Regeneration of Dynabeads

Материал из Zbio

Перейти к: навигация, поиск

Содержание


  1. resuspend used Dynabeads (Vµl — original volume);
  2. 3x denaturation (and RNA degradation):
    ○○○   resuspend in 1x Vµl of 0.1M NaOH;
    ○○○   vortex and pulse spin;
    ○○○   incubate at 65°C, 2 min;
    ○○○   magnetic rack 1 min and remove supernatant;
  3. 4x wash (untill pH<8):
    ○○○○   resuspend in 1x V of S-buffer;
    ○○○○   vortex and pulse spin;
    ○○○○   magnetic rack 1 min and remove supernatant;
  4. resuspend in 1x V of Storage Buffer, sign "regenerated oligo(dT) beads";
  5. store at +4°C




[править] Solutions

prepare solutions using Ambion's buffers

[править] 0.1M NaOH

store at NT

conc.stock5ml10ml
NaOH0.1M1M0.5ml1ml
H2O mQ4.5ml9ml



[править] S-buffer

Storage Buffer, store at +4°C

conc.stock5ml10ml
Tris-HCl, pH7.5250mM1M1.25ml2.5ml
EDTA20mM0.5M200µl400µl
Tween2010%0.1%50µl100µl
Sodium azide10%0.02%10µl20µl
H2O mQ3.49ml6.98ml





Личные инструменты


Инструменты




molbiol.ru  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---


molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов     Rambler's Top100 Rambler