, методику здесь вычитала, спасибо, ребята). Всё хорошо, да только хлорид цинка (целая банка) оч-чень сильно обводнённый. Как его из банки выколупывала - отдельная история (даже мысль о чём-то типа скалолазных кошек появлялась). Но самое главное - его же прокалить надо. Ну а у молекулярного биолога отношения с горелками и химиками дружные, конечно, но не в восемь вечера. А гель был важный, а прокрасить хорошо хотелось. В общем, принимаю стратегическое решение греть в микроволновке (ну не всё улетит, так хоть приблизительно будет). Первая попытка (принять хоть какие-то меры предосторожности я всё же догадалась) - ма-аленький бюксик взрывается, предварительно протопив пластмассовый штатив, на котором стоял. Вздыхаю, чешу в затылке, делаю выводы, а красить-то надо. Достаю соврешенно непонятную штуку из толстого-толстого стекла (до сих пор не знаю что это было), внизу что-то вроде подставочки, кверху расширяется - вроде пойдёт. Ну и сыплю туда с трудом добытые обломки хлорида... Поначалу-то всё нормально пошло. А потом и толстое-толстое стекло такой жизни не вынесло. Вонь, конечно, тоже стояла специфическая, но не то, чтоб очень. Кстати, примерно десятая часть искомого хлорида всё же сохранилась (в остатках стеклянной штуки, то что по стенкам было я как-то использовать побоялась) и гель я таки успешно прокравила. Но всё-таки...
Друзья, не пытайтесь произвести безводный хлорид цинка в микроволновке! :-)))

/ Гость /


Как-то раз я очень долго искала протокол для кита. Причем твердо помнила, что пару дней назад убрала его в какое-то надежное место. Все надежные места обыскала - бесполезно. И где же нашла? Правильно, в мусорке. Подсознание работает, однако ;)

/ Xantin /


Вам приходилось иллюировать из геля, вытащенного из мусорки? Кое-кому из моих коллег довелось, но я похлеще отличилась.
Готовила гель к переносу ДНК на нитроцеллюлозный фильтр. Отмывая его от НСl после апуринизации, поленилась надеть перчатку и придержать гель, когда сливала воду из кюветы. Гель, ясное дело, выпал. В грязную-грязную раковину. И, естественно, разбился на несколько разнокалиберных кусочков. ДНК, рестриктазы и, главное, времени мне было очень жалко. Поэтому я его вытащила и помыла в дистиллятике. Потом поставила перенос капиллярным методом (это когда фильтр снизу, а на нем гель и куча туалетной бумаги). Гель я аккуратненько из кусочков составила.
Причем я сильно сомневалась, что перевернула его, как полагается, лицом вниз (или перевернула ли я ВСЕ кусочки). Когда я решила гель снимать, я, естесственно, забыла нарисовать на фильтре карманы. А еще я не могла уже определить, где на моем геле разные дорожки (до того, как он разбился, я на нем, глядя под UV, слабенько, скальпелем отметила линии, по которым, надо будет потом разрезать фильтр, поскольку он предназначался для 3х разных гибридизаций). Короче, взяла я гребенку и по ней посчитала примерно, где какие дорожки кончаются. И загибридизовала.
И знаете, это был мой лучший Саузерн в тот раз: чистенький, с хорошим сигналом. Я вообще давно заметила, что чем поганее все сделаешь (но не специально!), тем лучше оно получается.

/ би-олух /


Ну, гели из раковины - это классика.

/ Mykhaylo /


Согласна с Би-Олух: если все из рук падает и неспециально всякая фигня случается, то потом обычно эксперимент тип-топ выходит. У меня, например, по пятницам все время ну такая фигня твориться, ужас! И когда от собственной тупости и безрукости почти до слез доходит (ну уж так иногда обидно бывает), то это 100%-ная гарантия, что результат будет супер! )))

/ Гость /


"Лучшая 12-цветка получается утром в понедельник" ©

/ Дядя ФАКСер /


Ставили мы Вестерн. И как-то с самого начала Вестерн этот не заладился: сначала гель не заливался, потом – не застывал; потом форез на крайних дорожках пошел наперекосяк; потом случайно отрезали дорожку с положительным контролем… После полного набора героически преодолеваемых трудностей отправились мы в фотобокс, повесили на дверь табличку "Не входить" – естественно, кто-то эту табличку не заметил, и открыл дверь (хорошо, та еще и одеялом была изнутри завешена). После возмущенного крика коллеги; "Ну кто там прется? <и далее по тексту>", – сопровождающегося моим зверским рявканьем: "Стоять!!!", – дверь быстренько закрылась.
…ну, вроде все – экспонировали, проявили, закрепили; выходим мы с этими пленками на свет. Нет сигнала! Точнее, есть – но доброго слова не стоящий.
Шо такое? Беру мембрану, иду обратно в фотобокс, смотрю на нее – светится. Вот только кто ее знает, хорошо она светится – или не очень: раньше мембрану разглядывать нам как-то в голову не приходило – соответственно, сравнивать не с чем. А позитивный контроль, напоминаю, в мусорном ведре лежит.
Отмываем, наносим антитела к loading-контролю. Идем в фотобокс, экспонируем, проявляем, закрепляем. Смотрим на мембрану. Светится. Выходим из бокса, смотрим на пленки – картина еще непригляднее, чем в первый раз: местами какие-то неразборчивые попытки проявиться; да и то – заметили мы их только потому, что нам ну очень хотелось хоть что-то увидеть. Пересчитали все растворы – все правильно. Проанализировали все этапы большого пути – все правильно. Да что ж это происходит такое?
и тут мы посмотрели на ванночку с проявителем. А он – зверского темно-красно-коричневого цвета. Ну, зараза…

/ L-2M /


Новенький зеленый студентик ненароком раздавил емкость с РНказой А в ПЦРной лабе, и решил все убрать пылесосом (Без хепа фильтра, очевидно взял из кладовки уборщиц).
Пришлось все деконтоминировать! ВСЕ! и менять новенькую лабу после кап-ремонта на черт знает что! Студентика без вазелина долго делали! В итоге он ушел.

/ Comrad600 /


ИМБ, развитой социализм, заря советского ДНК фингерпринтинга. Стоим на лестнице с Лялечкой, курим. Подбегает какой-то стажер из прокуратуры, В РУКЕ кусок ваты - Ляля, это вата стерильная? - Нет, не стерильная. - Ага, понял. - Убегает, через минуту опять - Извините, а эта вата стерильная, я у Луканидина попросил? - Нет, и эта нет. - Все понял, спасибо. - Через минуту опять - Ляля, а ЭТА вата стерильная?! - К этому моменту там уже собралась толпа зевак.

/ Midgardsormen /


Собрался тут у нас один эфир перегонять. А он только из бочки, перекисей взрывоопасных, воды полно. Сушит, запихал туда гидроксида натрия, холодильник обратный подключил. Тут заходит завлаб, туда-сюда, пятое-десятое, о погоде, о молодёжной моде. И вдруг глядь на эфир и говорит: "А, эфир сушите, уже и кипятить поставили?" Но плитку ещё никто не включал. Он сам по себе кипит, воды куча, щёлочь гидратируется экзотермически. Завлаб продолжает спокойным тоном: "А, ну ничего сташного, вы кастрюльку с холодной водой поставьте, он и успокоится". Мы успели только наполнить кастрюльку. И когда горе-перегонщик подносил её к колбе, эфир в ней пришёл в неистовство, пошёл в холодильник, который красиво вместе со шлангами, как ракета на старте, взмыл в потолок и приземлился на стол обратно. Слава Богу, что в этот момент в лабе не было включенных плиток.

/ _himik_ /


У меня было что-то наподобие. Я делала in situ гибридизацию, и для приготовления РНК-пробы "старший товарищ" дал мне плазмидку, инструктировал по какому сайту резать и какой полимеразой транскрибировать (там было два промотора для транскрипции в разных направлениях, получались комплиментарные цепи) и уехал на несколько дней. РНК есть, гибридизую третий раз - никакого сигнала. По приезде допрашиваю его - так и есть, не тот сайт, не та полимераза, я синтезировала сенс-РНК, я не антисенс. На что виновник прокомментировал: "Зато какой у тебя надежный негативный контроль".

/ Alice /


Ну раз про хроматографию разговор зашел, то вот вам примочки раз и два - мониторинг выхода белка на 280 нм когда а) белок не содержит ароматики-триптофанятинки и б) элюция идет имидазолом с никелевой колонки.
Но один из самых моих любимых ляпов это когда я еще аспирантом помогал одной новенькой troubleshoot ее gene disruption в дрожжах. Типа обложились чашками, проверяем сработал ли PCR соответствующей кассеты, обсуждаем сравнительные достоинства электропорации квадратным импульсом и экспоненциальным и их обеих с литий-ацетатной трансформацией, длину гомологических участков и частоту рекомбинации. И тут после часовой и сильно ученой дискуссии мне приходит в голову спросить, а так чиста из любопытства - ты пытаешься выбить функцию гена какого - HIS2 - вставкой, содержащей что - HIS3 - с последующей селекцией на рост в отсутствие гистидина в среде, так? Да они же оба работают в биосинтезе гистидина... Берем линию HIS2 his3 и делаем из ее his2::HIS3, все равно на his- расти не будет. А так я прям Спиноза...

/ Midgardsormen /


У нас, химиков, сложно с микролитрами. Во всяком случае поначалу. Уж больно величина подозрительно маленькая. Ну и поручили как-то химику-отличнику закапать полмикролитра фермента в рестрикцию. Он и закапал. ПолМИЛЛИЛИТРА.

/ artemboudilov /


Загадка (тоже 1980-е) - почему у корейского аспиранта биофака МГУ бааальшие красные руки и бааальшой сопливый синий нос? Патаму, что он выделяет митохондрии. Перетирая клетки в жидком азоте. А митохондрии все не выделяются и не выделяются. А он перетирает и перетирает, в холодной комнате, в ступке с пестиком. Сильно старается, не сдается настоящий коммунист-чучхе. Одно плохо - нету в E. coli митохондрий...

/ Midgardsormen /


В центре, где я сейчас нахожусь, в каждой лабе есть краник с дистиллированной водой, а вдобавок к этому, в отдельной комнате есть краник с дистиллированной водой сверхвысокой степени очистки. Так вчера один студент забил перекрыть этот краник вечером, и затопил пару комнат. На утро, когда он пришел, его мягко так пожурили: Чего же ты сволочь наделал - литр этой води стоит дороже литра водки. А водка тут, надо сказать, очень дорогая.

/ TVB /


У нас сотрудница в лабе есть. Взрослая вроде тётечка, но бывает - как отмочит что-нибудь... Недавно заходит утром ко мне в комнату, в руке - пробирка с ночной культурой E.coli. А надо сказать, что мы работаем с одной плазмидой не очень высокой копийности, ну штук 10 на клетку. Так вот, поднимает она пробирку к глазам, смотрит на свет и изрекает: "Вот, посмотри, как у меня много наросло. А вы говорите - низкокопийная, низкокопийная..."

/ izzabella /


В студенческие годы работал я в одном московском институте. Во всей лаборатории работала одна тяга, и под ней половину места занимала стеклянная дура со странной зелёной жидкостью, закрытая стеклом.
Я маялся-маялся, потом пошёл к лаборантам и спросил, что это за зелёнка такая и нельзя ли с ней что-нибудь сделать, а то места нет совсем. Лаборанты ответили, что это - произведение рук бывшей старшей научной сотрудницы, кандидата наук. Она на досуге вознамерилась сделать хромпик, чтобы помыть посуду, и смешала бихромат калия с соляной (!) кислотой, и когда оттуда повалил дым, спаслась бегством. Лаборанты быстро закрыли это дело стеклом, но открывать уже не решались.
А ерунду я эту потом вылил в специальный колодец во дворе, замурованный в кустах и всеми забытый. Так мы и шли - я с пятью литрами "хромпика" на вытянутых руках, а передо мной лаборантка в белом халате дорогу расчищает.

/ _Kostia Inochkin_ /


О математике. Недавно колабораторы удивили. Приехали жаловаться - у них микроэрреи не получаются. Разницы нет между контролем и опытом. Долго говорили, пересчитали все данные с самого начала. Оказалось следующее: люди берут конроль - красят его Су5, берут опыт - красят Су3, ставят гибридизацию в 3х повтороностях. Потом делают дай-своп - 3 повтороности, но теперь у них Су5 - контроль. Считают для каждой повторности соотношение Су3Су5, берут от него логарифм, а потом все 6 колонок складывают и устедняют - опа! Результат 0. Невдомек, что логарифм первого соотношения положительный, а у дай-свопа отрицательный. Числитель со знаменателем поменять забыли. 2 месяца вся лаба 1 на 1 делила и все у них разницы нет. Даже смеяться неудобно. Индуса - постдока уволили за это.
А гибридизация у них хорощая была - все ровненько к нолю сходилось. Почти без разброса. Всем-бы так...

/ Гость /


Когда осваивали только входивший в моду метод ИФА (ELISA по русски). Реактивы и фермент получали в красивых баночках. Вот мой коллега и учитель (ныне проф и пр.пр.пр.), любивший все делать сам ручками очень долго не мог поставить данную реакцию (а делал он первый в нашем институте, а может и стране (шучу)), ну кто из русских будет читать инструкцию, а тем более то, что написанно мелким шрифтом? Через несколько месяцев, лаборатория была оглашена счастливыми воплями!?! Дело в том, что ОФД (хромоген-субстрат) находился в маленьком флакончике, в нутри большого с наполнителем типа селикогеля или еще чего подобного и наш доХтор ставил реакцию с наполнителем. После этого реакция пошла на ура!!!

/ CowDoc /


Сижу я за своим бенчем, мышь потрошу, а рядом китаянка-текнишен суетится: сделет раствор, посморит на свет - выльет в раковину...Повторяет этот протсесс несколько раз. Наконец уходит, чераз 5 мин приводит свою подружку - другую китаянку-текнишена, они вместе опять накладывают из баночни что-то, разводят водои, смотрят и громко обсуждют по китаиски, судя по интонации, матерятся.
Я наконец-то освободился, подхожу к ним: они показывают мне раствор голубого цвета и спрашивают: "Разве раствор триса в воде голубой?". Я смотрю на раствор и сам недоумеваю - голубая такая жидкость, спрашиваю показать банку с трисом... да это она самая, вчера сам делал буфер, насыпая из этои банки...Тем не менее решил отрыть и посмотреть, смотрю и вижу внитри следы синего порошка - кумасси...Оказалось, наша новая посточка из Польши делала растворы утром, и использовала один шпатель для накладывания разных порошков...#!@!ъ!@! ее мать!

/ MHC II /


На днях ко мне заходил молодой человек из соседней лаборатории, физиолог. Выдал фразу: зачем в молекулярно-биологической лаборатории белок? Белок -- это такая неправильная ДНК.

/ Jozh /


Вам бы все хиханьки, а умные завлабы за иные ляпы увольняют, и правильно делают, потому как опасно для самих "ляпопроизводителей" и для окружающих. Еще студентом работал в одном месте. Мне "в наследство" достались пара мешков с дохлыми крысами, замоченными в формалине. Чем пичкали - непонятно, но "фонили" они как чернобыльский реактор. История о том, как я их уничтожал - очень веселый рассказ. Конец истории не совсем веселый. Человек, который этим проектом руководил, умер от рака (не старый еще). Девочка, которая непосредственно делала работу, умерла от рака. Одинаковые формы рака были у обоих. Может совпадение.

/ Guest /


[править] Медики

В свое время сотрудничали мы с медиками, работа была по плаценте. Плаценту эту самую медики исследовали на гистологию, а мы — на ферментативную активность того и сего, выделяя, вдобавок, ДНК и РНК. Естественно, образцы этой самой плаценты следовало отбирать практически немедленно после отхождения, т.е. непосредственно в родзале, и сразу же глубоко морозить (в смысле, в азоте). Для каковой цели мы притащили в роддом (при одном из минздравовских НИИ!) дьюар с азотом и поставили в предбанник родзала (дабы недалеко было ходить). Через какое-то время поехали за пробами.
Заходим в помещение — дьюара нету. Пошли выяснять. Местные сообщают: "А мы его переставили" и ведут почему-то в туалет. Стоит там наш дьюарчик, по непонятным (нам, естественно) причинам накрытый всевозможными тряпками. На недоуменный вопрос "Почему!?!" был получен ответ: "Азот испаряется и так воняет. что невозможно дышать".
Так что в системе минздрава работают, оказывается, исключительно инопланетяне, для которых земная атмосфера, содержащая, как известно, порядка влсьмидесяти процентов азота, невыносима.

/ L^2M /


По поводу испарения азота, зря Вы смеетесь. Он, конечно, не воняет, но кислород вытесняет о-го-го как. После пары трагических случаев (асфиксия наступала мгновенно), в институтах MRC введены очень строгие правила по содержанию азота: например, в лифте азот ездит исключительно без сопровождения (с очень смешной табличкой "на груди"), а в помещениях, где хранится хотя бы один бак, обязательно должны находиться датчики кислорода. Правда, однажды я нашел рядом с одним таким датчиком записку (написанную на полном серьезе): "Если Вы пришли сюда на выходных, и он (датчик) пищит, пожалуйста, выключите его из розетки. Спасибо".

/ a11 /


Запахом азота навеяло. Не знаю, как российским производителям сухого льда это удаётся, но он ТАК ВОНЯЕТ что в лабе коробку открытой держать невозможно. Особенно, если там сначала было много сухого ляда, а потом он испарился.

/ Lesha /


Получаем мы образцы плаценты. Замороженные в азоте, все честь по чести, начинаем работать... и видим — явно что-то не то: у меня — все ферменты на нуле, у коллеги — вместо РНК такое идет, что неизвестно, как это и назвать. В общем, начинаем выяснять, шо за пробы. По сопроводиловке — вроде, от нормальных рожениц. К счастью, у шефини появилась трезвая идея: уточнить, как же эти пробы отбирались. Оказалось: непосредственно после отхождения плаценты вырезалась проба и незамедлительно переносилась в ФОРМАЛИН!, что для основной массы медиков, в общем, является мерой, полностью обеспечивающей абсолютную сохранность всего и вся. А раз уж у нас такая странная фантазия — получить пробы замороженными, то фельдшеру (или кто там эту пробу отбирал) не сложно через час-другой-третий перенести все это в азот.

/ L^2M /


Навеяло топиком про колиные ОД. Есть у нас коллабораторы в медицинской среде. То ли микробиологи медицинские, то ли медики микробиологические, не знаю даже, как это чудо назвать-то. Люди своеобразные - то штаммы перепутают, фигню какую-нибудь пришлют (раз эдак 5-6 уже было; вершиной стало письмо от прошлого месяца - Мария, не работай с тем мутантом, который я тебе на этой неделе прислала, я его еще раз проверила - это не S.aureus, а S.epidermidis), то еще чего такого натворят.
Так вот. В самом начале моей работы выдали мне они штаммы, выдали свои результаты, которые ясно показывали, что интересующая меня РНА имеет максимум экспрессии при ОД=1,5. Ну я, как человек культурный, делаю кривую роста, все как положено, собираю клетки при той ОД, при которой велено - и ни фига!!! Ну, думаю, где-то я лоханулась - переснимаю кривую, переделываю экстракты - то же самое. Помучалась я с этим делом изрядно, после чего наконец додумалась спросить - а скажи-ка мне, Ивонн, а клетки-то ты разводишь, когда ОД меряешь? На что получаю ответ - а зачем?!
Короче, выяснили мы, что ее 1,5 соответствует ранней стационарной фазе, и, соответственно, моим 9! Ух, как я ругалась...

/ _Masha1_ /


"Медики в науке".Старательная девушка-врач сидит за ламинаром и сажает клеточную культуру. Дело происходит в пятницу в все в лабе хотят побыстрее разделаться с клетками и побыстрее свалить домой. Поэтому я стою поблизости и жду своей очереди. Девушка вытаскивает пробирки из ламинара и идет открутиться на центрифуге в соседнюю комнату. Осадила клетки и по дороге обратно к ламинару откручивает у пробирок крышки и лихим движением руки выливает супер в ближайшую раковину (мы там обычно руки мыли). Тут я немного офигел и начинаю лопотать про ламинар, стерильность и прочую ахинею. На что девушка мне гордо ответила: "А я всегда так делаю".

/ Sergeant /



[править] Пипетки

Что-то вы все крутые какие-то... Даже ляпы какие-то... гениальные.
А вот хотите историю про махрового дебила? Никто из вас на заре своей научной юности не додумался пипетман водопроводной водой вымыть и дистиллировкой сполоснуть как обычную стеклянную пипетку (т.е. полностью, "с ног до головы" водой)? А вот со мной и такое было. Мне ж никто не объяснил, что их не моют, а своих мозгов как-то не хватило.

/ Ночной гость /


На заре деятельности никак не мог совладать со сбрасывателем на пипетмане. Палец, что называется не заточен был. Так рукой и снимал. Вызывая смех у более опытных коллег. А сейчас, активно пользуя ТермоСистемовские пипетки, словно в молодость вернулся

/ _M/A/E_ /


Про скрытые возможности пипетмана: мне рассказывали про студента, который пользовался пипетманом БЕЗ ТИПОВ, мол, он же и так раствор набирает.

/ Alice /


В соседнюю лабу взяли китайского ПОСТДОКА. Чего-то он начал замешивать, через некоторое время давай жаловаться, что пипетка не работает. Оказалось, он просто не знал, что белые варвары носики сменные придумали, так и игнорировал это чудо враждебной техники :-)

/ NIck /


Про автоклавируемые дозаторы.
Покупали мы как-то автоклавируемые дозаторы фирмы CAPP. Хорошие такие дозаторы, для культуры клеток то, что надо. Так нас на фирме предупреждают,Вы, говорят, их только не кипятите. Мы в шоке. Как, говорим, так? "Да к нам клиент позвонил, притензии предъявил, дозатор не работает. Почему, спрашиваем. Получаем ответ:"А я их прокипятил, они ведь автоклавируются".

/ AOL /



[править] Термостат

Термостат на 37°C у нас стоит в коридоре, один на несколько комнат. Там же, где и холодильники, сухожжарка и т. д. А мы люди добрые и не отказываем коллегам из других корпусов. Так вот, некая дама послала своего студента поставить в наш термостат 3 баночки из какого-то пластика с эппендорфами. Ну он поставил, только не в термостат, а в сухожарку (160°С). Как перепутал?... А эксперимет был очень ценный, дама очень переживала.

/ Anna P. /


Дело происходило в московской вет. академии на кафедре генетики. Надо сказать, что после перестройки в нашем ВУЗе прекратились почти все научные работы. Так вот, совсем недавно кафедра генетики решила возобновить свои былые работы на дрозофиллах. Ну купили, подобрали условия: сушильный шкаф почти у самой дверцы при минимальной температуре. Вести линии дали вновь прибывшей лаборантке. Мухи, сушильный шкаф, у самых стенок при максимальной температуре сушильного шкафа.
Пришлось покупать новых мух.

/ AOL /


Про испарившийся пластик. У нас в лабе ремонт был, и все вынесли, а сушильный шкаф тяжелый такой зараза - его и оставили, ток контактный термометр вынули. А потом когда ремонт уже закончился, но обратно еще не переехали - шкаф-то тут, ну лаборантка в него пластик стерелизоваться и поставила. Ну откуда ей знать, что там еще каккой-то термометр должен быть. В общем, когда на утро пришли - нет, в шкафу была пара цветных блямб... но большая часть пластика улетела в воздух. до сих пор представляю как он красиво осел у нас в легких...

/ glafira /



[править] Автоклав

У нас в лабе один товарищ есть, к слову сказать, очень даже хороший, но вышел тут с ним один казус. Он имеет привычку автоклавировать "на ночь" поставит и уйдет спать - автоклав сам отключится, а с утреца уже все готовое. Мысль хорошая, но автоклав продувать надо 10-15 минут, т.е. первые 10-15 надо открыть клапан и дать пару выходить. Ну так вот однажды клапан-то он открыл... и ушел. Утором был сцена: он автоклавировал Бэкмановские пластиковые стаканы на 250 мл (дорогие, блин). Они просто ВЫТЕКЛИ через клапан. Надо обратить внимание, что для этого им сначала надо было перейти в ГАЗООБРАЗНОЕ состояние!!! Под клапаном была затвердевшая лужа пластика. К автоклаву было просто не прикоснуться, но - СЛАВА СОВЕТСКИМ АВТОКЛАВАМ: его просто помыли хорошо и он успешно продолжает работать!

/ Anton Markov /


Как Вы преставляете себе пластик в газообразном состоянии? Это же полимер...

/ Alice /


В умелых руках и полимер передет в газ....

/ Tom1 /


To Alice: Я - не представляю, но это факт

/ Anton Markov /


Автоклавирование сахарозы мне навеяло, как на СЭС, где я очень давно работал, отличилась одна практикантка. Автоклаверы регулярно вместе с растворами на 1 атм. варили себе сгущёнку в банках. Банка выдерживала , только слегка округлялась. Сгущёночка получалась нежная и вкусная. Но тогда в Москве появилась сгущёнка из прибалтики, банки для неё были более тонкие. Практиканка этого не знала и подложила 3 баночки. Не выдержали банки. Этот автоклав потом долго отмывали.

/ zmich /


Ну, у меня тоже был роман с автоклавом. У нас в институте на автоклаве сидела одна бабонька, которая автоклавировала все, что ей приносили, не меньше часа при 1 атмосфере и выше. Народ в голову лишнего брал, радовался тому, что есть, но у меня были среды с сахарозой, и эти веники мне не подходили. А на компромисс бабанька по одной только ей известным причинам не шла. В общем, я договорилась в одном отделе, где был свой автоклав, которым никто не пользовался, что они меня будут пускать к себе. И вот в один прекрасный день я собираюсь ставить свои колбы в автоклав - как приходит ко мне подруга, микробиолог, кстати, со своей бедой - муж рога наставляет. Ну вообще-то я об этом знала, и все об этом знали, это она, как и полагается, узнала последней, но она была в таком убитом состоянии, что моя жалостливая душа тоже заразилась, правда! Она так убивалась, что я в полном обалдении поставила свои колбы, включила автоклав и мы с ней ушли. 3 часа мы ходили по городу, я выслушивала все новые и новые леденящие душу подробности - как вдруг подруга сказала - ой, у тебя же там автоклав. Это она преувеличила, потому что к тому времени точннее было сказать - у тебя там БЫЛ автоклав. В общем - не буду вас утомлять видом развороченного перегоревшего автоклава, стен, покрытых копотью и лопнувшей колбы со средой.

/ zelensky /


Моя боевая карьера в лаборатории началась с успешного автоклавирования 5N NaOH. Интересно, что при этом из автоклава ничем особым не пахло. После процедуры в растворе появились некие полупрозрачные сопли :-)

/ _Anchan_ /


К историям про автоклав. Случилось это в ранние 90-е, когда приходилось мыть пластик 10 раз, а потом кипятить 3 раза в дистилляте. Так вот мой приятель поставил ведро носов и пробирок кипятиться и как полагается забыл, да и дежурный по кафедре уходя не проверил и все запер. Утром нам представили результат - аккуратный блин на дне ведра, а про то как приежали пожарники и "прорывались" сквозь завесу едкого дыма нам уже рассказала вахтерша.

/ _ZKA_ /



[править] Разные приборы

Однажды в один прекрасный летний день автосэмплер CombiPAL, что установлен у нас на ГХ/МС и предназначен для автоматизированной экстракции и введения пробы начал ломать иглы (1 шт ~ 100 евро). После первой иглы мы подумали: - Бывает! - подняли правую руку, махнули ей вниз и продолжили, - фиг с ней!
После второй иглы мы призадумались и выяснили, что используем другие пузырьки теперь, подумав так, мы запихнули их подальше и заказали старые + новые иглы. Описанное заняло недели две... После третей сломанной иглы мы призатумались о процессе поломки, как это все происходит. Решили понаблюдать. Но как только мы стали наблюдать автосэплер прекратил ломать иглы...
После 3-х дней наблюдения и сотрясания лабы возгласами "Су..., б...!" и "Маза фака" процесс поломки был зафиксирован от и до. Еще неделя ушла для перепзиционирования движений автосэмлера и всяческих тестов. После 5-й иглы и месяца маеты мы сказали: - Наверное чипу пришла хана! ... и коллега голландец веско добавил: - С..., б...!
Вызвали мастера с фирмы, рассказали ему все описанное выше, особенно гордясь тем, как мы догадались что это микрочип пробивает время от времени, он покивал головой, хитро поглядел куда-то внутрь "руки" автосэмплера, пощупал там чего-то указательным пальцем. Оказалось что там внутри такая резиновый шнурок, чиста как в трусах, который помогает вытягивать иглу из резиновой септы крышки пузырика... Шнурок немного растянулся со временемт так что игла не вынималась полностью в то время как "рука" уже начинала двигаться в сторону - игла гнулась при этом...
И последнее, шнурок стоил 5 евро!

/ Urrу /


Рассказываю со слов очень близкой знакомой. Заходит она в лабу одного института, разговаривает со знакомой, а рядом девочка возится с рН-метром и страшно ругается, что рН-метр сегодня хреново работает и показывает не то, она разворачивается и видит, что электрод измерения находится в образце, а электрод сравнения в растворе сравнения. Она долго смеялась, но печально другое они всегда так работали.

/ ALT /


Пришел к нам мужик обслуживать спектрометр поглощения (UV-VIS absorption). Включил, сунул клочок бумажки в кюветное отделение - а нету света! Пошел перепугал шефа. Два(!) часа они с шефом как заведенные разбирали и собирали прибор, и только потом осознали что аппарат настроен на 405 нанометров, а свет с этой длиной волны человеку не виден, ибо ультрафиолет. Перестроились на 500 нм (зелёный свет) - всё заработало!

/ LeeLoo /



[править] Приготовление растворов

Делала как-то раствор для гибридизации in situ на N,N-диметилформамиде, вместо формамида, раза 3 переделывала.

/ gostya /


Взвешивал я как-то фуксин (краситель), рядом кипятились в ведре халаты всех сотрудников лаборатории. После легкого чиха все халаты, а в последствии и сотрудники, стали нежно-розового цвета.

/ бутанол /


Готовила я буфер с 10% глюкозы. Взвесила 200 г глюкозы, добавила трис и ЕДТА, налила водички, а глюкоза то и не растворяется, зацементировалась. Смешно, да.

/ Esya /


А вот, кстати, недавний классный ляп студента. Я попросил его сделать два буфера - идентичных, только один с сахарозой, другой - без. Он сделал, проавтоклавировал, а подписать забыл. А я ему говорю - фигня, мол - сообрази быстро, как их подписать. Только языком не лижи, так неинтересно, а если бы там не сахароза была, а метризамид, например... Ну, он понапрягался полчасика да и сообразил-таки.

/ Veshka /


Вот, еще одна байка про Голландцев. Все супергениальные, и никого не убедить с первых десяти попыток. Но иногда такое отмочат. Вот, к примеру, наш PhD-студент Pieter (просто Петя) воюет с сухим молоком. Час растворяет, другой.
Подходит ко мне - в своей манере «про между прочим», а, мол, какое молоко ты для вестерна пользуешь?
Я в ответ: "Такое же как все - Марвел..."
- Tак ведь оно не растворяется!
я поглядел - да, нет, вроде бы все растворилось, комков нет... потом до меня доходит.
- Ты чего, говорю, ожидаешь?
Tот отвечает
- Ну, раствор молока...
Ты, знаешь, что такое раствор?
- ПРОЗРАЧНЫЙ! А НЕ КАК ЭТОТ - МУТНЫЙ!
тут уж я не выдерживаю, начинаю ржать:
- ТЫ, говорю, МОЛОКО КОГДА-НИБУДЬ ВИДЕЛ?!!

после этого я во всех методиках написал: "Растворять сухое молоко, до тех пор, пока оно будет похоже на МОЛОКО".

/ Oleg Klychnikov /


В нашей лабе есть юниор сциентист, из весьма престижного колледжа, он правда в университете ещё не обучался и вобще собирается в medical school, но вот у него cpm вполне себе отрицательное значение могут иметь.

А шеф рассказывал историю про товарища, у которого DNA не выделялось чего-то (если я правильно помню), по протоцолу надо лить 30% Et-OH ну он и льёт... правда потом вияснилось, что он считал % несколько иначе, чем обычно люди считают... он просто был уверен, что "200 proof" написанное на бутыли, - это и есть проценты.

/ n /



[править] Точно, солянка

Когда студенты на практикумах требуют 100%ый HCl, это еще можно понять. Но вот сегодня заглядываю под тягу и вижу стеклянный пузырек с подписью "100% HCl". А студентов у нас в лабе давненько небыло. Хотя, может все же, тяжелое наследие.

/ _Dimych_ /


Вы просто не поняли. 100% HCl это не концентрация, это значит, что человек, который наливал ее в бутылку уверен на 100%, что это HCl, а, скажем, не KOH.

/ _GOG8_ /


Да, действительно... Типа: "Б... буду, солянка!!!" Я как-то не догадался сразу.

/ _Dimych_ /



[править] Подписи

Шеф смотрит на пробирку с надписью "ХЗ"
— Что у тебя там?
— Эээээ, неизвестный фрагмент
— А где фрагмент Икс-два?

/ Гость /


Чуть с ума не сошел. Генотипирую несколько десятков моллюсков по новым для меня локусам. Долго анализировал форезы, все хорошо, есть результаты – есть чем порадовать руководителя, один локус вариабельный, другой практически нет, как-то аллели распределены. Но нет пределу совершенству, что-то маркер тусклый и неуверенный, надо бы уточнить. Сказано-сделано, вчера с утра гоню форез, нанес с десяток вариабельных проб и штучки три невариабельных плюс маркеров до кучи. Сижу, жду. Смотрю результат. Крыша медленно съезжает. НИ ОДИН результат не совпадает с тем, что получилось в прошлый раз. СОВСЕМ. (Вспоминается история про знакомых компьтершиков, которые целый день бились с компом, а потом выяснили, что в сети 160 вольт). Пол часа пытаюсь сопоставить полученные «результаты» с картиной мира, не получается. Находится закономерность – все с точность до наоборот. Sic! Значит не геном рассыпался, а мутация в регуляторном гене. Смотрю время первичных форезов, и в самом деле 13ый закончился в 8 вечера, а 14ый в час дня. Меняю названия файлов, все становится на круги своя. Иду пить пиво.

/ _Fox_ /


А я тут на днях осваивала методику определения активности по методу Шомоди-Нельсона. Суть в следующем: в результате реакции образуются альдегидные группы. В методе используются два реактива: один - содержит медь, которая, взаимодействуя с альдегидными группами образует оксид меди, он вываливается. А второй - молибденовый синий, образующий с медью окрашенный комплекс. Коллеги из соседней лабы, которые и учили, отлили реактивы мне в баночки и отпустили после тренировочново измерения (успешного) в свободно плавание. А баночки-то я и не подписала. Один реактив - желтенький, другой синенький.
Меряю один раз - ничего, 2-ой - ничего. Увеличиваю количество измеряемого фермента - ничего. Три дня мучилась.
Естественно, я перепутала реактивы и порядок их добавления. И нет бы задуматься, что соли меди синенькие.

/ Anna P. /


У нас с Гобочкой была предушевнейшая история. Поставил наш босс опыт - заказал цыплят нужного возраста, два дня ездил, обучал их там чему надо (поил-не поил, и т.д. - Гобочка лучше знает), потом забил их, извлек мозги со всеми предосторожностями и привез - РНК выделять. Мы с Гобочкой друг друга уважаем, дело свое знаем, и так у нас все слаженно идет - образцов много, варианты опыта там, повторности, все мы делаем - по протоколу, переносим-ценрифугируем, капаем, подписываем, беседу заодно ведем....Опомнились тогда, когда оказалось, что одних повторностей в два раза больше, чем было, а некоторые варианты опыта пропали...Просто варианты шли с интервалом 2 часа, и Гобочка подписывала пробирки как "2h", а я их воспринимала как 24 - зачем на промежуточных пробирках писать "h"....
В общем, через 2 недели босс пришел с новым контейнером, вручил его Гобочке и сказал "сейчас ты пойдешь, и без ЧьЕй БЫ ТО НИ БЫЛО ПОМОЩИ...."

/ _zelensky_ /


Формирую тут на днях очередную мышиную семью. Самец уже сидит в клетке, дело за парой самок. Ну, как положено, подбираю нужные генотипы по журналу, нахожу соответствующие клетки (две: по одной мышке с нужным генотипом в каждой), беру мышей, сверяю по ушным меткам, подбрасываю к самцу, пишу этикетку, вешаю на клетку, и смотрю, что же там у меня происходит. А происходит странное. Одна из подброшенных мышей а) активно гоняет самца; б) пытается сделать садку на вторую самку.
Тю, думаю. Такое впечатление, что это самец – а если нет, то что это, лесбиянка какая-то мышиная? Но с другой стороны, вроде ж взята эта мыша сомнительная из клетки с самками; если б там был самец – то была бы уже куча беременных, а вроде бы не замечалось там такого… пока в голове крутятся эти мысли, сую руку в клетку с намерением выловить "возмутительницу спокойствия" и посмотреть на нее на предмет половой принадлежности.
А надо сказать, что как раз в этот момент старый самец решил в свою очередь хорошенько проучить новоподсаженного нахала. Бросился и укусил. Меня. То ли промахнулся - то ли сослепу решил, что это еще один чужак в клетку лезет; в общем, капитально так хватонул зубами за палец.
Короче, достаю я того мыша, с которого весь сыр-бор начался. Да, самец. Смотрю на этикетку той клетки, из которой он был взят (и в которой сидят явные самцы). Да, так и обозначено, причем моей же собственной рукой: самцы. В журнале, естественно, тоже "копье Марса" нарисовано. Где были мои глаза, и где были мои мозги – непонятно.
Пора идти в отпуск.

/ L-2M /


В соседней лаборатории одной даме нужно было провести диализ фракций после хроматографии. Штук 10 мешков диализных было. Чтобы не перепутать, она их подписала. Маркером. Прямо по мембране. Ее потом чуть не уволили.

/ Badger /


У нас на практикуме по биохимии на стеклянной доске пишут специальными маркерами. Потом губкой стирают. Один студент случайно (да, случайно) вместо маркера схватил карандаш по стеклу. Которым на пробирках пишут...

/ Datchery /


У другой моей подруги в лаборатории была одна студентка. Так ее колбы со средами можно было сразу узнать. Надписи были следующие: "Это", "Второе", "Не то"... и ниже всегда шла ее фамилия большими буквами.

/ Mice /



[править] Фенол, бета-меркаптоетанол

На заре туманной юности пытался высадить ДНК из фенола - он оказался сверху, т.к. водная фаза утонула из-за высокого содержания соли.. Продолжалось, пока хорошо не принюхался.

/ Гест /


Собрался выделять РНК, а выделять надо было много. Решил заготовить буферов про запас. Ну и замешал кислого фенола с хлороформом около литра. Разлил по подвернувшемся поликарбонатным бутылкам и запихнув все это добро в холодильник на 4 С на верхнюю полочку и отправился с чувством исполненного долга спать. Утром во всей лабе установился стойкий запах фенола и я почувствовал , что жить мне осталось не долго. Часов в 11 заявился мой микрошеф Вася произнес только одно слово "б...дь" и больше я его в этот день в лаборатории не видел. Как вы уже наверно догадались за ночь хлороформ растворил бутылки в вся эта чача залила холодильник. Вместо счастливого выделения РНК пришлось весть день работать по моей военной специальности - ликвидировать последствия химического заражения.

/ Sergeant /


Фенол... Сколько сладостных мыслей навевает каждому это слово! А чего стоит перегонка оного. В свое время, когда мы еще не покупали фенол (уже с оксихинолином) в растворчике, у нас была банка розово-красного кристаллического фенола, который при надобности мы перегоняли. Для того чтобы его перегнать, нужно было сначала, за день до самого процесса перегонки, эту самую баночку разогреть и перелить фенол в колбу.
Как-то раз, мы с другом решили, что надо нагнать новую порцию фенола. Поставили банку на баню (кастрюля с ватой, залитая водой), включили плитку, закрыли дверь в комнате и ушли в другой конец лаборатории в мою комнату пить пиво. За милым разговором, мы не замечали, как быстро летело время, а уж о феноле мы и вовсе позабыли. Через какое-то время, до нас начал доноситься легкий, до боли знакомый запашок... Посмотрев друг на друга, мы одновременно произнесли слово б...я(!!!) и побежали смотреть что осталось от банки с фенолом. Перед нами предстала замечательная картина: вся тяга (она не работала) была покрыта изнутри причудливыми разводами кристаллов фенола, в кастрюле с уже обуглившейся ватой (как хорошо, что не загорелась) и лопнувшей банкой, докипали остатки фенола. Далее, пришлось все мыть 0,1N раствором NaOH и проветривать всю комнату (благо дело было вечером) - рабочую комнату шефа, т.е. завлаба.
А совсем недавно я точно так же перегонял спирт (правда ничего не пил). Красивое зрелище - колба с кипящим спиртом, на ней переходник, а из него горит факел.

/ petr /


Вчера в лабе какой-то паразит разбил замароженную колбу с фенолом, и этот ледик положил под вытяжку невключенную ..... Это бал кашмар.

/ Гость /


Про ущерб любимой лабе - как-то надо не было добавить 200 мкл бета-меркаптоетанола. Синие новые носы как назло кончились - и я взяла мелкую пипетку и желтым носом набрала нужное количество этой вонючей ползучей жидкости. Дело было вечером, пипетку я сложила в ящик и ушла. Под утро в комнату было зайти невозможно. Воплей было! Пипетку и ящик я потом весь день отмывала, и лабу проветривала - воняло там все равно дня три. Вспоминали мне это долго...

/ ElenaRV /



[править] Ультрафиолет

Падлы!!! Гады!!! Это ж кто так делает ламинары!!!??? Кроме русских (когда сами еще делали (самый крутой был походный из вытяжки с перевернутым вентилятором над кухонной плитой)) и мадьяров, ни у кого не видел таких!!! В общем, потянуло тут меня на ... , решил ручками поработать в нашем R&D, а то стал забывать!!! Неделю возился тут с одним вируском, выделял, пассировал, мучился! И за 20 минут все загубил! Вчера днем пока клонировал, среду менял и т.д. клеточки у меня стояли в ламинаре открытыми, без крышечек в плашках. Вечером дома смотрю, а у меня ручки-то по локоток загорелые такие, красивые, точно по закатанный рукав халатика. Утричкам глянул на свои клеточки сегодня, с вируском, а они все того, помирать собрались, скукожились.
В общем, в старом ламинаре, UV лампа встроена так, что ее не видно, когда она работает при ярком дневном свете, а выключатель вообще с боку и не понятно включен он или нет. Опять повторять! Или ну его, пойду лучше бумажечки лисать и по клаве клацать ...!!!

/ CowDoc /


У нас так народ себе глаза обжег... А китаицы часто включают [UV], а ламинар стеклом не закрывают и сидят в метре, клетки считают, блин! Осторожнее с UV!

/ MHC II /


А я как-то сгорела, вырезая бэнды из геля под UV, в очках, но без экрана. Когда на следующий день, с красным лицом, я пошла в аптеку за мазью от солнечных ожогов (а был март месяц), там мягко говоря удивились "Как, уже?"

/ Alice /



[править] Огонь

Я помню в самом начале своей работе в лабе хотел по-быстрому простерилизовать поллитровую пластиковую Налгеновскую колбу с крышкой. Туда планировалось залить стерильно среду. Не придумал ничего лучшего, как налить в эту емкость этанол, кубиков 10-20, смочил ее всю изнутри и чиркнул спичкой. Столб огня из горлышка был очень красивый и длинный, хорошо, что все это проделал на мойке - кругом плитка и вода. Все произошло быстро, но народ в лабе долго бегал с выпученными глазами.

/ zmich /


Как я чистил 2х фазным методом. В бытность аспиранта (лет 20 back 8-) решил опробовать 2х фазный метод очистки вирусной суспензии, перед концентрированием и градиентом. Решил - опробовал, в кач. реагентов (декстрана не было) решил, что попроще. Ну и взял хлороформ с эфиром. Попробовал в малом объеме, красиво, по белку, да и по ОВБ, результаты отличные. Решил провести в большем объеме 20 л бутыль! Но что значит не было раньше ламинаров (да и сейчас нет у многих на производстве), а привычка работать в пламени вбивалась на мертво, на уровне инстинктов, в общем все замешал, разделение пошло, и автоматически открыл бутыль в пламени... Кто служил в Red Army и видел действие ранцевого огнемета, тот может представить что было! Хорошо на морде была маска и глаз почти не было видно, но осветил всю округу и всю лабораторию красивейшим ярко-красным салютом! Больше так я не чистил вирусок в больших объемах (хорошо до 2 т реакторов-ферментеров не добрался).

/ CowDoc /


Совсем недавно делал гистологическую проводку. Надо было ксилол с парафином быстро растопить, но ксилола на тот момент не было, сделал парафин с толуолом. Ну консервная банка получилась полная. Рано утром пришел первый на работу, поставил эту банку на плиту (в гистологической печке долого). Ходил, ходил что-то делал, вспомнил про эту банку, кинулся к плите там все это дело благополучно расплескалось и красиво так горит в пределах одной камфорки. И вот я ничего лучше не придумал чем воды туда налить... Столб пламени высотой до потолка - исключительное зрелище. Пока вся эта хрень не догорела я к плите даже подходить не стал. Все кончилось, плиту протер, окна открыл, из них дым столбом, дверь в мойку на замок. Заходит шеф говорит: "Так быстро прибираемся, сейчас телевизионщики придут, А чем это горелым пахнет?"

/ _marker_ /


А ещё, говорят, был случяй, кажись с китаянкой, она только пришла в лабу. В общем, как-то утром рано приходит кто-то в лабу, ещё нет никого. В лабе стоит сильный запах газа, ну этот самыи некто, естественно, бросился искать источник, нашёл, кто-то горелку газовую оставил с включеннои подачеи газа, а сам газ почему-то не горит. Ну, выяснили, что это была эта китайка, спрашивают у неё, как дело было, а она, простота такая, говорит: "А что, я затушила огонь, а закрывать зачем каждыи раз, кто-то будет опять использовать..." Думаю, это она по аналогии со спиртовкои. Хорошо, что в то утро не она пришла первая в лабу. Представляете, приходите вы в лабу, а лаба на улице.

/ n /



[править] Электрофизиология

Биостанция в Кропотово, электрофизиологические эксперименты на простых нервных системах (ЦНС моллюсков), внутриклеточное отведение. Недавно "вошёл в моду" интерес к низкомолекулярным нейротрансмиттерам - а именно, к окиси азота (NO)... пробуем, а не будет ли чего интересного с активностью нейрона, ежели донор этого самого NO добавить в раствор: колемся в нейрон, пишем backgroung activity (она обычно нулевая), добавляем донор NO, ждём (в качестве донора взяли нитропруссид натрия - он в растворе быстро разлагается). ПРЕДВКУШАЕМ, ЛЮБОПЫТСТВУЕМ.
Поначалу ничего особого не наблюдалось. Потом один из препаратов с засаженным в нейрон электродом и включённым самописцем был оставлен на 45-60 минут без присмотра, приходим - по самописцу явный всплеск повышенной активности. РАДУЕМСЯ!
Все прочие дела приостановлены, неделя активных экспериментов: колемся в нейрон, пишем backgroung activity, добавляем нитропруссид натрия, ждём - через 40-50 минут наблюдаем увеличение частоты разрядов (сиречь - повышение активности). Регистрация очень чистая, красивая. СИЛЬНО РАДУЕМСЯ!!!
Вторая неделя экспериментов: всё то же самое, плюс попытки повоздействовать/заблокировать/усилить/ослабить эффект. Эффект стабилен, воздействию не поддаётся. Разряды всегда выглядят одинаково. ОЗАДАЧИВАЕМСЯ.
Примерно к концу второй (или началу третьей) недели этого форсированного марша в призывно распахнутые объятия Королевского Каролинского института, возникает мысль - мол, неплохо бы проверить верность избранного направления...
Препарат выглядит примерно так: ЦНС моллюска "сидит" в ванночке, омываемая раствором, регистрирующий электрод торчит в нейроне, референтный - плавает в растворе. Так что проведённая проверка была проста - всё то же самое, только никакой ЦНС в ванночке нет, оба электрода просто погружены во всё тот же раствор. Добавляем донор NO. ЖДЁМ... Через 40-45 минут получаем всё те же красивые одинаковые разряды...

P.S. ну, тогда то мы малограмотные были - объяснили всё накоплением заряда на референтном электроде. А сейчас вот думаю - ванночка то ведь при проверке использовалась та же самая, что и при экспериментах. Так может в ней эти оставались... как их там... волновые эквиваленты ЦНС моллюсков, а?... А?!

/ Ratte /


Что подобное было у нас на факультете. Пару дней регистрировали аномалную электрофозиологическую активность. Радовались. Оказались наводки от полировочного станка сосеdей геологов. Они к тому же контуру заземлились.

/ Piter- /


Последний ляп который случлся со мной и стоил месяца разбираний теоретическиких и практических. Измеряли быструю кинетику на одной волне. Прекраснейшая, интереснейшая картина. Задумались. Померяли на "многоволнотой установке" (вот проблемы, не знаю русской терминологии). Кинетика не та. Много чего пробовали. Оказалос что когда мы использовали включающийся/выключающийся свет для измерений в блоке питания ФЕУ возникали колебания (мать мать мать).

/ Piter- /


Я работал в области электрофизиологии, использовал микроэлектродную технику. Там в микропипетки добовляют хлорид калия в конц. 3М, а я по неопытности перепутал с 0,3 М (была плохая привычка абы как подписывать реактивы). Тестю я один гирбицидик на безопастность, а он мне выдает такие кривые, как будто это "сверхтоксин" какой. Думаю, вот оно открытие. А потом понял - ошибся :(

/ Аттенуатор /


Практика. Физиологи заочники (заглазники). Измерение калция фотометрическим методом (типа там где иончики в огне светятся). Ну как положено сделали. Калибровалку (в смысле растворы с разной концентрацией) меряють. Чето фигня получается. Оказывается они растворы на водопроводной воде из под крана делали.

/ Piter- /



[править] Спектроскопия

Дали мне пластиковые кюветы и говорят, мол, иди концентрацию ДНК померяй. Я говорю, что не меряют в таких кюветах ДНК. А моя минишеф важно так говорит: "Дима, если ты чего-то не знаешь, это не значит, что так нельзя делать!"

/ Гость /


Врачи в науке бывают очень забавны. Обычно в России врач или лечит или науку делает. На западе многих из них заставляют заниматься этим одновременно. Много раз приходилось видеть бедолаг, которые отстоят по 12 часов у койки больного, а потом ползут в лабу и в полуобморочном состоянии капают в пробирку.
Прибегает как то раз ко мне девушка (врач) и в панике сообщает, что сломался спектрофотометр. Иду смотреть. Девушка мерила концентрацию РНК. У нее прибор в зашкале. Развела в 10 раз и опять зашкал. Опять развела. Зашкал. Ну и так далее. Достаю из прибора дешевые пластиковые кюветы (не UV-transparent). Ну и брякнул ей, что они не прозрачные. Девушка в ступоре и по глазам вижу, что сейчас мне бригаду из психушки будет вызывать. Еле успокоил ее и выдал ей кварцерые кюветы. Прибор заработал.

/ Sergeant /



[править] Клонирование

Делал я дрожжевой knockout. Проверял на southernе. Выделю геномную ДНК, порежу BglII и смотрю: вышиб-не вышиб... Раз смотрю, два смотрю. Неделю смотрю. Месяц смотрю. Нету правильных клонов. А контроли - на загляденье. А метода ведь простая. Пока я так тщательно смотрел - BglII закончился. Я чтоб не ждать другой фермент взял - хоть и не такой удобный. Сделал раз - и большинство клонов правильные. Оказалось: в ГенБанке ошибочка была, на один нуклеотид. и, разумеется, как раз в BglII сайте. Речь которую я произнёс, энто дело обнаружив, каждый хорошо себе представляет.

/ tolya /


А вот я с упорством достойным иного применения пытался пометить радиоактивностью ДНК порезанную по PstI с помощью достройки концов фрагментом Кленова. Так продолжалось недели три..., до тех пор пока не заглянул в каталог и не посмотрел внимательно на PstI. Эх, а было это аж 12 лет назад...

/ KGB /


А вот прошлонедельная история. Отклонировал я ПЦР продукт. Размером в 1.5 килобазы. В TOPO отклонировал, миниперп выделил - режу значит BamHI и XbaI глядя на карту TOPO. На форезе - бэндик размером в примерно 700 баз. Мдя, думаю, ошибся небось - еще одну колонию взрастил, порезал - та же фигня, а рестриктаз других и нетуть. Эх, думаю... судьба видать, взял да и отсиквенировал. И что оказалось? Что ПРЯМО в СЕРЕДИНЕ клона есть еще один сайт для Xba, и два куска ДНК на геле были настолько близки по размеру, что сливались. Такой вот опыт.

/ Olezhek /


Была - не была! Ляп из генно-инженерных манипуляций (для продвинутых юзеров).
Как-то уже давно, возомнив себя крутым генным слесарем, решил соорудить на месте BamHI сайта ClaI. Все просто - режешь BamHI, достраиваешь кленовым, тут же лигируешь - трансформация. Возникает ClaI (для интересующихся полным списком возможностей - см. Biolabs).
Прикол то в том, что ClaI возникает, но НЕ РЕЖЕТСЯ! т.к. образующийся сайт ATCGATC имеет перекрытие с dam сайтом, и, соответственно A внутри GATC метилирован, что приводит к защите от гидролиза Cla. Долго я тра... ой! мучился, пытаясь приготовить вектор/ClaI.

/ Павел /


Тема dam/dcm-зависимых сайтов - это вечно... Буквально две недели назад я почти час медитировал над тем, почему XbaI не режет GFPшный вектор. Потом додумался посмотреть в ТТХ. В своё оправдание могу сказать только то, что дело было в воскресенье в первой половине дня.

/ Olegovitch /


Да, у меня тоже была история с коварной dcm-зависимостью... Пришлось готовить dcm- компетентные клетки, теперь вся программа их у меня стреляет А какая рестриктаза была, бог ты мой, - Sex AI!

/ Alice /


Курсе на четвертом, возомнив себя крутым генным инженером, решил замесить поболе вектора на основе pGEM-3zfP(кажется). Недели 2 упорно резал EcoRV а на форезе была все та же девственно целая плазмида. И только потом догадался посмотреть карту полилинкера.

/ Гость /


У меня пару раз были приколы с лигированиями. Первый случай, это когда я использовал как один из сайтов Ecо01051. Вектор и вставка не шились ни в какую. Естественно сайты Ecо01051 там и там были РАЗНЫЕ.

Второй раз, незадолго кстати после этого, было то же самое еще с каким-то сайтом, с каким к сожалению не помню. Там было лигирование по разным сайтам и прикол был в том, что сайт этот был непалиндромный и распознавался соответственно только на одной из цепей ДНК. И конечно получилось так что хвосты, образовавшиеся после рестрикции и вектора, и вставки, имели одинаковые последовательности.

Это было в самом начале моей работы в молекулярной биологии, но с тех пор я очень нервничаю, если у меня нет последовательностей векторов, с которыми я работаю.

/ Nameless /


Сегодняшнее: Два часа искал в интернете полный сиквенс плазмиды, чтобы загнать ее в Vector NTI и посмотреть, есть ли интересующий меня сайт рестриктазы (BsmI). Заглянул на вторую страничку описания этой плазмиды в рабочей папке, а там табличка, красивая такая: " Рестрииктаза | количество сайтов | где режет ". Почувствовал себя полным идиотом. Мораль: нефиг шарахаться по интернету, если можно заглянуть в бумажку и все там найти.

/ Ёлкин /


Один мой приятель в бытность свою студентом подходил в двойной рестрикции очень основательно. Он брал целую фасовку EcoRI и смешивал с целой пробиркой HindIII (за точность рестриктаз не ручаюсь) и далее этой смесью резал. Работает ;-).

/ Sergeant /



[править] Метка, антитела

Денатурировал как-то зонд (кипятил в бане несколько минут). дело в том, что иногда с руками случается приступ крюкости, или они забывают откуда надо расти, словом вынимая пробирку, уронил ее в баню. конечно же крышка отстрелила в лучших традициях вестернов (фильмов, не блоттингов). Я успел вынуть пробирку почти сразу, но конечно воды туда налилось... аж все 600мкл (ПЦРная она была). Думаю, что не нужно долго рассказывать, какая вода в бане была... Ну не очень свежая, из-под крана. А делать нечего, гибридизовать-то надо! Ну я и загибридизовал всей этой .....й. Прекрасно вышло, все покрасилось, просто красота получилась.

/ petr /


Денатурировал как-то один чел свой зонд 107 cpm в чайнике... Я это видел своими глазами, его чуть не убили!!!

/ Гест Гестович /


В детстве очень часто забывал денатурировать метку для блотов. Так мне записку большими буквами повесили типа про выключи телевизор. Было и обидно и смешно одновременно.
Ну, про чашки Петри тоже народ чудил - зажигалкой снизу подпалит, потом агар зальёт и говорит - смотри мол, какое чмо чёрное выросло. А неопытный глаз от колонии не отличит. Вот и я первый раз накололся.

/ Veshka /


Как то растил Е coli на хитро меченном изотопами глицероле (NMR). Пришел злой фаг и всех убил. Глицерол било очень жалко. Пришлось упаривать 10 литров среды а потом фильтровать через 30КДА мембрану. Два раза.

/ Aronich /


Какой компонент среды самый дорогой? Когда я этот вопрос задаю, народ обычно начинает перечислять типа пептиды или ещё что-то в этом роде. В моей практике был случай, когда самым дорогим компонентом среды была ВОДА. Да, да именно вода. Просто она была ТЯЖЁЛАЯ (с дейтерием вместо водорода), для NMR исследований колиных рибосом. Было это в начале 90-х, когда уже наша ядрёная промышленность начала загибаться, и халявный (или почти) источник тяжёлой воды закончился. Так там приходилось каждую каплю собирать и на регенерацию пускать.

/ Микробиолог /


Тестировал как-то на вестерне новые антитела. Причем старые были самопальные, а новые - покупные. Ряд разведений первых, ряд разведений вторых, старые для контроля. Проявляю Hyperfilm - в контроле все ОК, лайны с новыми - пустые. Т.е. вообще ничего не видно. Ну и, считая себя уже вовсе крутым спецом по блоттингу, тут же потопал к шефу вываливать ему свое мнение эксперта, типа "г$но эти сигмовские антитела, ни фига не видят тут концентрацию белка, от которой на самодельных сигнал просто дуром прет". Шеф повертел фильм и задумчиво так спросил: "а вторичные антитела те же брал, что для старых?" "Ну разумеется - говорю - кто же в эксперименте одновременно два параметра меняет!" "Тогда Вы получили идеально-хрестоматийный результат - ответствовал шеф - потому как старые первичные АТ овечьи, а новые сигмовские АТ - кроличьи, ну а вторичные АТ - анти-овечьи! Тут прекрасным образом доказано, что неспецифическое связывание отсутствует. Но в следующий раз возьмите все-таки вторичные анти-кроличьи".

/ Murat /


Лет десять назад, я смотрел динамику иммуногенеза у мышей на вирусные белки. В ИФА, сэндвич. Здорово все так получилось. Результаты - красота. И только когда начал писать материалы и методы, впал в ступор и надолго - коньюгаты-то взял античеловечьи! Пришлось все переделывать, единственное удовольствие было - сказать изготовителю коньюгатов все, что про них думаю.

/ vb /


А у меня довольно долго была привычка невзначай замораживать то, что замораживать не надо: антитела, beads для иммунопреципитации и т. п.

/ Гость /


Эх, была-ни была...Дело было недавно, что стыдно вдвойне. Работаю я уже год в англоязычной лабе, и вроде проблем с языком никогда не возникало. А тут, с полгодика назад, приходит посылка - какой-то реагент. И на нем аршинными буквами написано "refrigerate upon arrival". Ну, думаю я, фермент какой. Надо скорее на -20, а то "сдохнет". Решено - сделано. Тихо проходит неделя. Как-то утром захожу в лабу - а на меня научрук странно смотрит. "У нас проблема", говорит. Оказалось, что в посылке были антитела на 1,000$, которые я замораживанием благополучно "убила". Разницу между Freeze and Refrigerate я запомнила навсегда. Выплачивать не заставили - по счастливой случайности, т.е. чьей-то халатности, я не расписывалась в получении. А могли бы.

/ L. /


Да ладно, одним замораживанием антитела не убьешь.

/ Guest /


Пару лет назад ставлю я Саузерн в изотопке. И показалось мне вдруг, что я радиоактивным растворчиком капнула себе на туфлю. Не долго думая, взяла я тряпочку, которая попалась мне под руку, и протерла туфлю. ПОТОМ поднесла тряпочку к счетчику - считает. Разулась, поднесла туфлю - считает.
Надо сказать, что тряпочка считала вся равномерно, так что, если бы я ей не воспользовалась, мне не пришлось бы держать мою несчастную туфлю на распаде пару месяцев...

/ би-олух /



[править] Бактерии, чашки Петри

Первый опыт заливки чашек для кишечной палочки получился таким. Ращу культуру, устойчивую к ампициллину. Не растет. Спрашиваю, в чем дело? Советуют уменьшить концентрацию антибиотика. Уменьшаю в 2 раза. Не растет. А, говорят, если совсем без него? Не растет. Один из соседей потерял терпение, высеял у себя - выросло. Я сею в жидкую среду - ура, выросло! Потом на чашки - не растет. Мистика! Хорошо, кто-то обратил внимание на чашки, говорит, что-то какие-то они бледные, это на какой среде? Отвечаю, агар. Какой такой агар? Спрашиваю, а им разве еще что-то надо? Пусть едят, что дают. Оказалось, что чашки я приготовил на дистилляте! Тушите свет, занавес.
А вы говорите, мол, левомицетин там, хлорамфеникол...

/ AVS /


А я вот чашки первый раз в жизни готовил. залил, жду 1.5 часа - не застывают пошёл у знающих специалистов спросил - говорят - до утра оставь на столе - типа ничего страшного - застынут. утром прихожу - стоят жиденькие такие. На траблшутинге - просто агар добавлен не был.

/ Husker /


Шеф мой - человек с большим опытом общения с разного рода студентами. Одна из лучших историй из его практики. Был у него студент из Африки. И была у него одна особенность - в его руках не росли бактерии, если он высевал их на чашки. Пробовал он много чего хорошего и разного поменять. И место в лабе, и шпильки и петли и т.д. Ничего не помогало. Стали уже поговаривать о том что он своим местным шаманом заговоренный. Пока шеф ОЧЕНЬ внимательно не присмотрелся как же он это делает. А его чёрный студент набирал бактерий, и одним движением пальцев переворачивал шпильку. Хорошо работал, стерильно.

/ Februar /


К нам недавно на работу пришла одна дама (из наших, из бывших) и пришла как крупный спец в области мол. биол. и всех прилегающих наук (это с ее слов).
Примерно на другой же день она посеяла бактерии (100μl) в среду (100ml) и, не отходя от кассы, на голубом глазу, тут же принялась усердно выделять плазмиды. В каком экстазе ее босс - трудно описать!

/ zelensky /


А вот еще был случай. В лаборатории, где я сейчас работаю, лет пять назад закупились большими количествами зубочисток для скалывания колоний с чашек. И аккурат после этого у них перестали расти эти самые скалываемые колонии. Долго думали, в чем может быть дело. Наконец, внимательно прочитали, что написано на упаковке этих самых зубочисток, и выяснилось, что они обработаны бактерицидными составами! Чтобы в зубах всякая гадость не разрасталась... Никто же не думал, что вместо того, чтобы в зубах ковыряться, ими колонии скалывать начнут.

/ tupoi /


А у нас долго и безуспешно пытались перекалывать бактерии спичками. Потом все же догадались, что они с пропиткой. Самое смешное - как оказалось, мы были не первые.

/ escho tupee /


А на меня тут недавно помутнение нашло)) Вместо чашек Петри залила крышки))) От этих самых чашек естественно... Причем очнулась, когда уже сеяться собралась.

/ Гость /


Помню одного из генетиков в ИБФМ, который пытался работать с метанотрофами... Мы долго не могли понять, почему у него ничего не растёт - перепроверили все соли, рН, температуру, всё-всё, пока кто-то его не спросил, какой источник углерода он использовал... На что он нам ответил: как какой? глюкозу, естественно!
На наши робкие замечания, что метанотрофы НЕ растут на глюкозе, нам было заявлено, что на глюкозе растёт ВСЁ, главное только условия подобрать...

/ Микробиолог /


Был у нас такой случай в лаборатории уже в далекие времена. Работа шла с дрожжами, у одного студента получались ну очень интересные результаты, которые никто не мог объяснить. Этого студента отличало трудолюбие и аккуратность, прямо-таки педантичность - все что он делал, подробно записывал в рабочий журнал (!!!). При разборе его работы оказалось, что он всегда использовал только одну печатку, которую никогда не стирал.
Печатка - бархатная тряпочка, служит для переноса клеток с чашшки на чашку.

/ Гость /



[править] PCR

Писиарил как-то один фрагмент. Смотрю на гель - куча неспецифических бендов. Надо наверное температуру отжига повысить. Заряжаю ПЦР еще раз. Смотрю в свою программу, а там вместо 25 циклов 45 стоит. Промахнулся, понимаешь.

/ Andron /


На прошлой неделе гнала 4 геля, 2 разных белковых экстракта, каждый экстракт - 2 разные концентрации - с благой целю, сравнить и выбрать что-то одно для последующей работы. 4 геля, 2 форезных камеры, которые подписала со стороны каждого геля, но вот когда вынимала не глянула , что откуда вынимаю , помню только, что слева был один экстракт, справа другой, а какая концентрация - а пeс ее знает, ну ни блинство ли это?

/ wild type mutant /


А еще, классно идет PCR с Taq-рестриктазой...

/ Sergey Lavrov /


Переписывал протокол на ПЦР и не заметил что дальше в скобках стояло на 7 проб. В результате 3 раза гонял ПЦР и ничего не шло - конечно в 7 раз больше полимеразы и буферов добавил.

/ misk /


Никогда не забуду свою первую ПЦР. Пришли мы с моим другом-одногруппником (привет, Костян!) в лабораторию и через некоторое время нам доверили самостоятельно поставить реакцию, залить гель, поставить форез - ну в общем полный фарш и радости немеряно! Замесили мы все (каждый свое), поставили в амплификатор, залили гель - довольные! Нанесли ампликоны в лунки, включили источник питания. Сидим, ждем. И тут мы начинаем потихонечку испытывать чувство легкого недоумения - лидирующий краситель движется не вперед, так сказать, а в обратную сторону! Да и выглядит как-то коряво... Ну мы ребята умные, сразу подумали, что перепутали полярность. Да нет же, все в порядке! Позвали шефа - он тоже в недоумении. Говорит: "Первый раз такое вижу!" Ну что делать, положили на трансиллюминатор, посмотрели... Мама дорогая, а ампликоны-то видны (к сожалению, только у Костяна, как потом оказалось, я забыл добавить полимеразу), а лидирующий краситель в ультрафиолете переливается какими-то неземными цветами и расплылся в геле удивительными разводами! Да что такое?! Потом наш шеф и спрашивает - где мы, мол, брали буфер для нанесения? Ну мы и показали эту бутылочку. Удивившись, а чего это он ржет? Оказалось, что вместо буфера мы добавили бромфеноловый синий, который по чистой случайности оказался рядом.

/ ekimok /


Возился я как-то с Нозернами, месяца два. Кончились зонды, пошёл-залез в холодильник, взял полимеразку, нуклеотиды, буфер, раствор Mg, всё замешал, поставил ПЦР. Разогнал на форезе - забор какой-то. Ну ничего, мы не гордые, вырезал нужную полоску, подумал - концентрация-то маленькая, дай-ка переставлю, температуру отжига сделаю повыше, фрагмента будет больше. Сделал. Опять забор. Ох ты, думаю, надо ещё температуру повыше, и циклов поменьше.
Сделал. Опять забор.
Ну, думаю, может праймеры разведенные, испортились как-нибудь? Пошёл поискал у народа, взял оригинальные, неразведённые. ДНК-матрицу одолжил, на случай, если моя протухла.
Сделал. Опять забор.
Да шож, думаю, такое? Никакой работы! Может, думаю, полимеразу какую новую стали выпускать, или ещё что? Выудил инструкцию из пакетика от полимеразы, почитал... Тьху! Оказывается, за два месяца, пока я в ПЦР-ный ящик не лазал, буржуи повыкидывали весь ПЦР-ный буфер без Mg (который отдельно надо было с Mg смешивать), и стали покупать полимеразу с буфером, в состав которого уже входил Mg. Одну пробирочку с раствором Mg в общей коробке оставили, для меня, как видно... я этот самый Mg так и продолжал подмешивать по старинке...

/ _Kostia Inochkin_ /


Молодой и талантливый аспирант из нашей лабы ставил ПЦР. А делал он мутагенез и это был уже второй ПЦР. А задумка была следующая: прогнать 5 циклов без праймеров, чтобы насинтезировались фрагмены подлиннее, а затем только добавлять праймеры. Ну, прошло 5 циклов, нажал кнопочку "Pause" на приборчике, добавил праймеры... И тут прибегают какие-то важные люди и начинают срочно требовать что-то там его починить, как технического специалиста по компьютерной технике.
Часа через 2 мы заметили, что кнопочку "Pause" никто так и не отжал. А было на приборчике в тот момент 95 градусов. Не отвлекайте молодых талантливых аспирантов!
Жалели мы потом, что так и недогнали ПЦР доконца... А вдруг!

/ Anna P. /

Не выделялась бактериальная ДНК из чистой культуры, присланной под грифом секретности. Соответственно на вопрос, что это за культура, к какому роду относится и что за полупрозрачная жидкая среда на которой ее выращивали, нет ответа и все тут. Из этой полупрозрачной среды сказали выделить ДНК и поставить PCR, при этом не задавать вопросов. Ну страх и только! А вдруг это - сибирская язва!? Пробовала тотальную ДНК выделить из осажденной массы, получила на агарозе еле заметный бэнд, но не идет ПЦР с праймерами на 16S rDNA, ну хоть тресни! Говорят, что даже из одной клетки можно выделить ДНК! Ставлю вопрос ребром - а есть в Вашей культуре клетки? Ответ: Конечно это чистая наращенная культура! Это вы не можете, а мы Микробиологи-культуральщики! В итоге пришлось самой стать Микробиологом и под микроскопом поискать бактерии, но увы Дорогие мои - в поле зрения только одна сомнительная клетка или пятно-красителя. Вообщим, чтобы надо уметь не только ПЦР ставить, но и выращивать бактерии! markaigai

[править] Форез

А вот кстати на самой заре трудовой деятельности, когда училась ставить агарозные гели двухполосица была. Мне же тогда никто не объяснил, что лунки не должны быть сухими. Зато потом была целая дискуссия: почему это у меня вместо одного продукта - два, да еще такие красивые:-)

/ pumeria /


У меня в Канцере было две любимых привычки:
(i) замешивать агарозу на воде, и
(ii) пускать гель в другую сторону.
Первую привычку я поборол: написал крупными буквами на колбе: НАЛИТЬ TAE. А вот со второй было сложнее... Если уж вставил черный провод в черный паз на форезнице (что тоже не всегда случалось, мне интуитивно кажется, что должно быть наоборот), то значит, кто-то до меня вставил этот провод в красный паз на источнике питания.

/ a11 /


Денатурирующий электрофорез с мочевиной в буфере никто не ставил? Был и такой опыт!!! А объем аппарата 1 литр, а мочевина — 8 М.

/ foma /


НИКОГДА! не гоняйте ДНК-овый форез на 1хSSC...

/ Sergey Lavrov /


Расплавленная агароза долго остывает, а я спешил. Дай, думаю, в снег ее засуну. А потом думаю: лопнет ведь стекло-то. И, как всегда, не ошибся.

/ artemboudilov /


Ставил однажды форез. Краска стоит на месте - час, другой... Проверил все, буфер есть, напряжение большое, адекватный ток в системе протекает. Позвал на помощь, потому что не до смеха - может уже крыша поехала? Консилиум прошел тоже без пользы - уже и третий час, а краска ни с места. Просто дурдом. Наконец, оказалось, что у меня закончился бумажный скотч, и, когда я заливал гель, то использовал прозрачный, а оторвать его забыл.

/ PASSERBY /


Подтверждаю правоту PASSERBY в истории с прозрачным скотчем. У нас в лабе этот феномен долгое время был граблями для практикантов (после купили цветной). Один из них умудрился в спешке шесть раз неправильно залить гель: то без гребенки, то без скотча и т.д. Последний раз, когда уже вся группа собиралась расходиться, сожалея о несостоявшемся зрелище, оказалось, что гель был на воде.

/ antihistone /


Я вот тоже историю про стоящий несколько часов форез вспомнила. Знаете что это было? - Я буфер налить забыла

/ _ol'ga_ /


Ставил как-то SDS-PAGE, а электродный буфер попросил сделать студентку (4 курс). Все нормально прошло, но не прокрасилось. Вот блин. Сделал свежий краситель, повторил форез с этим же буфером, опять не красится. Так бы я еще долго делал, если бы сам не приготовил элетродный буфер. Все отлично прокрасилось!!! Оказалось она ошиблась в рассчетах и переборщила с SDS. Как говорится: "Доверяй, но проверяй!" Золотые слова! :)

/ Гость /


Красил я однажды ДНК в геле серебром очень поздно вечером. Дошел до финальной стадии. Тупо стою - смотрю в кювету. Начинаю видеть полосы, но совсем не там, где нужно. Проходит минут 10. Я в панике, думаю, что не так. В общем, я забыл гель положить в раствор. Он мирно лежал рядом, надо было голову повернуть. До сих пор не представляю, как я сумел так лажануться.
Люди! Не работайте до 11 часов ночи!!!

/ YaD /


11 часов - это не ночь, а вечер

/ Xantin /


Ну это смотря когда начинать, если в 5 утра, то 11 вечера - глубокои ночью покажется.

/ MHC II /


Однажды, работая в клинико-диагностической лаборатории , я развела буфер для фореза ПЦРов раствором перекиси водорода вместо воды. Эффект потрясающий. В ультрафиолете полоски исчезают за несколько секунд. Вот они были - и их больше нет. А десятки страдальцев уже бьют ногами в дверь, требуя своих хламидиозов и гонорей. Ужас, в общем.

/ mouse in trans /


А вы никогда не пробовали для приготовления TBE взять не основнои трис, а трис-фосфат? Очень красиво. Через полчаса фореза бромфенол за несколько секунд желтеет! А ДНК размазывается не то что по всей дорожке, а вообще по всему гелю!

/ tupoi /


Что характерно, ровно то же получится и с трис-хлоридом, и со многими буферами с недостаточной буферной емкостью. Кстати, если там не ДНК, а короткие олиги, они не размазываются, но после закисления начинают идти в противоположную сторону, пока в лунки не выскочат.

А вообще-то рН буферов иногда все-таки не вредно измерять.

/ Гость /


1. Однажды, еще в студенческие годы я приготовил агарозу для ДНК-ового фореза на воде и очень долго удивлялся, глядя на то, как она сворачивается в трубочку после подключения источника питания.
2. Свой первый вестерн я тоже замечательно сделал. Взял ПВДФ вместо нитроцеллюлозы. Еще, помню, недоумевал, почему мембрана не смачивается буфером для переноса. Так сухую и использовал. Картинка получилась - жуть...

/ _Sanya_ /


Месяц пытался поставить белковый форез. Белковая картинка либо отсутствовала, либо была какая-то корявая. У всех кого ни спросишь все получается, а у меня НЕТ! Прописи компонентов делал по molbiol. И только в конец отчаявшись решил переделать все реактивы: дошел до электродного буфера, а в заглавии стоит таинственный значок Х5. Почему, думаю, 5, а не 1 и не 6? И тут как мешком по голове! ЭТО ЖЕ 5-ти КРАТНАЯ КОНЦЕНТРАЦИЯ!

/ Gritsko /


Тоже molbiol: готовила 10xTBE, добавила EDTA по весу как написано. Форезы как взесились. Полосы превратились в шмеры, появились фронты движения материала и т.д. и т.п. При разборе полётов выяснилось, что нужно было добавлять 0,5М раствор, а не сухой EDTA. Разница в концентрации - 6 раз, а какой эффект! 8 литров буфера до сих пор рука не поднимается вылить.

/ Botan /



Картинка была снята в нашем здании после того, как новый старательный студент попытался расплавить агарозу в плотно закрытом флаконе.

/ Андрей Яковенко /


Благодаря моему студенту, у меня теперь есть камера (Хеликон, SE-1), очень напоминающая микроволновку на фото. И не говорите мне, что Эльф-2 - маломощный источник. Жаль только своими глазами не видел как кипит форезный буфер.
Но самое смешное, что когда я посмотрел на утро в камеру, она была полна геля, потому как он не вылил буфер а так и оставил в камере. Естественно, когда буфер остыл, он превратился в агарозный гель. Заставил расчитать его концентрацию :)

/ _M/A/E_ /


Приставили ко мне недавно ундерграде студентку (американскую), ну я ей говорю в первый день - залей агарозный гель и постав форез с этими вот образцами, потом доложишь. Возьми ТАЕ буфер там-то и там-то. Ушел я значит по делам, возвращаюсь через час - она сидит с неприкаянным видом, шеф рядом какой то угрюмый. Я спрашиваю, ну, типа, как форез. А она мне говорит, что не могёт знать, так как образцы не наносятся, по причине того, что всплывают. Я в шоке. С глицерином и всплывают. Попробовал сам, действительно - всплывают. Понюхал буфер - вроде ТАЕ. Ну я её спрашиваю, ты чего туда наливала, она говорит, ну ТАЕ, я ей говорю - какой?
Ну она и показала - 50х. У меня случился полный финалис вагиналис. Такая вот правдивая история. А шишки все были мне. Собственно и правда - мой ляп. Ведь не думал же, что можно такое учудить.

/ artais /


У нас летний студент недавно оригинальный ляп отколол. Ему нужно было прогнать РНК. Прогнал, гель чистый, вообще ничего нет, даже шмера. Решили что мало нанес. Перегоняет еще раз с большим количеством- опять ничего. Тут уже начали его допрашивать с пристрастием, чтобы рассказал дословно, что он делает. Оказалось, он взял РНКу - нанес в лунку, взял буфер для нанесения - добавил в лунку. Включил форез.

/ Viktoria1510 /


Однажды новой девочке поручили залить агарозу, ее шефиня сказала: вот тебе десятикратный буфер, вот агарозка, а автоклавированную воду возьми вон там в шкафчике... Девочка все смешала, поставила греть... Греет... Греет долго... Гадская субстанция не хочет не то что превращаться в раствор, даже до кипения еще далеко, хотя плитка жарит будь здоров. Потом до меня дошло, что вязкость у энтой субстанции какя-то неправильная. Спрашиваю: Ты воду где брала? Девочка показывает колбу. Какая-то редиска не стерла надпись ddH2O с колбы, когда наливала минеральное масло...

/ error /


В нашем отделе (давно праявда это было) была стажерка из "мукробиопрома" который в Противно. Дык она являлась основательнитей "еффекта Филоновой" фамилие у ее такое было. Ставила ДНК форез исключительно на воде. Или еще аспирант в нашей лабе в качестве контроля на мечение ДНК наносил на ТСХ воду... как он мине сказал в качестве отрицательного контроля.

/ Tom1 /


Дважды двумя разными сотрудниками было независимо обнаружено, что агарозный гель почему-то не тонет в ТБЕ-буфере (и в ТАЕ тоже). Плавает себе. Потом выяснялось, что буфер заливали из бутылки с надписью ТБЕ 10Х.

/ Гость /


Да, блин, забавно почитать кто как отличался. Хороший топик. Веселые ляпы. Ну у меня в копилочке тоже кое что есть. И не только на заре своего молбиольства, когда гонять гели, залитые на дистилляте, меня учили "опытные" сотрудницы, когда в NaOH/NaCl денатурировал РНКовый гель перед переносом, когда Тм праймеров была выше 72°С, и т.д. с чем может столкнуться человек, учащийся работать сам по себе и по разговорам. Все это ерунда, в прошлом. Но когда сейчас случаются такие ляпы. Долго потом смеешься.

Выделял я тут давеча плазмиду... обычную pBluescript из DH5a, без какой либо вставки (так наработать побольше). А ее нету блин! Вроде все нормально, на XGal'е - синие, в среде растут на двойном ампициллине, выделяю - РНК! Уж и так и сяк выделял, и таким и сяким методом, и у народа спрашивал в чем дело - только руками разводили. Разве что до форума не дошел (стыдно). Словом плазмида должна быть, а вместо нее выделяется РНК! В конце концов оказалось, что я плохо обрабатывал РНКазой, и в форезе РНК шла по треку перед плазмидой и как губка собирала на себя этидий. На плазмиду его не оставалось, и я ее не видел просто. А когда гель однажды полежал несколько часов (были лишние лунки и я в них еще что-то разогнал) там оказалось столько плазмиды!

/ petr /


[править] Акриламид

Самые острые ощущения я получал когда заливал гель между стекол для сиквиенса в первые разы. Заливаю из шприца сосредоточенно, смотрю как - гель течет-течет и, хлоп, - на тебе - пузырь внутри. Я в печали, мою стекла, готовлю новый гель, - хлоп, опять пузырёк внутри, ну не затекает этот гель ровно. На ПЯТЫЙ раз зашедший в лабораторию случайно в выходные старший по званию японец увидев мои мучения так скромненько подошел и показал, что если при процессе заливки легонько так пальчиком постукивать про идущему фронту геля, то пузырьков и не образуется. Но воскресенье было уже безвозвратно утеряно.

/ Olezhek /


Наши соседи дико боятся акриламида (канцероген и всё такое ), посему постоянно одалживали раствор у нас. В конце-концов, совесть что ли проснулась, приносят 50 кубиков 30% АА, типа вот развели отдаём, "профильтрованный. Растворчик сей за ненадобностью, был на некоторое время отставлен в сторону, а когда свой закончился, решили чего уж там, пропись-то одна и люди вроде как серъёзные.
А теперь представьте: после включения тока концентрирующий гель начинает плавно двигаться в разделяющий, белки при этом (а у нас маркеры сразу видимые, для блотта) во всём этом безобразии, бедные, вообще не знают где деться . Переделываем все буфера, прокленаю камеру, пробы, методику фореза - не помогает . В общем с третьего раза доходит: переделываем раствор акриламида... Все Ок. А теперь вопрос: и что же такое они добавили в этот самый раствор?

/ OLS /


Несколько лет назад одна девушка в нашей лаборатории после долгого перерыва вернулась к лабораторному столу. За время перерыва у нее кончились (протухли, пропали) растворы-стоки, поэтому ей пришлось побираться у сотрудников. Подошла она и к аспирантам, ко мне и к еще одной девушке, и стала просить BSA для ей одной ведомых целей. Мы ей дали стандартный замороженный сток (10 mg/ml), что вызвало недоумение: почему заморожен?! Не дав недоумению развиться до иных, менее приятных изъявлений своего неудовольствия, вероятно вспомнив, что она, как-никак, сторона просительная, и "нужно брать, что дают и бежать домой, пока автобусы ходят" девушка (кстати, ст. лаб.-исследователь, после ВУЗа, аспирантуры и нескольких лет работы в лаборатории) исчезает из нашего поля зрения, а через час примерно в воздухе всех лабораторных комнат повисает вопрос, нет, не вопрос, а уже после 2 часов, прошедших после "побирательства", душераздирающий вопль: "ПОЧЕМУ НЕ ЗАСТЫВАЕТ?"
Оказалось, что "вышеизложенная" девушка-ст.лаб.-исследователь и прочая и прочая и прочая, заливала акриламидный гель и просила ПСА (!)- персульфат аммония. Не удосужившись посмотреть на этикетку, где зелёным по голубому было написано:"BSA Acetylated, 10mg/ml", т.е. 1%-ный раствор, вот его-то она и влила в акриламидно-мочевинную смесь, да еще ТЕМЕД добавила и между стекол залила!

/ Ig /


Когда я второй раз взял в руки сэмплер и очень-очень хотел что-нибудь сделать для молекулярной биологии (курсе на третьем), мне доверили накапать ТЕМЕД в а/а гель. Помнится, 18 микролитров надо было. Набираю я первые две цифирки "1" и "8", а третью - "0". Капаю. Я никогда больше не видил, чтобы гель застывал на половине заливки при вытекании из стаканчика Сэмплер оказался на 200 мкл.

/ Sergey S /


У меня был чудный случай, называется "как я избавлялась от остатков акриламида". Припоминаю что-то вроде "надо заполимеризовать, жидкий выливать нельзя - токсичный". Да, правильно угадали... Капаю туда ПСА, НЕ РАЗБАВЛЯЯ 40% раствор, и ухожу по делу в персонель. А процесс между прочим, экзотермический. По возвращении вся лаба в возбужденном состоянии, перед прыгающим и шипящим стаканом, типа, русские взрывают лабораторию :)) К счастью, взрыва не случилось :) все отделались легким испугом.

/ Alice /



Личные инструменты


Инструменты




molbiol.ru  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---


molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов     Rambler's Top100 Rambler